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Efecto de la deficiencia en metionina sobre la composición corporal de aminoácidos y el metabolismo proteico del lechón J. Alberto Conde-Aguilera INRA, UMR1079, F-35590 Saint-Gilles, France Agrocampus Ouest, UMR1079, F-35590 Saint-Gilles, France Institute of Animal Nutrition, Estación Experimental del Zaidín (CSIC), Granada, Spain Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones • La Met es un aminoácido esencial: • Cys puede sintetizarse a partir de Met • Necesidades en Met y (Met+Cys) Transulfuración Met Cys Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones • Las necesidades en AA se evalúan habitualmente por la ganancia en peso o la retención de N • La composición en AA de la proteína corporal se asume CONSTANTE • Dudas sobre la validez de esta hipótesis Kyriazakis et al. (1993) Bikker et al. (1994) Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones 1. Evaluar el efecto de la deficiencia en AA azufrados de la dieta sobre la composición corporal del lechón Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Composición de las dietas experimentales Dieta – Dieta + Valor nutricional, % Lys DIE Met DIE (Met + Cys) DIE 1,17 0,20 0,45 Guisante 25 % Cereal 41 % Soja 19 % 1,16 0,46 0,70 43% y 36% necesidades de Met y (Met+Cys) Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones •18 lechones Piétrain × (LW×LD) DIETA 75 % ad libitum DIETA + 6 semanas de edad (~14 kg) 19 días Balance de N y sacrificios comparados Longissimus dorsi Restos Intestinos Hígado Sangre Canal Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Composición química del total, canal y músculo Longissimus dorsi de lechones Consumo de alimento (g/d) Ganancia de peso (g/d) Composición corporal (g/kg) Total 2 Proteína Grasa Mineral Agua Canal 2 Proteína Grasa Mineral Agua Músculo Longissimus dorsi 2 Proteína Grasa Mineral Agua 2 Proteína = nitrógeno x 6,25 Dieta – 602 336 Dieta + 612 403 P ‐valor NS 0,08 151 161 < 0,01 111 26,3 718 100 24,4 727 0,05 < 0,01 0,02 152 165 < 0,01 129 25,7 702 111 23 717 0,01 < 0,01 < 0,01 176 192 0,01 25,7 11,8 793 22,8 12,6 786 0,10 0,04 NS Conclusiones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Contenido en Met de la proteína de diferentes componentes corporales de lechones Dieta + Diet ‐ Dieta ‐ Diet + P < 0,01 3 Met g/16 g N 2.5 NS NS NS 2 NS 1.5 NS 1 0.5 0 Canal Carcass LM LM Sangre Intestines Intestinos Hígado Blood Liver NS = no significativo LM = músculo Longissimus dorsi Restos Rest Conclusiones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Contenido en Cys de la proteína de diferentes componentes corporales de lechones Cys g/16 g N Dieta + Diet ‐ Dieta ‐ Diet + 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 P = 0,07 P < 0,05 NS NS Canal Carcass LM LM NS NS Sangre Intestines Intestinos Hígado Blood Liver NS = no significativo LM = músculo Longissimus dorsi Restos Rest Conclusiones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Ganancia y composición de la ganancia del total, canal y músculo Longissimus dorsi de lechones Dieta – Dieta + P ‐valor 19% 14% 9% 28% 17% 8% 47% 20% 12% Total Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % Canal Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % Músculo Longissimus dorsi Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % 314 15,7 1,78 1,10 211 390 0,05 18,2 < 0,01 1,96 0,01 1,09 0,89 292 15,5 1,96 1,04 0,01 18,6 < 0,01 2,12 0,08 1,08 NS 5,40 16,3 2,38 