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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PARA LA
CERTIFICACIÓN FITOSANITARIA DE MATERIAL DE
PROPAGACIÓN DE EXPORTACIÓN
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Capitulo 6
1
VI.- CONDICIONES DE CAPTACIÓN DE MUESTRAS
6.1.- Tipo de muestra
Una correcta determinación a nivel de laboratorio, depende en gran parte de la calidad de
la muestra recibida. Los inspectores de terreno deben tomar todas las precauciones
necesarias para que la parte de la planta que será analizada llegue en óptimas
condiciones al laboratorio.
Muestrear en lo posible plantas completas, incluyendo el sistema radicular completo. Se
debe incluir la tierra adyacente con humedad suficiente. Si el tamaño de la planta no lo
permite, se deben trozar las partes comprometidas.
En el caso de plantas con fruto, ejemplo tomate, previo al despacho de la muestra retirar
los frutos.
Muestras a distancia, se sugiere enviar planta completa. Esto permite que la planta se
mantenga en mejores condiciones de turgencia hasta la llegada al laboratorio.
Existen algunas enfermedades que producen síntomas secundarios en el follaje, es decir,
los desórdenes se manifiestan en la parte aérea, pero el organismo causal se localiza en
otro sector de la planta como el cuello y raíces. Ejemplo: Phytophthora, Alternaria
radicina, Erwinia carotovara, Fusarium spp.
Para el caso de nematodos, que se soliciten determinar durante el crecimiento activo, por
ejemplo, Ditylenchus dipsaci, se debe enviar muestra de planta y no de suelo.
6.2.- Número de muestras
Dado que el muestreo es dirigido a captar plantas con síntomas de las plagas solicitadas,
es más relevante tomar según esta condición de las plantas.
6.3.- Época de muestreo
Se debe llegar al estado fenológico que mejor exponga los síntomas característicos de la
enfermedad.
En términos generales, la primera inspección debiera realizarse en el periodo de
crecimiento vegetativo o prefloración y la segunda desde el periodo de fructificación en
adelante.
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A modo de ejemplo se recomienda:
Huésped
Leguminosas (fréjol, arvejas)
Cucurbitáceas (zapallo, melón)
Solanáceas (tomate, pimiento
Maíz
Maravilla
Lechuga
Brassicas (repollo, coliflor)
Estado fenológico
Llenado de grano
Fruto formado, antes de madurez cosecha
Fruto de pintón a maduro.
Postfloración y grano dentado
Postfloración y llenado de grano (ej. Sclerotinia
sclerotiorum)
Fase vegetativa antes de botón floral (ej:
Plasmopara halstedii)
Emisión de tallo floral
Formación de silicua, Emisión de tallo floral
6.4.- Envío de muestras al laboratorio
El envío de muestras al laboratorio, debe realizarse de acuerdo a las siguientes directrices
dadas por los respectivos laboratorios de Lo Aguirre, y enviando la muestra con los datos
solicitados en el anexo 15
6.4.1.- Laboratorio de fitopatología
Instructivo captación y envío de muestras al laboratorio de fitopatología
La captación de una muestra debe ser representativa del universo y ajustarse a las
instrucciones que más adelante se indican, teniendo en cuenta el tipo de sintomatología,
especie vegetal o partes de ellas que se muestrea y los objetivos del diagnóstico. Es
necesario enviar toda la gama de sintomatología observada en terreno, desde plantas con
síntomas iniciales hasta aquellas muertas.
I.- Muestreo dirigido.
1.- Plantas o árboles con decaimiento general, detención de crecimiento, marchitez,
defoliación y/o amarillamiento general, caída de almácigo.
Muestrear en lo posible plantas enteras, incluyendo el sistema radicular completo,
sin destruir las raicillas.
Si los árboles son muy grandes, enviar muestras de raíces con tierra adyacente o
tejido del cuello de la planta y ramas con síntomas o presencia del agente causal.
2.- Plantas o árboles con cancros, heridas y/o gomosis.
Dirigir el muestreo a la zona con presencia de síntomas, incluyendo en la muestra
la zona de avance de daño.
Enviar ramas o ramillas ya muertas, en caso de presentar formación de cuerpos
frutales o desarrollo de micelio.
