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EXPRESIÓN DE METALOPROTEINASA 2 Y 9 EN HIPERTROFIA
CARDÍACA FUNCIONAL DURANTE LA PREÑEZ DE RATA
Salazar-Enríquez D1, Limón-Miranda S1, Villegas-Vega O1, Muñiz J2, Morán
Palacio EF1, Virgen-Ortiz A1.
1Departamento
de Ciencias Químico Biológicas y Agropecuarias, Unidad
Regional Sur, Universidad de Sonora. 2Centro Universitario de Investigaciones
Biomédicas,
Universidad
de
Colima.
Correspondencia:
[email protected]
Introducción: Las metaloproteinasas de la matriz (MMP) es una familia de
enzimas proteolíticas dependientes de Calcio que juegan una función
importante para el remodelamiento de la matriz extracelular y la degradación de
sus componentes en el corazón. Una disminución en su expresión, puede
promover la acumulación de proteínas de la matriz extracelular contribuyendo
al desarrollo de fibrosis e hipertrofia cardíaca. En hipertrofia cardíaca patológica
las metaloproteinasas son una vía de señalización que favorece la acumulación
de colágena tipo I provocando una alteración de la función diastólica del
corazón debido a que disminuye la distensibilidad de las paredes ventriculares.
Sin embargo, en hipertrofia cardíaca funcional desarrollada durante la preñez,
no se conoce su participación en la expresión de proteínas de la matriz
extracelular que podrían estar modulando los cambios en la función diastólica
que demanda este estado fisiológico.
Objetivo: Determinar el nivel de expresión enzimática de MMP-2 y MMP-9 en
corazón de ratas preñadas y en posparto.
Materiales y Métodos: Se usaron 12 ratas hembras de la cepa SpragueDawley, divididas en 3 grupos experimentales: no preñadas (NP, n=4),
preñadas de 18 días (P18, n=4) y posparto de 14 días (PP, n=4). Bajo
anestesia con pentobarbital sódico se realizó una toracotomía medial para
extraer el corazón, el cual fue sumergido en solución amortiguadora Krebs
oxígenada para disecar el ventrículo izquierdo. Se prepararon homogenados de
ventrículo izquierdo de cada grupo usando buffer de lisis con un coctel de
inhibidores para evitar la degradación de proteínas. Se realizó una separación
electroforética en geles SDS- PAGE al 10% mediante el sistema discontinuo de
Laemmli seguida de una electrotransferencia vía semiseca a membranas de
nitrocelulosa. Posteriormente las membranas fueron tratadas con anticuerpos
primarios específicos para las proteínas de interés anti-MMP2, anti-MMP9 y
anti-GAPDH como control. Después se incubaron con anticuerpos secundarios
anti-especie acoplados a peroxidasa de rábano y finalmente el revelado fue
realizado mediante quimioluminiscencia en cuarto oscuro. Se realizó
adquisición de imágenes de los revelados las cuales fueron analizadas con el
programa Image J para determinan la cantidad de expresión de las proteínas
estudiadas.
Resultados: Se observó una disminución significativa en la expresión de MMP2 y MMP-9 en ventrículo izquierdo del grupo experimental de ratas preñadas
respecto al grupo control; mientras que al comparar la expresión de MMP-2 y
MMP-9 en el grupo control y el grupo en posparto fue similar.
Conclusión: La disminución en la expresión de MMP-2 y MMP-9 en ventrículo
izquierdo durante la preñez, sugiere que el sistema de las metaproteinasas
está participando en la regulación del contenido proteico de la matriz
extracelular contribuyendo al desarrollo de hipertrofia cardíaca.
Este proyecto fue financiado por el SEP-PROMEP-2009 en apoyo al Dr. Virgen y por el fondo
PIFI 2009-2010 de la División de Ciencias e Ingeniería, URS, UNISON a cargo del M.I. Luis
Manuel Lozano Cota.