0,94 10,2 < 0,01 20,5 0,04 2,69 0,01 1,03 < 0,05 La ganancia de peso fue MENOR La ganancia presentaba una MENOR PROTEINA La ganancia proteica contenía una MENOR MET Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Ganancia y composición de la ganancia de la sangre, intestinos, hígado y restos de lechones Dieta – Dieta + P ‐valor Sangre Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % Intestinos Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % Hígado Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % Restos Ganancia de peso, g/d Contenido en proteína de la ganancia, % Contenido en Met de la ganancia proteica, % Contenido en Cys de la ganancia proteica, % 14,1 15,0 0,78 1,40 14,7 < 0,05 18,5 < 0,05 0,86 0,06 1,15 0,01 14,7 14,4 1,98 1,47 14,7 13,2 1,97 1,48 10,2 8,7 19,5 2,40 1,59 20,9 2,28 1,98 56,6 16,3 1,30 1,04 59,6 NS 17,3 < 0,05 1,41 NS 0,97 NS NS NS NS NS NS NS NS 0,04 Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Ganancia total en Met de diferentes componentes corporales de lechones 0.16 ‐44% Diet + Dieta + Diet ‐ Dieta ‐ P < 0,01 NS 0.12 1.2 0.1 1 Met g/d 0.14 ‐61% 0.08 P < 0,01 0.8 0.6 NS NS NS 0.06 0.04 0.4 0.02 0.2 0 0 Carcass Canal LM LM NS = no significativo LM = músculo Longissimus dorsi Blood Sangre Intestines Intestinos Liver Hígado Rest Restos Ciertos componentes mantienen su composición Podrían ser una PRIORIDAD para el animal Met g/d 1.4 Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Composición en aminoácidos de diversas proteínas corporales (Pearson & Young, 1989) Aminoácido, % Lys Met Cys Thr Trp Val Ile Leu Phe Tyr His Arg Ser Gly Ala Asp Glu Pro Asn Gln Hyp Hyl CPM Actina Colágeno 10,7 1,8 0,9 5,5 0,5 4,6 4,4 11,3 3,1 2,2 2,0 5,6 5,6 3,3 8,0 5,3 13,3 1,5 3,8 6,4 ‐ ‐ 7,0 4,1 1,4 6,9 1,2 5,4 ‐ 7,6 3,1 4,0 2,0 4,8 5,9 7,5 8,0 9,0 11,3 4,9 ‐ 2,8 0,8 ‐ 2,0 ‐ 2,4 1,1 2,4 1,1 0,2 0,5 5,1 4,3 33,1 10,6 4,6 7,1 12,1 ‐ ‐ 9,3 0,6 ‐ ‐ ‐ El cambio en el contenido en Met del músculo Longissimus dorsi La contribución de las distintas proteínas del músculo HA CAMBIADO CPM = cadenas pesadas de miosina Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Contenido en CPM & actina del músculo Longissimus dorsi de lechones Densidad óptica/16 g N Diet + Diet ‐ Dieta + Dieta ‐ 8 7 6 5 4 NS NS 3 2 1 0 CPM Myosin-HC CPM = cadenas pesadas de miosina Actina Actin Conclusiones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Contenido en OH‐prolina de la proteína de diferentes componentes corporales de lechones (indicador del colágeno) Dieta + Diet + 6.00 Dieta ‐ Diet ‐ P < 0,01 Hyp g/16 g N 5.00 4.00 NS 3.00 NS 2.00 NS NS 1.00 0.00 Carcass Canal LM LM Intestines Intestinos NS = no significativo LM = músculo Longissimus dorsi Liver Hígado Rest Restos Conclusiones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Contenido en histidina de la proteína de diferentes componentes corporales de lechones (indicador de la degradación proteica) Diet + Diet ‐ Dieta + Dieta ‐ NS 8.00 7.00 P < 0,01 His g/16 g N 6.00 5.00 4.00 P < 0,01 NS 3.00 NS NS 2.00 1.00 0.00 Canal Carcass LM LM Sangre Blood NS = no significativo LM = músculo Longissimus dorsi Intestinos Intestines Hígado Liver Restos Rest Conclusiones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones 2. Evaluar el efecto de la deficiencia en AA azufrados de la dieta sobre la síntesis proteica y la proteolísis de lechones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones •12 lechones Piétrain × (LW×LD) DIETA - (13C)‐Valina 75 % ad libitum DIETA + 6 semanas de edad (~14 kg) 10 días Técnica de balance de N y sacrificios comparados Semitendinoso Romboide Longissimus dorsi Hígado Intestino delgado Piel Riñones Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Peso relativo de los componentes corporales de lechones Dieta – Dieta + P‐valor Componente (g/kg PV) Peso vivo (PV, kg) Músculo Semitendinoso Longissimus dorsi Romboide Hígado Intestino delgado Yeyuno proximal Yeyuno distal Ileon Riñones NS = no significativo 12,5 13,0 NS 3,45 15,4 0,42 24,6 3,43 17,1 0,42 24,1 NS 0,09 NS NS 11,7 13,2 13,5 5,55 11,2 NS 10,8 <0,001 12,4 NS 5,45 NS Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Turnover proteico (Bergen, 2008) Síntesis proteica Deposición de proteína Deposición de proteína = Síntesis proteica Proteolísis ‐ Proteolísis Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Actividad de las enzimas proteolíticas en los componentes corporales de lechones Dieta – Dieta + P‐valor Actividad proteasoma* Músculo Semitendinoso 2,28 1,91 <0,05 Longissimus dorsi 2,17 1,96 NS Romboide 2,74 2,79 NS Hígado 98,9 106 NS Intestino delgado Yeyuno proximal 234 244 NS Yeyuno distal 243 253 NS Ileon 192 206 NS Riñones 48,8 56,8 NS en proceso Piel * Unidades relativas de fluorescencia/min y mg proteína NS = no significativo Dieta – Dieta + P‐valor Actividad calpaina* Músculo Semitendinoso Longissimus dorsi Romboide Hígado Intestino delgado Yeyuno proximal Yeyuno distal Ileon Riñones Piel 1,40 1,67 1,59 34,1 57,8 52,2 45,7 18,3 1,27 1,50 1,76 33,4 NS NS NS NS 55,3 44,9 46,7 17,9 en proceso NS NS NS NS * Unidades relativas de fluorescencia/min y mg proteína NS = no significativo Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones Tasa fraccional de síntesis de proteína (ks) y su eficiencia (KRNA) de los componentes corporales de lechones Dieta – Dieta + KRNA (g/g x día) ks (%/día) Músculo Semitendinoso Longissimus dorsi Romboide Hígado Intestino delgado Yeyuno proximal Yeyuno distal Ileon Riñones Piel Dieta – Dieta + P‐valor P ‐valor 4,11 4,33 4,24 62,8 87,6 35,0 4,95 6,35 3,85 63,5 0,10 0,01 NS NS 87,5 en proceso en proceso 33,8 en proceso NS % de la masa proteica sintetizada por día NS = no significativo NS Músculo Semitendinoso Longissimus dorsi Romboide Hígado Intestino delgado Yeyuno proximal Yeyuno distal Ileon Riñones Piel 2,98 2,95 4,33 10,00 23,7 3,80 0,03 4,91 <0,001 4,06 NS 9,54 NS 25,4 en proceso en proceso 9,84 9,24 en proceso NS NS g proteína sintetizada por ARN ribosómico y día NS = no significativo Contexto Objetivo Material & Métodos Resultados Conclusiones CONCLUSIONES • El contenido en Met de la proteína corporal NO es CONSTANTE • Los diferentes componentes responden de forma diferente al aporte deficiente en AA azufrados (ganancia total en Met): • Sangre, intestinos e hígado = menor respuesta • Canal, músculo Longissimus dorsi, y restos = mayor respuesta • El músculo Longissimus dorsi presenta una gran PLASTICIDAD: • Ganancia en peso • Contenido en proteína de la ganancia • Contenido en Met de la ganancia en proteína • Tasa fraccional de síntesis (ks) y su eficiencia (KRNA) Agradecimientos Carlos COBO‐ORTEGA, Yolande JAGUELIN, Anne PASQUIER, Nadine MEZIERE, Philippe Ganier, Jean‐Noël THIBAULT, Georges GUILLEMOIS, Jean‐François ROUAUD, Patrick TOUANEL, Fabien GUERIN, Francis LE GOUEVEC, Alain CHAUVIN, Bernard CARRISSANT, Hervé DEMAY, Roberto BAREA, Louis LEFAUCHEUR, Jaap van MILGEN, Nathalie Le FLOC’H Gracias por vuestra atención