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SALUDRURAL [VOL1,Nº1,SEPTIEMBRE2011] TEMACENTRAL Resistencia bacteriana a nivel rural: análisis de factores ambientales responsables de la resistencia de E. Coli en infecciones de vías urinarias (IVU)enelHospitalPedroVicenteMaldonado,Pichincha,Ecuador. GaloArévaloS.,DiegoHerreraR.,DavidGaus. Introducción El incremento de la resistencia bacteriana a los diferentes fármacos es un problema reconocidoanivelmundial. Las infecciones nosocomiales y el uso irracionaldemuchosfármacoshafavorecido que algunas bacterias hayan desarrollado mecanismos que las hacen resistentes a muchos de los antibióticos utilizados habitualmente en su tratamiento, conociéndose como bacterias multi resistentes. EnelEcuadorel22deabrilde1999secrea la Red Nacional de Vigilancia de Resistencia Bacteriana - Ecuador, REDNARBEC, frente a lanecesidaddeconocerlamagnituddeeste problemaenelpaís2. Los datos que entrega REDNARBEC pueden ser cuestionados por los profesionales que ejercen a nivel rural, al pensar que los patrones de resistencias bacterianas, son diferentes en las zonas rurales a nivel mundial. Estos supuestos no pueden ser objetados con evidencias por la ausencia de información sobre los patrones de resistencia microbiana en centros de atenciónmédicosanivelrural antibióticos y la resistencia bacteriana, a nivel colectivo, a nivel individual3, y en la crianza de animales, que provocarían un aumento de las resistencias bacterianas en laspoblacionesrurales. Las estrategias para tratar de contener esta problemáticaincluyenentreotros: • • Ensayos clínicos y estudios operacionaleslocales. Validación de la información a nivel local, nacional, regional e internacional. Dadaslasmúltiplesvíasporlascualesse puedengenerarpatógenosmicrobianos multiresistentes,elpresenteestudio abordalahipótesisdelainfluenciadela contaminaciónambientalyelusono terapéuticodeantibióticosenzootecnia comounodelasfactoresqueinfluyenen eldesarrollodelasresistencias bacterianas,tomandocomoejemplola resistenciadeEscherichiaColien infeccionesdevíasurinaria. El problema se agudiza porque existe una relación directa entre el uso irracional de [HospitalDocentePedroVicenteMaldonado] 12 SALUDRURAL [VOL1,Nº1,SEPTIEMBRE2011] MaterialesyMétodos Se ejecutaron 153 urocultivos a partir de muestrasdepacientesquemuestrenunexamen microscópicodeorinaenlosqueseobservómás de5 leucocitos/campo; el uro cultivo se realizó sobre agar CLED modificado, a fin de confirmar una infección significativa mediante el conteodeUFC/ml,elmismoquedebesermayor a 10000. Una vez confirmada la infección, se procedió a realizar una identificación de la bacteria por medio de pruebas bioquímicas usando los medios de cultivo Mc Conkey, KligerIron Agar, LysineIron Agar y Citrate Agar (Pruebasadicionalesfueronevaluadasencasode ser necesario).El patrón de resistencia se analizó mediante la ejecución de antibiogramas sobre Agar Mueller Hinton empleando discos de antibiótico: Ampicilina (AM), Amoxicilina/Ácido clavulánico (AmC), Gentamicina (Gm), Sulfametoxazol/Trimetropin (STX), Ceftriaxona (CRO), Cefalotina (CF), Ciprofloxacina (CIP) y Nitrofurantoína(F). Los resultados se observaron en todos los casos luegode24hdeincubacióna37ºC.Seobtuvieron cultivos puros susceptibles de ser identificados hasta un nivel de género además de analizar su patrón de resistencia en los antibiogramas midiendoloshalosdeinhibiciónyclasificándolos en Resistente, Intermedio y Sensible. Los resultados de los antibiogramas fueron organizados dentro de una base de datos y se sometidos a un análisis estadístico usando el softwareMicrosoftExcelyEpiInfo™Version3.5.1 comopasoprevioalaformulacióndeladiscusión yconclusionesglobalesdelestudio. DiscusiónyConclusiones AlcompararlospatronesderesistenciadeE.coli enPedroVicenteMaldonadoconlospatronesde resistencia de centros hospitalarios de Quito (Datos de 2008), se aprecia que no existe diferenciaenlosporcentajesderesistenciafrente a los mismos antibióticos. Para abordar este fenómeno de una manera correcta, debemos enfocarlo no