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XII Congreso Nacional de Biotecnología y Bioingeniería RETORNO DEGRADACIÓN EN LÍQUIDO RUMINAL DE UN EXTRACTO FIBROLÍTICO PRODUCIDO POR Trametes sp. EUM1 Alis Márquez Araque1, Germán Mendoza2, Sergio Gonzáles3, Silvia Buntinx4 y Octavio Loera5 1 UNAM-FMVZ. Doctorado en Ciencia de la Producción y Salud Animal. 2 UAM-Xochimilco. 3Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo. 4UNAM-Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, 5 UAM-Iztapalapa. 1 Fax: 55-58046401 E-mail:[email protected] Palabras claves: Enzimas, Trametes sp. EUM1 Sustrato. Degradación en líquido ruminal. Metodología. La degradación de las enzimas se evaluó mediante la liberación de nitrógeno amoniacal (N-NH3) incubando las enzimas en líquido ruminal por 3, 6 y 12 h. El diseño fue un completamente aleatorizado con arreglo factorial (3x2x2). Los factores fueron: el sustrato: xilan, carboximetilcelulosa (CMC) y sin sustrato; nivel de proteína (0.28 y 0.55 mg) y tiempos de contacto (0 y 1 h) y los promedios se compararon mediante la prueba de Tukey. Resultados y discusión. El sustrato tuvo efecto (P<0.05) sobre la concentración de N-NH3. En los tratamientos enzima sin sustrato el N-NH3 fue mayor (P<0.05) que en enzima con sustrato (Cuadro 1). La menor (P<0.05) concentración de N-NH3 se observó con CMC. Los mayores incrementos se observaron después de las 6 y a las 12 h, indicando que se presenta mayor degradación de las enzimas. En estudio con otras enzimas se ha observado que la actividad en líquido ruminal permanece constante hasta las 6 horas de incubación, indicando estabilidad (3) Cuadro 1. Concentración de N-NH3 (mg/dl) en líquido ruminal con enzima de Trametes sp. EUM1 incubada con diferentes sustratos Sustrato Xilan CMC Sin sustrato EEM ab,c Tiempo de incubación (h) 3 6 12 3.24b 4.03ª 5.64b 2.62b 3.12b 4.13c 4.64ª 4.38ª 7.09ª 0.26 0.21 0.34 : letras distintas en la misma columna indican diferencias (P<0.05) EEM: error estándar de la media Al mayor nivel de proteína se observó menor (P<0.05) concentración de nitrógeno (Fig. 1). Solo la interacción sustrato*proteína fue significativa a las 6 y 12 h de incubación. El tiempo de contacto de la enzima con el sustrato fue significativo con CMC al menor nivel de proteína a las 12 h de incubacion. 8 0.28 mg 7 0.55 mg 6 N-NH3 (mg/dl) Introducción. Las enzimas fibrolíticas se han utilizado para mejorar la utilización de los alimentos para rumiantes (1). Su actividad y estabilidad en el rumen se ve afectada por diferentes factores. La formación de un complejo enzimasustrato es un factor que puede influir en la estabilidad de las enzimas en el medio ruminal (2), protegiéndolas de la degradación por proteasas ruminales. Otros factores como el tiempo de contacto y la concentración de proteína de la enzima pueden tener efectos sobre la degradación. El hongo Trametes sp. EUM1 produce enzimas fibrolíticas con potencial para ser utilizados en alimentación de rumiantes. El objetivo fue evaluar la degradación en líquido ruminal de las enzimas producidas por el hongo Trametes sp. EUM1 con o sin contacto previo al sustrato antes de ser incubadas con microorganismos ruminales. 5 4 3 2 1 0 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Tiempo de incubacion (h) Fig. 1. Degradación en líquido ruminal de las enzimas de Trametes sp. EUM1 a dos niveles de proteína Conclusión. La presencia y el tipo de sustrato influyen en degradación de las enzimas de Trametes sp. EUM1 líquido ruminal. Agradecimiento.El proyecto CONACYT (AZ782-Z) estuvo financiado por Bibliografía. 1. Dawson, K.A. and J.M. Tricarico. 1999. The use of exogenous fibrolytic enzymes to enhance microbial activities in the rumen and the performance on ruminant animals. In: Lyons, T.P. and K.A. Jacques (Eds). Biotechnology in the Feed Industry. Proc. 15th Annu Symp. Nottingham University Press. pp. 303-312 2. Beauchemin, K.A., D. Colombato, D.P. Morgavi and W.Z. Yang. 2003. Use of exogenous fibrolytic enzymes to improve feed utilization by ruminants. J. Anim. Sci. 81 (E. Suppl. 2):E37-E47 3. Morgavi, D.P., K.A. Beauchemin, V.L. Nsereko, L. Rode, T.A. McAllister, A.D. Iwaasa, Y. Wang and W.Z. Yang. 2001. Resistance of feed enzymes to proteolytic inactivation by rumen microorganism and gastrointestinal proteases. J. Anim. Sci.79:1621-1630