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SECCIÓN 5
Comparación de la capacidad embriogénica in vitro entre genotipos locales de maíz y
estudio de los genes involucrados mediante la técnica de TILLING.
González G1, Pacheco MG1, Etchart V1, Décima Oneto C1, Kandus M1, Salerno JC1,
Eyherabide G2, Presello D2 y Lewi D1.
1
Instituto de Genética, CICVyA, INTA, Argentina
2
EEA Pergamino, INTA, Argentina
[email protected]
La embriogénesis somática (ES) es el proceso por el cual a partir de una célula somática
se genera un embrión somático. Los protocolos de transformación de maíz se basan en
este proceso para regenerar plantas transgénicas. La capacidad de recuperación de
plantas por ES es genotipo-dependiente y es baja en líneas de maíz agronómicamente
favorables para Argentina. En trabajos anteriores se han evaluado líneas pertenecientes
al programa de mejoramiento de INTA en cuanto a su capacidad embriogénica in vitro,
obteniendo respuestas diversas para este carácter. Sin embargo, se identificaron tres
líneas (Líneas 19, 23 y 26) que combinan buen comportamiento agronómico y buena
respuesta in vitro. Uno de los objetivos del presente trabajo fue determinar la capacidad
de recuperación de plantas por embriogénesis somática de los híbridos resultantes de los
cruzamientos recíprocos de esas líneas. Se determinaron las frecuencias de callos
embriogénicos, de embriones somáticos maduros y de plántulas regeneradas para cada
genotipo. El cruzamiento 19x23 se destacó en cada uno de los parámetros evaluados
superando los resultados de sus parentales. Sin embargo, el cruzamiento recíproco 23x19- no presentó el mismo comportamiento, indicando la existencia de efectos
maternos en la genética del carácter. Por otro lado, se compararon las secuencias de tres
genes (ZmSERK, ZmGSH y ZmKN1) propuestos en la bibliografía como reguladores de la
embriogénesis somática en maíz. Para tal fin, se utilizó la técnica de TILLING y se
compararon dichas secuencias en seis líneas contrastantes. No se identificaron
diferencias en las secuencias codificantes de dichos genes en las líneas evaluadas. Este
resultado indicaría que las diferencias en la respuesta in vitro podrían deberse a la
expresión diferencial de dichos genes. En la actualidad se están realizando ensayos de
PCR cuantitativa sobre estos genes para comprobar dicha hipótesis.