solo desde el punto de vista microbiológico sino que debemos abarcar varios aspectos que diferencian un área rural de un centrourbanogrande. La teoría tradicional señala que el fenómeno de resistencia a antibióticos es una característica comúnmente observada en centros hospitalarios urbanos, en donde las causas de la resistencia incluyen en su mayoría abuso y automedicación de antibióticos, un aspecto cuya lógica radica en la facilidad de adquirir antibióticos en esta zona; en teoría esto debe contrastar con un área rural endondeelaccesoaantibióticosesmásdifícil. [HospitalDocentePedroVicenteMaldonado] Si bien es cierto que la adquisición y consumo indiscriminado de antibióticos por las personas que habitan en el campo es un fenómeno poco común, la prevalencia de cepas bacterianas resistentes obedece principalmente a factores medioambientales que se analizan en esta investigación, principalmente porque estos factores tienen una relación directa con la actividaddiariadeloshabitantesysusefectosse confirmanenelpresenteestudio. PedroVicenteMaldonadoesuncantóncon9965 habitantes, según reportes censales, su principal actividad económica se centra en la agricultura 13 SALUDRURAL ganadería ocupando dentro de esta categoríaa2.052desushabitantes9. Existe varios indicios de contaminación ambiental en el cantón, Pedro Vicente Maldonado, los factores contaminantes son múltiples entre estos tenemos, las granjas porcinas de todo el Noroccidente de Pichincha, quienes en su mayoría no cumplenlasnormastécnicasambientalesde disposición y tratamiento de desechos, sumado al deficiente sistema de alcantarillado de las poblaciones de la zona, que no dispone de plantas de tratamiento previo a la disposición final de las aguas servidas. A fin de demostrar la contaminación ambiental se procedió a ejecutar un monitoreo microbiológico con sitios de muestreoenlostresríosquecruzanlazona, estos son Caoní (0º04’31.44’’N; 79º02’59.84’’ O; elev. 604m) Silanchi conocidotambiéncomoLaSuciayLasTinas (0º04’41.23’’N; 79º02’58.22’’O; elev. 585m) y Achiote (0º02’07.62’’ N; 79º02’49. 29’’O; elv.604m),cuyosresultadossepresentanen el cuadro numero 3. La carga bacteriana contenidaenelaguadelosríosexcedetodos los límites máximos permitidos bajo la Norma de Calidad Ambiental y de Descarga deEfluentesparalapreservacióndelaflora yfaunaenaguasdulces,fríasocálidas,yen aguasmarinasydeestuario,endondeindica que el valor máximo permisible es de 200 UFC/ml y si existen actividades productoras quegenerenefluentesaloscuerposdeagua dulce, se debe remover el contenido de coliformesenun99.9%antesdesudescarga aunrío6. El valor excesivamente alto en la concentración de coliformes concuerda con fenómenos paralelos como la alta demanda [HospitalDocentePedroVicenteMaldonado] [VOL1,Nº1,SEPTIEMBRE2011] bioquímica de oxígeno (DBO) y la formación debiopelículasobrelasrocasyorillasdelos ríos. La capacidad de cepas patógenas de E. coliparacausardistintostiposdeinfecciones extra intestinales se correlaciona con la expresióndemúltiplesfactoresdevirulencia incluyendo adhesinas, toxinas, sideróforos, sistemas de secreción, formación de biopelículasyotrosfactoresquecontribuyen conjuntamente a potenciar su 8 patogenicidad . AlejecutarelantibiogramadelascepasdeE. coliaisladasdelosríos,sereportóqueéstas presentan el mismo patrón de resistencia que las cepas aisladas en los uro cultivos, a pesardequeéstenoesuncriteriodecisivo, es muy alta la probabilidad de que estemos hablando de la misma cepa bacteriana contenida en los ríos de Pedro Vicente Maldonado y en los uro cultivos de la población local. Son necesarios ensayos de identificación bacteriana a nivel molecular a findeconfirmaresteaspecto. Estáclaramentecomprobadoqueexisteuna relación directa entre la contaminación ambiental y la salud de las personas. Trabajadores de granjas de cerdos han demostrado tener cepas de E. coli más resistentes en comparación con habitantes sub-urbanos7. No se puede desconocer, la transferencia de genes de resistencia entre cepas; para citar un ejemplo, existe el antibiótico