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XVIII Congreso Nacional de Ingeniería Bioquímica
VII Congreso Internacional de Ingeniería Bioquímica
X Jornadas Científicas de Biomedicina y Biotecnología Molecular
EFECTO DE IAA/KIN SOBRE CULTIVOS DE RAÍCES DE BRÓCOLI TRANSFORMADAS
CON EL GEN l1 DEL HPV
AUTORES Juan Manuel, Jiménez A.1; María del Carmen, Montes H.1; Emma Gloria, Ramos R.1; Fernando
José, Esparza G.1; Armando, Ariza C.2; Josefina, Pérez V.3; Octavio, Gómez G.1; Graciano, Calva C.1
DIRECCIÓN: 1Departamento de Biotecnología y Bioingeniería, CINVESTAV-IPN, 2Departamento de Química,
CINVESTAV-IPN, 3Posgrado en Ingeniería Bioquímica, TESE
Email: [email protected], [email protected]
INTRODUCCIÓN
El cultivo de raíces transformadas, es una
alternativa viable para la producción de proteínas
heterólogas[1]. Estas raíces pueden propagarse
indefinidamente en cultivos in vitro para manipular
la composición del medio de cultivo y estudiar el
efecto de los parámetros nutricionales y de proceso
sobre la acumulación del producto transgénico [2].
En estudios previos hemos reportado el
establecimiento de cultivos de raíces transformadas
con el gen l1 [3]. Ahora se reporta la generación de
líneas transformadas con el gen l1 truncado en la
señal de localización nuclear, la eliminación de esta
señal aumenta la eficiencia de formación de VLP in
vitro [4]. También se reporta el efecto del ácido
indol acético (IAA) y cinetina (Kin) sobre el
crecimiento raíces transformadas con el vector
binario pCAMBIA 1105.1 con la finalidad de
favorecer la generación de biomasa.
MATERIALES Y MÉTODOS
La construcción pCAMHPV16L1 se preparó
mediante clonación del gen l1 del HPV16 en
pCAMBIA 1105.1. Con esta construcción y con
pCAMBIA se indujeron raíces transformadas vía
Agrobacterium rhizogenes. La transformación se
confirmo mediante la morfología de las raíces y
actividad de β-glucuronidasa. Para evaluar el efecto
de los reguladores de crecimiento IAA (acido indol
acético) y Kin (Kinetina) se utilizaron diseños
experimentales factoriales teniendo como variables
de respuesta el peso fresco y seco.
RESULTADOS
β-glucuronidasa y fenotipo característico de alta
vellosidad y rápido crecimiento.
En el análisis del efecto de IAA/Kin la mayor
producción de biomasa fueron los que se
encontraban en la región de las concentraciones
mayores de IAA mientras que los tratamientos con
las concentraciones más altas de Kin fueron los que
mostraron poco o nulo crecimiento.
CONCLUSIONES
Se establecieron líneas de raíces transformadas de
brócoli con pCAMBIA y con el gen l1 sin la señal de
localización nuclear.
El IAA promueve el incremento a concentraciones
de 0.25 y 1 mg/L, mientras que Kin, a las mismas
concentraciones, inhibió el crecimiento.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Jiménez, J. M., G. Calva, et al. (2010): Cultivo
de raíces aéreas de brócoli transformadas con la
proteína L1 del virus del Papiloma humano,
CENIC Ciencias Biólogicas, 41.
2. Sunil Kumar, G. B., T. R. Ganapathi, et al.
(2006): Expression of hepatitis B surface antigen
in potato hairy roots. Plant Science, 170(5): 918925.
3. Webb, E., J. Cox, et al. (2005): Cervical Cancercausing Human Papillomaviruses have an
Alternative Initiation Site for the L1 Protein, Virus
Genes, 30(1): 31-35.
4. Wu, C. H., Y. H. Dewir, et al. (2006):
Optimization of culturing conditions for the
production of biomass and phenolics from
adventitious roots of Echinacea angustifolia,
Journal of Plant Biology, 49(3): 193-199
Se establecieron líneas de raíces transformadas
con pCAMBIA y con el gen l1 positivas al ensayo de
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