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3.- Frutos, vegetales carnosos, bulbos, tubérculos, etc., con manchas o pudriciones
descartando los con avanzado estado de descomposición.
Seleccionar muestras que presenten todas las etapas de infección.
4.- Hojas, brotes, flores y otras partes vegetales con coloración anormal, deformación,
desarrollo de micelio, pústulas, carbones, brotación anormal, quemaduras o
manchas, tizones o necrosis.
Captar la rama o ramilla completa, incluyendo madera de 2 o 3 años. En el caso de
cultivos anuales enviar la planta completa incluyendo sistema radicular.
Considerar que existen enfermedades cuyo síntoma secundario se manifiesta en el
follaje, como es en enfermedades de raíces, cuello o vasculares de la planta.
En caso de deformaciones, brotación anormal o vasculares, considerar dentro de la
muestra los ápices de las ramillas o brotes nuevos cercanos al daño.
5.- Plantas o árboles con agallas o tumores.
En lo posible enviar la planta completa o el sector comprometido, incluyendo tejido
sano. Enviar solamente la agalla no es suficiente para realizar un buen análisis.
6.- Plantas o árboles con pudrición de la madera, tallo y/o raíces.
En lo posible enviar la planta completa o la zona afectada, incluyendo la zona de
avance del daño.
En el caso de plantas ya secas, se pueden adjuntar éstas o sus partes afectadas, a
objeto de verificar estados avanzados del agente causal (cuerpos frutales, micelio,
etc.).
7.- Plántulas con síntomas de damping-off, césped, empastadas, etc.
Seleccionar sectores con distintos grados de daño y muestrear las plantas enteras
con el cubo de tierra correspondiente, cuidando que la humedad sea suficiente.
8.- Semillas o granos.
Obtener la muestra de acuerdo a las normas ISTA, procurando que ésta considere
síntomas de necrosis, manchado o deshidratado.
II.- Envío de muestras
La muestra una vez colectada no debe ser expuesta al sol y en el menor tiempo posible
(minutos) colocarla en una condición fría (nevera con geles de frío).
Si la muestra no va a ser enviada inmediatamente, se debe guardar a 4ºC, máximo dos
días y el transporte debe ser a baja temperatura o durante la noche.
Embalado de la muestra
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1. Envueltas en papel absorbente humedecido y luego en bolsas dobles de polietileno.
a. Tozos de corteza de tronco o cuello.
b. Trozos de ramas y tallos.
c. Ramillas con hoja.
2. Envueltas en papel absorbente humedecido con el sistema radical y cuello separado
del sistema aéreo, mediante bolsa, insertado todo en bolsa doble de polietileno.
a. Plantas herbáceas o leñosas enteras.
b. Raíces y raicillas.
c. Plántulas con tierra.
d. Plantas suculentas.
3. Envueltas en papel absorbente seco, cuidando previamente de eliminar la humedad
superficial de la muestra y luego colocar en envase de cartón o papel.
a. Tubérculos.
b. Partes suculentas (frutos, bulbos, etc.)
c. Partes vegetales con pudriciones acuosas.
d. Brotes tiernos.
4. En envase doble de polietileno
a. Semillas.
6.4.2.- Laboratorio de Nematología
Nematología: Instructivo de captación y envío de muestras
Obtención de muestras de suelo y partes de plantas para determinar la presencia de
nemátodos:
Los nemátodos son organismos pluricelulares, generalmente microscópicos y
vermiformes pertenecientes al reino animal. La mayor parte de los fitoparásitos mide entre
0,3 y 2,5 mm. Los síntomas generales de daño causados por nematodos son: disminución
del crecimiento de las plantas, pérdida de raicillas, nódulos o agallas radiculares,
amarillamiento, decoloración, defoliación, tendencia a la marchitez y bajos rendimientos.
El objetivo del muestreo de suelo y de tejido vegetal, es determinar por medio de análisis,
la presencia de nematodos, en forma cualitativa y cuantitativa.
Una muestra recolectada en forma correcta, es un factor muy importante en la obtención
de un resultado confiable.
