Download 20 Effect of honey, amino acids, acetylsalicylic acid and Bacillus

REVISTA
MEXICANA DE
FITOSANIDAD
Sección
Artículo científico.
Pp. 20−28
Fecha de publicación:
30-abril-2017.
Recibido:
07-11-2017
Aceptado:
03-03-2017
Correos electrónicos
[email protected]
[email protected]
2.2
perez.moises@colpos,mx
[email protected].
ISSN: en tramite
Edita
Sociedad Mexicana de
Fitosanidad.
Calle Amado Nervo
s/n, Tepatepec.
Francisco I. Madero,
Hidalgo. C. P. 42660
Índice, resúmenes,
abstracts, vols., en:
www.revimexfito.com.mx
© 2017 - Revista
Mexicana de Fitosanidad
Maribel Reyes-Osornio1.1, Amado Pérez-Rodríguez2.1, Antonio Talavera-Villarreal3.1,
Moisés Pérez-Rojas2.2 y Marco A. Guzmán-Moreno1*.
1
Orientación en Fitopatología, Orientación en Genética,
Universidad Nacional de Honduras. Centro regional del Litoral Atlántico.
2
Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo. Carretera México-Texcoco km 36.5.
Montecillo, Texcoco, estado de México. C. P. 56230.
2
Departamento de Producción Agrícola-Centro Universitario de la Costa Sur.
Universidad de Guadalajara.
Av. Independencia Nacional #151. C. P. 48900, Autlán, Jalisco, México.
*Autor de correspondencia: [email protected]
RESUMEN:
Se evaluó el efecto de la miel (M), ácido acetilsalicílico (ASA), aminoácidos (AA) y
Bacillus subtilis (BS) en la concentración y severidad del Cucumber mosaic virus (CMV),
peso freso (PF), contenido total de cucurbitacinas y contenido de nutrimentos en calabacita
variedad Grey Zucchini. Los tratamientos evaluados fueron: 1) M+CMV, 2) ASA+CMV,
3) AA+CMV, 4) BS+CMV, 5) Testigo positivo (inoculado con CMV) (TI) y 6) Testigo
sano (sin inocular) (TS). Se inoculó mecánicamente al CMV en las plantas de todos los
tratamientos, excepto en TS. La mayor absorbancia se observó en los tratamientos AA y TI
mientras que la mayor severidad la mostró el tratamiento AA. El mayor peso fresco se tuvo
en TS seguido de M y el menor en AA. En los tratamientos M, BS y ASA se detectaron 12
cucurbitacinas, en AA 11 y en TS y TI 10. El tratamiento M tuvo el mayor contenido total
de cucurbitacinas. Los tratamientos M, BS y ASA tuvieron contenidos de Fe, Zn y Mn
mayores que ambos testigos.
Palabras clave: Severidad de virosis, concentración viral, cucurbitacinas, análisis
nutrimental.
Effect of honey, amino acids, acetylsalicylic acid and Bacillus subtilis against
Cucumber Mosaic Virus in zucchini.
ABSTRACT:
The effect of honey bee (HB), acetyl salicylic acid (ASA), aminoacids (AA) and Bacillus
subtilis (BS) on concentration and severity of Cucumber mosaic virus (CMV), weight fresh
(WF), total amount of cucurbitacins as well as nutrient concentration were evaluated on
plants of zucchini cv. Grey Zucchini inoculated with CMV. Evaluated treatments were: 1)
M+CMV, 2) ASA+CMV, 3) AA+CMV, 4) BS+CMV, 5) Positive control (inoculated with
CMV) (PC) and 6) Negative control (no inoculated) (NC). Plants of all treatments were
inoculated mechanically with CMV, except NC. The highest absorbance value was
registered in AA and TI, while the most severity value was observed in AA. Treatment TS
was the highest value of WF and in the second place was HB; the lowest value was observed
in AA. Treatments M, BS and ASA showed 12 cucurbitacins, AA 11 and TS and TI, 10.
The treatment M was the total amount of cucurbitacins. Treatments M, BS and ASA were
the highest content of Fe, Zn and Mn compared with both controls.
Keys works: Virus severity, viral concentration, cucurbitacins, nutrimental analysis.
(Bacillales: Bacillaceae)
(Unassigned: Bromoviridae)
3
(Cucurbitales: Cucurbitaceae)
1
2
20
Reyes-Osornio et al., Efecto de tratamientos alternativos contra Cucumber Mosaic Virus.
INTRODUCCIÓN
Los virus transmitidos por insectos son una de
las limitantes más importantes en la producción de
hortalizas ocasionando pérdidas económicas en
cultivos como calabacita (Cucurbita pepo L.H. A.
