Download tabla 1

Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos
Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso
Cocos Gram Negativos - 1
U.T. 12 - 5 Bloque temático III
Familia Neisseriaceae
Introducción
Dentro de esta familia encontramos principalmente 2 géneros, semejantes en cuanto a morfología, actividad
metabólica y habitat acostumbrado, pero difieren en su potencial patógeno y características genéticas. Los 2
géneros son : Neisseria y Branhamella, a este último por estudio genéticos, se considera subgénero de otro
de esta familia que es la Moraxella, aunque antiguamente se incluían en Neisserias, siendo la especie más
común la Branhamella catarrhalis.
Morfología
Son cocos gram (-), se presentan en pares como forma de grano de café, por tener los lados adyacentes
aplanados, no presentan esporas, inmóvil, hay cepas encapsuladas y otras producen un pigmento verde
amarillento, aerobios estrictos, catalas y oxidasa positivo, poco fermentadores.
Cultivo
Crecen a 35-37ºC, luego son mesófilas, en una atmósfera de 10% de CO2, la cual se consigue mediante
el sistema de la vela o en medios de cultivo que llevan un sobre con una sustancia capaz de crear esa
atmósfera. Son bacterias muy susceptibles a influencias ambientales desfavorables como temperatura alta y
sequedad; por lo que es conveniente sembrar inmediatamente en un medio adecuado; si esto no fuera posible
se utiliza un medio de transporte como el Stuart, que no es nutritivo, pero conservar las bacterias para una
posterior recuperación. También puede emplearse un medio de cultivo de transporte nutritivo para desarrollo
de las bacterias. Como medios primarios y de aislamiento puede utilizarse el agar chocolate, siendo más
selectivos y específicos el Thayer-Martin y el TM modificado que son las botellas Tg (Transgrow).El medio
Thayer-Martin, lleva una mezcla de antibióticos (vancomicina, colistina, nistatina y trimetoprim,que lo hace
selectivo para Neisserias.
Neisseria gonorrhoeae.
Esta bacteria produce la enfermedad denominada gonorrea, la cual se transmite por contacto directo
generalmente sexual que en la mujer es asintomática, mientras que en el hombre cursa sin sintomas un 3-10%.
El período de incubación es de 3 a 4 días y se manifiesta con uretritis en el hombre y como cervicitis en
la mujer, también puede producir infecciones anorectal y bucofaringea, sobre todo en homosexuales. De todos
los pacientes con gonorrea, un bajo porcentaje presentan una infección gonocócica diseminada (IGD), por
que las bacterias hayan difundido a sangre. Es frecuente e importante la oftalmía gonocócica en RN, pudiendo
darse también en mujeres.
Muestras:
Toma de endocervix, uretra, anorectal, conjuntiva, faringe y sangre, lesiones cutáneas y líquidos articulares
en el caso de IGD.
Diagnóstico.
Primeramente mediante un frotis bien de cultivo, bien de la muestra, para observar morfología, apareciendo
los cocos intra y extracelulares. Se debe informar de la celularidad existente como mucha o escasa. También
puede realizarse una oxidasa, para comprobar la existencia de un enzima oxidativo, pues son oxidasa positivo.
Mª Isabel Fernández Cerezo.
I. E. S. Jaime Ferrán Clúa.
Profesor Técnico de Formación Profesional.
San Fernando de Henares. (28830 Madrid)
Curso 2003-2004
Código 28038616
Fundamentos y técnicas de análisis microbiológicos
Laboratorio de Diagnóstico Clínico. 2º curso
Cocos Gram Negativos - 2
U.T. 12 - 5 Bloque temático III
Esto sería una identificación presuntiva, para realizar una identificación definitiva, podemos hacer un estudio
de fermentación de H. de C. , son glucosa positivo con porducción de ácido pero no de gas. O podemos
realizar la tinción de anticuerpo fluorescente (AF), siempre con controles positivos y negativos,se marca el Ac
con fluoresceína dando lugar a un conjugado que es capaz de reaccionar con el Ag para el cual se hizo el Ac.
Los conjugados fluorescentes se observan al microscopio para ver si existe o no fluorescencia, por ver las
bacterias de color amarillo verdoso. Puede hacerse por método directo (Ac. para detectar Ag) o indirecto
(Ac. que se comportan como antígenos y se enfrentan a antiinmunoglobulinas.
Sensibilidad a los antimicrobianos.
Los gonococos, son sensibles a la penicilina, aunque actualmente ha aumentado la CMI y se han observado
algunas cepas resistentes, como consecuencia de la presencia del enzima beta-lactamasa. Por ello se puede
usar tetraciclinas como alternativa.
Neisseria meningitidis
Esta bacteria se encuentra en nasofaringe de portadores sanos en un 3% de la población aunque en invierno
puede aumentar esta cifra.
Es el causante de la meningitis, septicimia, endocarditis y neumonía. Puede confundirse con otra Neisseria
que tiene el mismo habitat, pero se diferencia por la fermentación de H. de C.
Muestras.
LCR, sangre, muestras nasofaringeas y de las petequias que se producen en la piel.
Diagnóstico.
Se realiza una tinción Gram, observando los cocos Gram (-), diplococos intracelulares o extracelulares.
Normalmente también suelen alterarse unos parámetros bioquímicos, como la glucosa que disminuye y las
proteínas que aumentan. La oxidasa como prueba presuntiva, que da positiva. Como pruebas confirmativas
la fermentación de H. de C. siendo maltosa y glucosa positivo.Serológicamente se puede indentificar utilizando
sueros polivalentes, mediante pruebas de aglutinación. Pero como método específico y altamente sensible el
la contrainmunoelectroforesis, la cual puede hacerse para identificar Ag. o Ac. donde en un medio alcalino
se enfrenta Ag. de la bacteria cargado negativo y Ac específicos para ese Ag, neutros o ligera carga positiva.
Se realiza una electroforesis y cada uno migra hacia el otro hasta que llegan a encontrarse dando lugar a una
banda de precipitación entre los dos pocillos donde están Ag y Ac. Tb. se realiza para neumococo y
Haemophilus, ambos causantes también de meningitis bacteriana.
La virulencia del meningococo es debida a una endotoxina lipopolisacárida .
Sensibilidad antimicrobiana.
Los meningococos han permanecido sensibles hasta ahora a penicilina y cloramfenicol, pero debe realizarse
la actividad inhibitoria de las sulfamidas al aparecer resistencias en algunos casos, pero son sensibles a
rifampicina, el cual debe utilizarse en familiares que han estado en contacto con el enfermo y no son sensibles
a penicilina.
La prevención se basa en la vacunación, pero esta debe ser sólo a personas de riesgo que han podido estar
en contacto con la bacteria. Además sólo existe vacuna para el meningococo tipo A y C no para el B. El tipo
A se asocia con epidemias y los tipos B y C son ocasionales
Mª Isabel Fernández Cerezo.
I. E. S. Jaime Ferrán Clúa.
Profesor Técnico de Formación Profesional.
San Fernando de Henares. (28830 Madrid)
Curso 2003-2004
Código 28038616