Materiales requeridos para el muestreo:
- Pala o barreno para el suelo
- Bolsas plásticas
- Etiquetas
- Lápiz indeleble
- Cinta adhesiva
- Balde de 15 litros de capacidad
- Cuchillo o tijera podadora
- Envase aislante para colocar las muestras de
suelo y tejido de las plantas (raíces, tubérculos, bulbos,
hojas).
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Identificación de la muestra:
En la etiqueta deben consignarse los siguientes datos:
- Región
- Cultivo anterior
- Oficina
- Cultivo actual
- Localidad
- Fecha de muestreo
- Nombre del predio
- Observaciones (aplicación de nematicidas
- Nombre del agricultor
u otros agroquímicos
- Tipo de análisis nematologico solicitado (formas móviles o enquistadas)
Metodología de muestreo
Recomendaciones generales:
• Las muestras de suelo pueden extraerse en cualquier época del año, en lo posible
cuando el terreno no este muy seco ni muy húmedo.
• Las muestras deben conservarse húmedas, para lo cual se recomienda usar
bolsas de polietileno grueso.
• Cuando se trate de muestras para determinar nematodos formadores de quistes,
se puede obtener la muestra del suelo seco.
• La recolección de muestras debe hacerse por especie vegetal.
• Las muestras deben conservarse a una temperatura no mayor de 7ºC.
• En el caso de muestras de raicillas, estás deben colocarse entre papel absorbente
húmedo y dentro de una bolsa plástica, con su identificación, sin exponerlas a los rayos
del sol.
• La etiqueta debe quedar aislada para que no se humedezca y no se borren los
antecedentes.
• El transporte al laboratorio respectivo, debe hacerse lo más rápido posible,
considerando los aspectos antes descritos.
Muestreo de suelos para detectar nemátodos formadores de quistes:
Se considera una hectárea como unidad de muestreo, y se colecta siguiendo hileras
paralelas, 8 a 10 grs. de suelo cada 8, 4 o 2 pasos entre y sobre la hilera, según la
intensidad de muestreo requerida, de manera de cubrir toda la superficie. El muestreo
debe realizarse a la profundidad del cultivo actual o del anterior, si el suelo está limpio.
Las submuestras se homogeneizan en un recipiente adecuado y se coloca 500 grs. en
una bolsa plástica, con su identificación, para enviar al laboratorio.
Muestreo de suelos destinados a viveros de plantas:
El muestreo debe hacerse tomando como superficie máxima, media hectárea. Cada 15 o
20 metros se extrae muestras de 50 grs. cada una, a unos 10 a 20 cm. de profundidad,
con barreno muestreador de suelo, haciendo aproximadamente un total de 25
submuestras. Las submuestras deben cubrir completamente la superficie a analizar.
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Se mezcla las 25 submuestras en un balde y se separan 500 grs. en una bolsa, con su
identificación, para su análisis.
Muestreo de suelos cultivados con frutales o vides:
Las plantas que presentan síntomas tales como: clorosis, detención del crecimiento o
defoliación, se muestrean extrayendo suelo alrededor del tronco, bajo la proyección de la
copa, por lo menos en tres lugares y a la profundidad en que se encuentre la mayor
densidad de raicillas, pertenecientes al frutal o vid (no incluir raíces de malezas), las que
deben incluirse en la muestra. Se mezclan las submuestras y se colocan 500 gramos de
este suelo en una bolsa, con su identificación. El muestro debe hacerse por especie
vegetal.
Aquellos sectores que presenten plantas sanas, deben muestrearse en forma separada
de los sectores, siguiendo La misma metodología.
Muestreos de cultivos de alfalfa y de frutillas:
En general, para analizar plantas afectadas por nematodos del follaje, se toman hojas y
trozos de tallos y brotes con síntomas de daño, provenientes de unas 10 plantas por
hectárea, se envasan en bolsas plásticas, se identifican y se envían al laboratorio.
6.4.3.- Laboratorio de Taxonomía de malezas
Instructivo de captación y envío de muestras al laboratorio de taxonomía de
malezas
El siguiente instructivo, del Laboratorio de Taxonomía de Malezas en el Nivel Central
resume las condiciones que deben presentar las muestras vegetales al momento de su
ingreso referida a los siguientes puntos:
I.- Selección
Se seleccionaran las muestras en terreno de diferente índole, tales como:
a. Especies vegetales que estén interfiriendo en algún sistema agronómico en forma
negativa (cultivos, sistema de riego, vivero, etc.).
b. Resumen de dudosa identificación taxonómica.
c. Especies vegetales nunca antes visualizadas en un determinado lugar.
