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IMPACTO Y SINTOMATOLOGÍA ASOCIADA AL VIRUS DEL
ENANISMO AMARILLO DE LA CEBOLLA
EN ZACATECAS, MÉXICO
Impact and symptoms associated to onion yellow dwarf virus in Zacatecas, Mexico
Grecia Romina Rodríguez-Molina, Rodolfo Velásquez-Valle y Luis Roberto
Reveles-Torres1
1
Campo Experimental Zacatecas – INIFAP, Km. 24.5 Carretera Zacatecas – Fresnillo, Calera de V.
R., Zacatecas, México. CP 98500. e-mail: [email protected]
RESUMEN
En el estado de Zacatecas, México la cebolla es cultivada
en alrededor de 4, 000 hectáreas. Enfermedades como la pudrición blanca y mancha púrpura son comunes a las plantas de
cebolla en esta área, sin embargo, las enfermedades virales
afectando plantas de Allium han sido reportadas en esta región. Poco se conoce acerca del efecto de virus como el OYDV
(Onion yellow dwarf virus) en plantas de cebolla en Zacatecas
por lo que el objetivo de este estudio fue determinar la incidencia e impacto del OYDV en el desarrollo de plantas de cebolla
bajo condiciones naturales. Durante la temporada de cultivo de
cebolla en 2013 se muestrearon 11 parcelas comerciales para
detectar plantas de cebolla que presentaran síntomas de posible origen viral. No se encontró una tendencia sobre el impacto
sobre la altura de planta, número de hojas y diámetro de bulbo
de plantas con síntomas virales al ser comparadas con plantas aparentemente sanas. Se colectó un total de 135 muestras;
OYDV fue detectado por medio de ELISA en el 25.2% de esas
muestras.
Palabras clave: OYDV, número de hojas, diámetro de
bulbo, ELISA
SUMMARY
In the state of Zacatecas, Mexico the onion crop is cultivated in around 4, 000 hectares. Diseases such as white rot and
purple blotch are common to onion plants in this area, however, viral diseases affecting Allium plants have been reported
in this region. Few is known about the effect of virus like OYDV
(Onion yellow dwarf virus) in onion plants in Zacatecas, consequently the objective of this study was to determine the incidence and impact of OYDV in the development of onion plants
under natural conditions. During the 2013 onion crop season, 11
commercial fields were sampled to detect onion plants showing
symptoms of potential viral origin. A trend on the impact on plant
height, leaf number, and bulb diameter of onion plants showing
viral symptoms was not found when compared to apparently
healthy plants. A total of 135 samples were collected; OYDV
was detected by ELISA in 25.2% of these samples.
Keywords: OYDV, leaf number, bulb diameter, ELISA
INTRODUCCIÓN
El cultivo de cebolla (Allium cepa L.) ha adquirido importancia
económica en el estado de Zacatecas donde la superficie cultivada con esa hortaliza pasó de 776 hectáreas en 1980 hasta 3,
596 hectáreas en 2007; para el ciclo de cultivo 2010 ocupó una
superficie de 4, 110 hectáreas con un rendimiento promedio de
32.9 toneladas por hectárea (Reveles et al., 2010). Las parcelas comerciales de cebolla en la región frecuentemente se ven
afectadas por patógenos como los hongos Sclerotium cepivorum Berk. y Alternaria porri Ellis, agentes causales de las enfermedades conocidas como pudrición blanca y mancha púrpura
respectivamente. Por otro lado, en esta región se ha detectado
la presencia de algunos agentes virales como el del enanismo
amarillo de la cebolla (OYDV: onion yellow dwarf virus) y el de
la mancha amarilla del iris (IYSV: Iris yellow spot virus) (Velásquez-Valle et al., 2010; Velásquez-Valle y Reveles-Hernández,
2011). Las infecciones en plantas de cebolla causadas por el
OYDV son consideradas entre las más importantes ya que reducen el rendimiento y la calidad del bulbo y la semilla (Davis,
1995). En Zacatecas la presencia del OYDV ha sido mencionada en plantas de cebolla asintomáticas (Velásquez-Valle et al.,
2012), sin embargo, la sintomatología provocada por ese virus
incluye un rayado amarillo en la base de las primeras hojas que
posteriormente se manifiesta en todas las hojas de la planta;
el bulbo es de menor tamaño y la semilla es de menor tamaño
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(Davis, 1995). Además, en Chile se reportó un enanismo acentuado y un estriado amarillo que afectaba total o parcialmente
la lámina foliar (Álvarez et al., 1977). En Zacatecas existe poca
información acerca de la incidencia e impacto de virus como el
OYDV en cebolla por lo que el objetivo de este trabajo consistió
en determinar la incidencia e impacto de la infección por el virus
del enanismo amarillo de la cebolla en el desarrollo de plantas
de cebolla bajo condiciones naturales en Zacatecas, México.