Gray) (Blancard et al., 1996). El Cucumber
mosaic virus (virus mosaico del pepino, CMV)
tiene una amplia gama de hospedantes y puede ser
transmitido por más de 80 especies de áfidos de
manera no persistente (Hadidi et al., 2005). La
aplicación de insecticidas ha sido el principal
método de manejo para enfermedades virales
transmitidas por insectos (Sikora et al., 1998).
Una alternativa al uso de insecticidas para el
manejo de enfermedades virales transmitidas por
áfidos, es el uso de compuestos que fortalezcan las
defensas naturales de las plantas (Gozzo, 2003),
mediante procesos como la resistencia sistémica
adquirida (RSA) y resistencia sistémica inducida
(RSI) (Van Loon et al., 1998). La RSA y RSI han
sido efectivas contra hongos, bacterias, virus,
nematodos, plantas parásitas e insectos fitófagos
(Sticher et al., 1997; Van Loon et al., 1998). El
ácido acetil salicílico (ASA) es un inductor de
RSA cuya concentración se incrementa local y
sistémicamente antes de que aparezca la
resistencia (Coquoz et al., 1995). La aplicación de
aminoácidos
promueve
y
aumenta
la
antioxidación de carbohidratos en los tejidos
foliares, meristemáticos y parenquimáticos de la
planta, con el consecuente incremento en el
crecimiento y desarrollo de los mismos (Mckee y
Mackee, 2003). La aspersión de miel de abeja al
follaje aumenta el nivel de energía para la
absorción activa de carbohidratos, minerales,
proteínas, vitaminas, aminoácidos y agua (Crane,
1985 y Martínez et al., 1993), incrementando el
vigor de las plantas debido a su fácil difusión y
penetración a los tejidos (Villegas et al., 2001).
Las cucurbitacinas son metabolitos secundarios
constituidos de triterpenos altamente oxigenados
(Chambliss y Jones, 1966) que pueden alterar el
comportamiento alimenticio de algunos insectos
ya que cuando son aplicados en bajas
concentraciones inhiben la alimentación de
Diabrotica
undecimpunctata
howardi
y
Acalymma vittatum (Ferguson et al., 1983). En
base en lo anterior, el objetivo del estudio fue
determinar el efecto de la miel, aminoácidos y
ácido acetilsalicílico en la severidad, peso fresco,
absorbancia, concentración de nutrimentos,
contenido y concentración de cucurbitacinas en
plantas de calabacita infectadas con CMV.
MATERIALES Y MÉTODOS
Establecimiento de almácigos: Se sembraron
semillas de calabacita Grey Zucchini de Caloro®
en almácigos de unicel de 200 cavidades (una
semilla/cavidad) en sustrato peat moss®. Durante
la germinación de la semilla y emergencia de la
plántula, el almácigo permaneció en una cámara
de ambiente controlado, con una temperatura
promedio de 25 °C día-noche y un fotoperíodo de
12 h. Los almácigos se regaron diariamente hasta
el trasplante de plántulas.
Trasplante: Seis días después de la siembra, las
plántulas se trasplantaron individualmente en
vasos de unicel de un litro de capacidad, usando
como sustrato una mezcla de tierra negra y tierra
de hoja (1:1 v/v). Las plantas se regaron cada
cuatro días con una solución fertilizante con la
fórmula 12-12-17 + 2 Mg a una dosis de 1 g/l.
Tratamientos: Se evaluaron 6 tratamientos con
20 repeticiones: 1) miel de abeja (M) a una
concentración de 2 ml/100 ml de agua; 2) ácido
acetilsalicílico (ASA) a una concentración de 1 g/l
de agua; 3) aminoácidos (AA), mediante el
producto comercial Viretrol® a una dosis de 0.5
ml/100 ml de agua; 4) Bacillus subtilis (BS),
mediante el producto comercial Biologic® a una
dosis de 0.5 ml/100 ml de agua; 5) Testigo
inoculado con CMV (TI) y 6) Testigo sin inocular
(TS). Todos los productos se aplicaron al follaje
hasta punto de goteo cada tercer día a partir del
trasplante, excepto la primera aplicación en el
caso del tratamiento con B. subtilis el cual se
aplicó al suelo a los cuatro días después de la
siembra y posteriormente cada tercer día igual que
los demás.
Inoculación: Siete días después de la siembra se
hizo la inoculación mecánica del Cucumber
mosaic virus (CMV) en las plántulas. Como
inóculo se utilizaron plantas de calabacita
infectadas con este virus mantenidas en cámara de
crecimiento para evitar la llegada de insectos vectores
21
Rev. Mex. Fitosanidad, 1(1): 20−28, 2017.
y la potencial infección por otros virus.
