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Ponencia
Las enzimas líticas fágicas (enzibióticos)
como agentes antimicrobianos
Rubens López, Ernesto García y Pedro García
Departamento de Microbiología Molecular, Centro de Investigaciones Biológicas (CSIC), Madrid
El preocupante y creciente desarrollo de las resistencias bacterianas ha hecho que desde hace unos años se piense de
nuevo en los fagos como una alternativa terapéutica al uso de los antimicrobianos. En esta ponencia se plantea el uso de
alternativas terapéuticas, tales como las enzimas líticas codificadas por los fagos, para las infecciones causadas por
Streptococcus pneumoniae. Las enzimas líticas o murein-hidrolasas son proteínas que destruyen la pared celular de las
bacterias. El empleo de dos de estas enzimas, aisladas y caracterizadas en nuestro laboratorio (la amidasa Pal y la lisozima Cpl-1, codificadas respectivamente por los fagos Dp-1 y Cp1), permitió a Fischetti y cols. (1) erradicar el estado
de portador en la nasofaringe de ratones infectados por neumococo y acuñar el término “enzibióticos” para estas lisinas.
En todos los ensayos se usó la cepa S. pneumoniae 541, serotipo 6B (2). Los genes cpl1 y pal fueron clonados y
expresados en plásmidos adaptados a Escherichia coli, y sus productos fueron purificados por métodos ya descritos (2).
Los ensayos biológicos se realizaron usando ratones BALB/c de 8 a 12 semanas de edad y 19 a 22 gramos de peso (3).
Los animales que habían sido infectados por vía intraperitoneal con 5 × 107 UFC de la cepa 541 murieron dentro de
las 72 horas siguientes. Por el contrario, aquellos que fueron tratados una hora después de la inoculación bacteriana con
Pal o Cpl-1 (200 µg; 1,100 unidades) resultaron protegidos frente a la infección. La bacteriemia en los ratones no protegidos alcanzó una concentración en sangre >107 UFC/ml, mientras que en los ratones protegidos por el enzibiótico el
recuento de bacterias fue, en las primeras horas después del tratamiento, <106 UFC/ml, y posteriormente no se detectaron bacterias.
Se puso de manifiesto un significativo efecto sinérgico con el empleo simultaneo de Pal y Cpl-1, ya que una dosis
de 2,5 µg de cada uno de los enzibióticos bastó para proteger a los ratones infectados. Recientemente hemos comprobado que el empleo de la enzima autolítica mayoritaria de neumococo (amidasa LytA) también producía un efecto protector. Estos resultados representan la primera aportación experimental sobre el uso de los enzibióticos en un modelo de
sepsis, y estimulan el análisis futuro de otras estrategias experimentales que incluyen el empleo de enzimas quiméricas,
ya desarrolladas en nuestro grupo, que podrían ser de utilidad terapéutica frente a otros microorganismos patógenos.
BIBLIOGRAFÍA
1. Loeffler, J.M., Nelson, D., Fischetti, V.A. Science 2001; 294: 2170-2172.
2. Sheehan, M.M., García, J.L., López, R., García, P. Mol Microbiol 1997; 25: 717-725.
3. Casal, J., Aguilar, L., Jado, I. y cols. Antimicrob Agents Chemother 2002; 46: 1340-1344.