MATERIALES Y MÉTODOS
Colecta de muestras en parcelas comerciales
Se colectaron plantas de cebolla en 11 parcelas comerciales
en el estado de Zacatecas durante el ciclo de cultivo 2013. En
ocho de estas parcelas se colectaron al azar cinco plantas que
mostraban síntomas como enanismo, raquitismo u otros síntomas foliares como distorsión, mosaico, etc. Adicionalmente
se colectaron otras cinco plantas asintomáticas (sin ninguno de
los síntomas anteriores), lo más cercano posible a las plantas
enfermas colectadas previamente. Las plantas se etiquetaron
y se trasladaron al laboratorio de Fitopatología del Campo Experimental Zacatecas (INIFAP) donde a cada una se le contó
el número de hojas y se midió la altura y diámetro de bulbo. A
partir de los valores registrados para esas variables se calculó
la desviación estándar, la cual se utilizó para realizar las comparaciones correspondientes.
Detección del OYDV por ELISA
De cada muestra se tomó un gramo de tejido, se agregaron
100 µl de gama globulina del OYDV en solución de cubrimiento
a cada pozo de la placa a una concentración de 1:200 (concentración utilizada 1µl de gama globulina/200µl de solución de
cubrimiento). Se incubaron a 37 °C por 4-6 horas.
Al día siguiente se lavó el plato con el PBS-T tres o cuatro
veces para eliminar restos del tejido vegetal. Se agregaron 100
µl de conjugada gama globulina-enzima en solución amortiguadora de conjugado (concentración 1:200) a cada pozo (concentración utilizada: 1 µl de conjugada gama globulina-enzima/200
µl de solución amortiguadora de conjugado). Se incubaron a
30 °C por 3-6 horas. Posteriormente se lavó el plato con PBSTween tres veces.
Por último se agregó el sustrato, el cual va disuelto en solución amortiguadora de sustrato. El sustrato utilizado es P-Nitrofenilfosfato (PNP). El plato se incubó a temperatura ambiente
por 30 a 60 min.
Evaluación de resultados.
La medición de la reacción se realizó con la ayuda de un
lector de placas ELISA (absorbancia 405 nm).
La reacción se consideró como positiva (presencia de virus)
si la lectura de la densidad óptica (OD) fue mayor o igual a tres
veces la media del testigo negativo.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Colecta de muestras en parcelas comerciales
Las plantas de cebolla colectadas como enfermas mostraban síntomas como enanismo, raquitismo, follaje de color verde
opaco a amarillento y frecuentemente distorsionado (Figura 1);
al extraerlas se observó que el bulbo aparecía de menor tamaño y con menos raíces que el de plantas aparentemente sanas.
Figura 1. Plantas de cebolla mostrando enanismo y follaje amarillento y distorsionado.
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PRODUCCIÓNAGRÍCOLA
En la mayoría de los casos no se encontró diferencia entre los promedios de las variables medidas en plantas asintomáticas y enfermas de acuerdo con los valores de desviación
estándar calculados. Sin embargo, en las parcelas 4 y A se encontró que el diámetro promedio de los bulbos provenientes de
plantas aparentemente sanas era mayor que el de las plantas
enfermas (Cuadro 1). Por lo que respecta a la variable de nú-
mero de hojas, se encontró que solamente en dos parcelas (B
y D) se detectaron diferencias significativas; en ambos casos el
promedio de esta variable resultó mayor en plantas asintomáticas que el de plantas enfermas. La altura promedio de plantas
aparentemente sanas y enfermas fue generalmente similar con
excepción de la parcela D donde la altura de las plantas aparentemente sanas fue superior a la de las enfermas (Cuadro 1).