aminoglicósidostreptothricin que no es usado en terapia con humanos, sin embargo,laresistenciaalosaminoglicósidos es codificada por un gen derivado de los animales AAC(3)-IV el cual genera una resistencia cruzada a la gentamicina la misma que es recomendada como parte de laterapiainicialestándarparalasinfecciones más serias por E. coli en humanos7 y en el 14 SALUDRURAL [VOL1,Nº1,SEPTIEMBRE2011] casolocal,E.colipresentaunaresistenciadel 27.72%alagentamicina. El problema se agrava ya que los ríos del Noroccidente de Pichincha, constituyen el principal atractivo turístico de la zona y todossushabitanteshanestadoencontacto conesasaguasydependendeellasdeforma directaoindirecta;lazonadePedroVicente Maldonado se convierte de esta manera en un reservorio de cepas resistentes de enterobacteriasdemodoquesushabitantes así como también los visitantes corren el riesgo de convertirse en portadores de esta cepa sin que necesariamente presenten síntomas9. Es necesario enfrentar la problemática de la resistencia antibiótica bajounnuevoparadigmaecológicoquevaya más allá de la visión médica y que permita establecer políticas de vigilancia y remediación ambiental conjuntamente con un adecuado y permanente monitoreo de resistenciabacterianaafindecaracterizarel mecanismo exacto que hace que la resistencia bacteriana a nivel rural se convierta en un problema de salud pública. Cuadro1.-Resistenciaglobalagrupadaporantibiótico.R:Resistente;I:Intermedio;S:Sensible;AmC:Amoxicilina/Ac.;AM:Ampicilina; CF:Cefalotina;CRO:Ceftriaxona;CIP:Ciprofloxacina;GM:Gentamicina;SXT:Trimetropin/Sulfa.;F:Nitrofurantoína. ResistenciaGlobalporAntibiótico Antibiótico R % I % S % AmC 30 19,8 64 42,3 57 37,7 AM 105 69,5 39 25,8 7 4,6 CF 39 25,8 64 42,3 48 31,78 CRO 22 14,5 50 33,1 79 52,3 CIP 50 33,1 34 22,5 67 44,3 GM 48 31,7 81 53,6 22 14,5 SXT 115 76,1 15 9,9 21 13,9 F* 16 12,5 45 35,4 65 51,1 *ElnúmerodecultivosensayadosconF,fuede127 Cuadro 2.- Patrones de resistencia bacteriana asociados por especie y antibiótico. R: Resistente; I: Intermedio; S: Sensible; AmC: Amoxicilina/Ac.; AM: Ampicilina; CF: Cefalotina; CRO: Ceftriaxona; CIP: Ciprofloxacina; GM: Gentamicina; SXT: Trimetropin/Sulfa.; F: Nitrofurantoína. Eschearichiacoli Enterobacterspp. AmC AM CF CRO CIP GM STX F R 17 69 28 17 36 31 82 10 I 38 28 37 34 24 53 7 24 S 46 4 36 50 41 17 12 45 R 3 16 3 3 4 7 10 0 I 13 1 11 4 2 9 2 9 S 1 0 3 10 11 1 5 8 R 3 8 3 1 3 7 11 3 7 7 5 5 8 3 8 Proteusspp. I 6 S 8 3 8 9 7 2 1 4 Klebsiellaspp. R 4 5 1 0 2 0 3 0 [HospitalDocentePedroVicenteMaldonado] 15 SALUDRURAL [VOL1,Nº1,SEPTIEMBRE2011] Salmonellaspp. Shigellaspp. I 1 0 4 2 1 4 2 2 S 1 0 0 3 2 0 1 2 R 0 1 0 0 2 2 3 2 I 2 1 2 2 1 1 0 0 S 1 1 1 1 0 0 0 1 R 3 3 3 1 2 1 3 1 I 1 2 1 1 1 3 1 1 S 1 0 1 3 2 1 1 3 E.ColipresentaunaelevadaresistenciaaAmpicilinayTrimetropin/Sulfametoxazolsuperioral70%,otrasalternativasdetratamiento comoCiprofloxacinapresentaunresistenciasuperioral35%. Cuadro3.-Resultadosdenúmerodecoliformesexpresadocomonúmerodeunidadesformadorasdecoloniaspormililitro(UFC/ml)de agua,muestrastomadasdelosríosdePedroVicenteMaldonado. Río UFC/ml Bacteriasidentificadas Caoní 9500 E.coli,Salmonellaspp. Silanchi 20400 E.coli,Salmonellaspp.Bacillusspp.,Enterobacterspp. LasTinas 5400 E.coli,Salmonellaspp. Achiote 3900 E.coli,Bacillusspp. Bibliografia 1. EUROPAPRESS.LaOMSpidemayoresfuerzocontralaresistenciabacterianaalosfármacos.[enlínea].Madrid:ElMundo.es, 2010.<http://www.elmundo.es/elmundosalud/2010/08/24/noticias/1282671434.html>.[12/dic/2010]. 2. Zurita,Jeanette.EpidemiologíadelaresistenciabacterianaenelEcuador.Quito.2006.pp26-28. 3. React-Latinoamérica.Laresistenciabacteriananotienerostro.[enlínea].Cuenca:FacultaddeCienciasMédicas-Universidadde Cuenca.2008.<http://soapimg.icecube.snowfall.se/react/Boletin%20ReAct%205.pdf>.[8/dic/2010]. 4. KeepAntibioticsWorking.FACTSHEET:AntibioticResistanceandAnimalAgriculture.USA.2009. 5. BartoloniA.1998.AntimicrobialuseandantimicrobialresistanceamonghealthychildreninBolivia.APUANewsletter16(3):1-2. 6. 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