Transcript
V Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica XVI Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica VI Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular Clave: (57816) Fecha: (1/21/2008) CARACTERIZACIÓN DE LA ENZIMA 1-FFT EN Agave atrovirens Karw EN DOS ESTADÍOS DE MADURACIÓN González-Cruz, Leopoldo; Bernardino-Nicanor, Aurea; Jaramillo-Flores, María Eugenia; MoraEscobedo, Rosalva Escuela Nacional de Ciencias Biológicas (IPN, Prolongación de carpio y plan de Ayala S/N. 11340. D.F. México. e-mail: [email protected] El Agave es uno de los principales cultivos en nuestro país, del cual se obtienen los azucares para la elaboración del pulque, principalmente fructosa, la cual se genera a partir de la hidrólisis de los fructooligosacáridos. Sin embargo el principal problema que presenta el agave, es la variabilidad en su desarrollo físico, el cual esta en función de los factores ambientales y nutrimentales de la zona donde se cultiven, por lo que hasta ahora no se ha podido determinar el periodo óptimo para la obtención de los fructooligosacáridos, por esta razón el presente trabajo esta enfocado a determinar las concentraciones de la enzima fructosa:fuctosa 1fructosiltransferasa (1-FFT) que es una de las responsables de la síntesis de estos compuestos y de acuerdo a los pocos estudios realizados acerca de esta enzima podría servir como marcador de la edad del Agave. La purificación de la enzima se realizó utilizando dos tipos de cromatografía: de afinidad e intercambio iónico. Los resultados indican que existe una relación proporcional entre el tamaño de la hoja y la edad del Agave, sin embargo, a medida que la planta se desarrolla tiende a absorber una mayor cantidad de agua, lo que se ve reflejado en su aumento de peso, el cual no presenta proporcionalidad con su edad. La cromatografía de afinidad separó el extracto proteínico obtenido del Agave de tres años en 2 fracciones, la segunda fracción se identificó como las proteínas glicosiladas dentro de las cuales se encuentra la 1-FFT, mostrando pesos moleculares de 16.8, 25.6,30.7,39, 56,80.3,108.4 y 137.9 kDa, los cuales concuerdan con los reportados para la purificación de esta enzima a partir de otras fuentes vegetales. La cromatografía de intercambio iónico al ser específica para separación por punto isoeléctrico permitió fraccionar las proteínas en 9 fracciones, de las cuales 6 presentaron pesos moleculares de 20, 57.8 y 75.4 kDa. La purificación de las fructosiltranferasas a partir de otras fuentes vegetales indican que la síntesis de estas enzimas se ve influida según la edad de la planta y aun cuando no existen estudios en Agave atrovirens, los resultados obtenidos hasta el momento indican que la concentración de proteína si esta influida por este factor. Palabras clave: Agave; 1-FFT, caracterización Área: Bioquímica Mar del Norte No. 5, Col. San Álvaro Azcapotzalco C. P. 02090, México, D. F. Tel. y Fax: 5623 3088 email: [email protected], [email protected]