II.- Toma de muestra:
1) Toda muestra a analizar deberá estar constituida por tres ejemplares cuando esto
sea posible.
2) La muestra debe ser representativa de la existente en el terreno, en cuanto a
características morfológicas.
3) Toda muestra deberá tener similares características vegetativas, en cuanto a color,
altura, vigor, estado fenológico y ser colectada en el mismo predio o lugar.
4) El ejemplar debe venir con:
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a. Todas sus estructuras vegetales completas: vegetativa y reproductiva, raíz,
tallo, hoja, flor y fruto. En plantas grandes que no se pueda extraer raíz,
describir sistema radicular que presenta el ejemplar colectado.
b. La muestra no debe presentar daños físicos, químicos, fitopatológicos,
entomológicos ni de otro tipo.
c. La muestra debe ser colectada con sumo cuidado evitando daño a
estructuras vegetales.
III.- Envío de muestra
1) La muestra una vez colectada en terreno debe ser enviada lo más rápido posible.
Si esto no ocurre, debe ser guardada en frío.
2) Venir limpia de polvo o partículas de suelo.
3) Venir envuelta en toalla nova protegiendo principalmente las raíces.
4) Enviar la muestra en bolsas plásticas individuales totalmente selladas con huincha
de embalaje cada una y a su vez en una gran bolsa común en caso de varios
ejemplares.
5) Cada muestra debe venir con su formulario de envío, con copia en el interior de la
bolsa plástica sellada.
6) El formulario de envío debe indicar todas las características ecológicas del terreno
en donde fue colectada la muestra. Se debe indicar el lugar preciso: cerco,
acequia, orilla de camino, etc. Además del predio, indicar cultivo en que interfiere,
daño que realiza en terreno, etc.
6.4.4.- Laboratorio de Virología
DIRECTRICES PARA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE
VIROLOGIA (No incluye frutilla)
Tipo de Muestra:
La muestra deberá consistir en brotes o follaje verde, en activo crecimiento y deberá
incluir tanto ápices de crecimiento como hojas adultas. No es necesario incluir raíces ni
frutos. La elección del brote o planta deberá siempre estar dirigida hacia los síntomas
observados. Si los síntomas se encuentran en los frutos, igualmente tomar muestras de
follaje.
Preparación de la Muestra:
La muestra deberá ser envuelta en papel absorbente y dispuesta dentro de una bolsa
plástica de un tamaño lo suficientemente grande como para que la muestra quede suelta
dentro de ella. Deberá incluir además la clave y los datos necesarios. La muestra deberá
siempre ser manejada en condiciones refrigeradas o frescas (conservadora o caja
Aislapol) utilizando Ice Pack o un medio para mantenerlas a una baja temperatura.
Envío de muestras:
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Las muestras deberán ser enviadas lo más pronto posible al laboratorio, de una forma que
se mantengan las condiciones refrigeradas de las mismas. Se podrá almacenar por un
máximo de 2 días en refrigerador esperando el envío al Laboratorio. En el caso de envío
vía bus, tener la precaución de usar una caja de Aislapol dentro de la cual se coloquen las
muestras más ice pack y rotular la caja como FRAGIL para evitar el deterioro de las
muestras por maltrato en el viaje. Marcar cajas y ice pack con nombre de Oficina o región
o responsable para efectuar devolución.
6.5.- Identificación
Cada muestra debe identificarse por medio de una clave, formada por el número de
identificación de la Región, seguido del código de la comuna y el número correlativo de la
muestra.
EJ. 13-50-0001: RM, comuna de Buin, primera muestra.
6.6.- Información a enviar (formulario)
Se debe solicitar la determinación solo de plagas solicitadas como DA y que estén
categorizadas como presentes en Chile.
La solicitud de determinación de plagas no requeridas como DA, se debe realizar como
prospección (Vigilancia Fitosanitaria)