Cuadro 1. Características vegetativas en plantas de cebolla con síntomas de posible origen viral y plantas
asintomáticas colectadas en Zacatecas, México.
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Promedio y desviación estándar
El estado fenológico en el que fueron colectadas las muestras fue variable pero es probable que si existen diferencias en
las variables medidas en las plantas aparentemente sanas y
las enfermas, se puedan acentuar al acercarse el final del ciclo
de cultivo.
Detección del OYDV por ELISA
En las 11 parcelas visitadas se colectaron 135 muestras
(asintomáticas y enfermas), de las cuales solamente 34 (25.2%)
resultaron positivas al OYDV. Este porcentaje de detección del
OYDV contrasta con el reportado por Shahraeen et al. (2008)
en tres provincias de Irán donde el promedio de detección fue
de 52.5%. Por otro lado, en las ocho parcelas muestreadas se
colectaron un total de 80 muestras de las cuales 40 correspondían a plantas aparentemente sanas y las otras 40 a plantas
con síntomas potencialmente virales. Se detectaron 16 muestras positivas (40%) al OYDV en el grupo de muestras provenientes de plantas asintomáticas mientras que en el grupo de
muestras provenientes de plantas enfermas el porcentaje de
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detección fue ligeramente superior, 45%, correspondiente a 18
muestras positivas. La detección del OYDV en tejido asintomático ya había sido mencionada en variedades de cebolla en
Zacatecas (Velásquez-Valle et al., 2012); resultados similares
se obtuvieron en Costa Rica (Guillén et al., 2011) donde el porcentaje de detección del mismo virus fue de 33% en hojas de
plantas de ajo (A. sativum L.) aparentemente sanas.
CONCLUSIONES
No se encontró una tendencia en el impacto de la sintomatología observada y potencialmente de origen viral sobre variables como la altura de la planta, número de hojas y diámetro
de bulbo.
Se detectó la presencia del OYDV en el 25.2% de las muestras de plantas de cebolla, independientemente de la variedad/
híbrido, origen geográfico o fitosanidad de cada parcela muestreada.
LITERATURA CITADA
Álvarez, M.A., Escaff, M.G. y Urbina, V.C. 1977. Identificación
del virus del enanismo amarillo de la cebolla (“onion yellow
dwarf virus”) en Chile. Agricultura Técnica (Chile) 37:174177.
Davis, R.M. 1995. Onion yellow dwarf. Compendium of onion
and garlic diseases. (Ed. by H.F. Schwartz and S.K. Mohan).
The American Phytopathological Society Press. St. Paul,
MN, USA. 54 p.
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Guillén, W.A.V., Chacón, C.R. y Zúñiga, V.C. 2011. Detección
del virus del enanismo amarillo de la cebolla (OYDV) y el
virus latente común del ajo (GCLV) en ajo (Allium sativum
L.) costarricense. Tecnología en Marcha 24:47-58.
Reveles, H.M., Velásquez, V.R., Trejo, C.R. y Ruiz, T.J. 2010.
Rendimiento de cebolla en camas de siembra con 6 hileras
de plantas en Zacatecas. Memoria. VIII Congreso Nacional
sobre Recursos Bióticos de Zonas Áridas. 271-275.
Shahraeen, N., Lesemann, D.E, and Ghotbi, T. 2008. Survey for
viruses infecting onion, garlic and leek crops in Iran. Bulletin
OEPP/EPPO 38:131-135.
Velásquez-Valle, R., Chew-Madinaveitia, I.Y., Amador-Ramírez,
M.D. y Reveles-Hernández, M. 2010. Presencia de virus en
el cultivo del ajo (Allium sativum L.) en Zacatecas, México.
Revista Mexicana de Fitopatología 28:135-143.
Velásquez-Valle, R. y Reveles-Hernández, M. 2011. Detección
del Iris yellow spot virus en el cultivo de cebolla en Zacatecas, México. Revista Mexicana de Ciencias Agrícolas 2:971978.
Velásquez-Valle, R., Reveles-Hernández, M. y AmadorRamírez, M.D. 2012. Distribución viral en plantas de cebolla
(Allium cepa L.) asintomáticas. Revista Mexicana de Ciencias Agrícolas 3:1425-1434.