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Del 19 al 21 de mayo de 2014 Unidad de Estudios Avanzados y Edificio Polivalente, Ciudad Universitaria Ciencias Agropecuarias - Medicina Veterinaria IDENTIFICACIÓN MEDIANTE PCR DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS TERMOESTABLE EN MASTITIS BOVINA EN ETAPA SUBCLINICA Juan Manuel Villaseñor, Rodolfo Gonzales Segovia, Rosa María Meléndez Soto, Verónica Moreno Córdova La bacteria Staphylococcus aureus está involucrada en el desarrollo de mastitis en ganado bovino, la cual se clasifica en clínica y subclínica. Siendo esta última la más difícil de detectar pues no se presentan alteraciones macroscópicas en la leche ni en la ubre. Las cepas de S. aureus productoras de enterotoxinas además de relacionarse con procesos infecciosos son agentes causales de intoxicaciones alimentarias, siendo la nucleasa termoestable de S. aureus un marcador de identificación de las cepas enterotoxigénicas en la industria alimenticia. Determinar la prevalencia de cepas de S. aureus nucleasa termoestable positivas en leche proveniente de vacas productoras con estadios subclínicos de mastitis. Para realizar el estudio se considero una población de 51 vacas. La determinación de mastitis se realizó mediante la Prueba de California (CTM) y basado en criterios clínicos la mastitis se clasifico en clínica y subclínica. La purificación de ADN se obtuvo mediante extracción orgánica con fenol-cloroformo a partir de muestras de leche de animales con mastitis subclínica. La identificación de S. aureus termonucleasa positivo se realizó a partir de la amplificación por PCR de un segmento del gen nuc. Los productos de PCR fueron analizados por electroforesis en gel de agarosa. Mediante el análisis de CMT se pudo determinar que la mastitis clínica se presentó solamente en el 3.92 % del total de la población mientras que los casos con cuadros subclínicos de la enfermedad se observaron en el 33.33% del total de individuos en el hato. El análisis de PCR para la amplificación del gen nuc de S. aureus se realizó a partir de las muestra de ADN obtenidas de leche proveniente de 15 de los animales que fueron identificados con mastitis subclínica. Mediante este análisis se encontró la amplificación del producto específico de este gen en el ADN de 12 individuos y siendo negativa en solo 3 animales. Mediante la amplificación del gen bovino atp8 en las 15 muestras se demostró que todos los ADN analizadas presentaron una calidad adecuada para el análisis de PCR. La frecuencia de mastitis subclínica en el hato estudiado fue de un 33.3%, mientras que solo el 3.9% de los animales presentó estadios clínicos. El 80% de casos de mastitis subclínica en las vacas productoras de la población analizada, presentaron S. aureus termonucleasa positivo (12 de 15 animales). Representando esto un punto de alerta sanitaria debido a la presencia de cepas de S. aureus potencialmente enterotoxigénicas en leche con fines de comercialización. Publicación Electrónica de Abstracts 323