La presencia del CMV se confirmó por DASELISA una semana antes de su uso. Se pesaron
6.5 g de tejido foliar de plantas de calabacita que
mostraban mosaico y se molieron en un
macerador (Dayton R-4Z522®) agregando 20 ml
de solución amortiguadora de fosfatos + DIECA
pH 7.2. La savia infectiva se mantuvo sobre un gel
refrigerante hasta su inoculación en las hojas
cotiledonales, sobre las que previamente se
espolvoreó carborundum 600 mallas para ser
frotadas posteriormente con un hisopo
perfectamente humedecido en la savia infectiva
sobre toda la superficie foliar.
Severidad: Veinte días después de la
inoculación (ddi) se evaluó la severidad de la
enfermedad en siete de las 20 plantas de cada
tratamiento seleccionadas al azar, para medir esta
variable se utilizó una escala esquematizada
arbitraria, con los siguientes valores: 0) planta
asintomática, 1) enchinamiento foliar, 2)
enchinamiento foliar y clorosis de venas, 3)
mosaico,
deformación
de
foliolos
y
achaparramiento, 4) mosaico severo, deformación
foliar y achaparramiento, 5) clorosis, deformación
de foliolos y achaparramiento y 6) deformación
foliar, clorosis y achaparramiento severos
(Apéndice 2).
Peso fresco: A los 20 ddi se cortaron desde su
base diez plantas tomadas al azar de cada
tratamiento y se pesaron de manera individual en
una balanza granataria Ohaus TP200®. Estas
plantas fueron utilizadas posteriormente para el
análisis nutrimental (Apéndice 1).
Concentración viral: A los 15 ddi se realizó la
prueba
DAS-ELISA
para
conocer
la
concentración relativa del CMV en las plantas de
cada uno de los tratamientos evaluados, excepto
en las plantas testigo (no inoculadas). En este caso
se tomaron dos hojas jóvenes del tercio superior
de seis plantas tomadas al azar por tratamiento y
se utilizó antisuero, conjugado, positivo y
negativo de CMV adquirido en AGDIA,
siguiendo el protocolo de Clark y Adams
modificado por Sutula et al. (1986). Las lecturas
de absorbancia se realizaron a 405 nm en un lector
de ELISA Opsys Microplater Reader®. Los
valores de absorbancia mayores a 0.1 se
consideraron positivas.
Extracción de cucurbitacinas: A los 20 ddi, las
diez plantas restantes de cada tratamiento se
cortaron a nivel del suelo y se colocaron en bolsas
plásticas debidamente identificadas. Para cada
tratamiento, el peso del tejido foliar se ajustó a
135.9 g. Para la extracción de cucurbitacinas se
siguió la metodología reportada por Afifi et al.
(1999).
Cromatografía: Se pesaron 20 mg el extracto
de éter etílico y se diluyeron en 2 ml de éter etílico
para realizar cromatografía en capa fina
disolviéndolo en tolueno-acetato de etilo (3:1). De
esta solución se hicieron quince aplicaciones con
capilares sobre placas de sílica (60 F254 de 20 X20,
Merck®) las cuales se pusieron dentro de una
cámara de extracción durante tres horas.
Transcurrido este tiempo, con un aspersor se
aplicó vainillina-ácido fosfórico al 50 % (0.2 g de
vainillina + 12 ml de H2PO5 al 50 % + 8 ml de
agua destilada) como revelador cromogénico en
toda la placa. La observación de las bandas de
revelado se hizo bajo luz UV y luz blanca. La
identificación de los metabolitos se realizó
comparando su valor de retención (rf) en la placa
de cromatografía.
Análisis nutrimental: Se obtuvo de 151 g de
tejido vegetal fresco de cada uno de los
tratamientos, el cual se lavó y se secó a
temperatura ambiente para determinar el
contenido de nitrógeno por el método de
digestado con mezcla diácida y determinado por
arrastre de vapor, fósforo por fotocolorimetría y
reducción con molibdo-vanadato, potasio por
espectrofotometría de emisión de flama, calcio,
magnesio, fierro, cobre, zinc y manganeso por
espectrofotometría de absorción atómica y boro
por fotocolorimetría con azometina-H.
