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V Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica XVI Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica VI Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular Clave: (768208) Fecha: (1/14/2008) INVESTIGACIÓN DE PLÁSMIDOS BACTERIOCINOGÉNICOS EN CEPAS MEXICANAS DE Staphylococcus aureus . Ruiz-Palma, Socorro (2); Espinosa-Lara, Alicia (1); Veláquez-Ávila, Marta(1) (1)Laboratorio de Genética Microbiana. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas (IPN). Prol. de Carpio y Plan de Ayala s/n C.P. 11,340. D.F. México.(2)Universidad Tecnológica de Tecámac. Estado de México. e-mail: [email protected] S. aureus es un microorganismo que ocasiona problemas a nivel de piel y de aparato respiratorio, ocupa los primeros lugares como agente causal de infecciones intrahospitalarias; poseen DNA extracromosómico en el que reside la resistencia a antimicrobianos, producción de toxinas y de bacteriocinas, que son proteínas de tipo antibiótico que inhiben el desarrollo de bacterias de la misma especie y especies relacionadas. Se ha determinado que las bacteriocinas están codificadas en DNA plasmídico y que aseguran la prevalencia de la cepa en diferentes hábitats. En el presente trabajo, se determinó la existencia de cepas de S. aureus de origen clínico productoras de bacteriocinas, se estudiaron 40 cepas provenientes del Instituto Nacional de Rehabilitación (I.N.R.) y del Centro Médico "La Raza" (C.M.R.), de las cuales se eligieron posteriormente, ocho cepas. Se confirmó el género y la especie mediante pruebas convencionales. La sensibilidad a antimicrobianos se determinó por el método de Kirby y Bauer. La bacteriocina se puso de manifiesto en medio BES (BHI-Extracto de levadura-Sacarosa)a pH 6.5. El DNA plasmídico se extrajo con la técnica modificada de Birnboim y Doly identificándose por electroforesis en geles de agarosa al 1.2 porciento. La curación se realizó con dodecil sulfato de sodio (SDS), aislándose a las cepas curadas por la técnica de réplica en placa. Todas las cepas fueron resistentes a penicilina G y a ampicilina y sensibles a trimetoprimsulfametoxazol, las del C.M.R., presentaron además, resistencia a cefalosporinas. Cada cepa produjo una bacteriocina diferente, de acuerdo a su espectro de acción sobre las 40 cepas iniciales que se emplearon como indicadoras.Las cepas del I.N.R.,presentaron un sólo plásmido con una migración electroforética semejante, con excepción de la cepa 14, mientras que, las del C.M.R., presentaron plásmidos diferentes. Para la curación se usó la resistencia a ampicilina como marcador de selección, utilizando diferentes concentraciones de SDS,el porcentaje de curación varió de 0.09 a 1.4 porciento. El análisis de las cepas curadas en su resistencia a antibióticos, su producción de bacteriocina y su DNA plasmídico sugiere que la resistencia a antibióticos reside en un transposón del plásmido bacteriocionogénico, que se segrega al tratar con SDS. En todas las cepas estudiadas la bacteriocina está codificada en un plásmido de aproximadamente 23 kilobases, excepto para la cepa 14 que produce una bacteriocina de amplio espectro. Palabras clave: bacteriocina; plásmidos; S. aureus Área: Biomedicina y salud Mar del Norte No. 5, Col. San Álvaro Azcapotzalco C. P. 02090, México, D. F. Tel. y Fax: 5623 3088 email: [email protected], [email protected]