Análisis de datos: Los datos de severidad
(previa transformación según la función arcsen),
con la ANOVA (peso fresco y absorbancia), y
diferencias significativas (P ≤ 0.05) por
comparaciones de medias por la prueba t-Student
mediante el programa SAS (Statistical Analysis
System Inc., 2002)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Severidad: El tratamiento con mayor severidad
fue el de (AA), el resto de los tratamientos fueron
22
Reyes-Osornio et al., Efecto de tratamientos alternativos contra Cucumber Mosaic Virus.
estadísticamente similares al testigo positivo,
excepto el testigo negativo que tuvo un valor de
cero (Fig. 1A). En un trabajo hecho con plantas de
jitomate inoculadas con CMV a las cuales se les
aplicó aminoácidos dos días después de la
inoculación (al igual que en el presente estudio) se
detectó al virus en la parte apical de las plantas a
partir de la hoja inoculada, mientras que en las
plantas tratadas con aminoácidos ocho días antes
de la inoculación, el virus se detectó sólo en la
hoja inoculada (Santiago, 2007). Lo anterior
sugiere que la aplicación de aminoácidos dos días
después de la inoculación no restringió al virus al
sitio de inoculación y que éste pudo moverse a la
parte apical donde se encuentran las hojas más
jóvenes lo cual pudo estar asociado a la mayor
severidad observada en este tratamiento. Ya que
el fenómeno de Resistencia Sistémica Adquirida
(SAR) confiere resistencia a la planta a una
infección secundaria por patógenos biotróficos,
necrotróficos y hemibiotróficos; y se presenta en
la mayoría de las plantas, sin embargo, el tiempo
y nivel de protección depende de la especie
vegetal y del efector. SAR se caracteriza por dos
procesos de defensa, uno local y otro sistémico,
en los que es requerida la acumulación de genes
relacionados a la patogenicidad (PR) y Ácido
Salicílico (AS) o el Ácido Jasmónico (AJ) (DíazPuentes, 2012).
Peso fresco: El mayor peso fresco se registró en
el tratamiento (TS) seguido del tratamiento de
(M), mientras que el menor valor se tuvo en el
tratamiento de (ASA) (Fig. 1B). Se sabe que la
miel contiene nutrimentos, carbohidratos y
aminoácidos, además de algunas hormonas
(Crane, 1985) que pudieran explicar este
resultado. Los tratamientos (TI) y (BS) fueron
estadísticamente similares pero menores que (TS)
y mayores que el tratamiento (AA) (Fig. 1B). Es
conocido que numerosos aislamientos de especies
de Bacillus y Paenibacillus expresan actividades
supresoras en diversas enfermedades de las
plantas además de promover su crecimiento
(McSpadden, 2004). Sin embargo, estos
resultados difieren de lo reportado por Maldonado
et al. (2008), quienes encontraron que el mayor
peso fresco de plantas de calabacita inoculadas
con CMV se tuvo en los tratamientos con Bacillus
subtilis y ácido acetil salicílico, y el menor peso
en el testigo inoculado. Estas diferencias pueden
atribuirse principalmente al hecho de que en el
presente estudio la aplicación de BS y ASA se
realizó un días antes de la inoculación del CMV,
y el BS se aplicó una vez al trasplante en raíz,
mientras que en el caso de Maldonado et al.
(2008), la aplicación de BS se inició al momento
de la siembra y la de ASA a la emergencia de las
plántulas, esto es, antes de la inoculación del
virus.
Concentración viral: No se observó diferencia
estadística en la concentración viral (valores de
absorbancia) entre el testigo positivo y el
tratamiento de (AA) (Cuadro. 1), los cuales
tuvieron los valores más altos con respecto al resto
de los tratamientos (Fig. 1C). Los valores de
absorbancia de los tratamientos (M) y (ASA)
fueron estadísticamente similares al igual que el
de este último con (BS) (Fig. 1C). Resultados
similares se han obtenido en el caso de calabacita
infectada con CMV y tratada con BS o ASA
(Maldonado et al., 2008) y en el caso de jitomate
infectado con TSWV tratadas con miel (Ramírez
et al., 2006), donde los valores de absorbancia de
las plantas tratadas con estos productos fueron
estadísticamente menores que el testigo.
Contenido de cucurbitacinas: El contenido
total de cucurbitacinas obtenidas del extracto de
éter fue mayor en (M) y menor que en (TS), (TI)
y (AA) (Fig. 1D). Los tratamientos con (ASA) y
(BS) tuvieron un contenido similar de
cucurbitacinas, mismo que fue menor que (M),
pero mayores que el resto de los tratamientos (Fig.
1D).
Número de cucurbitacinas: Los tratamientos
(ASA), (BS) y (M) tuvieron 12 cucurbitacinas
(teñidas de color violáceo o rosado), una más que
(AA) y dos más que en los tratamientos (TS) y
(TI), los cuales tuvieron 11 y 10 cucurbitacinas,
respectivamente (Fig. 2).
Estos resultados son congruentes con el
contenido de cucurbitacinas totales obtenidas del
extracto de éter mencionados previamente ya que
los tres tratamientos con el menor contenido de
cucurbitacinas (AA, TS y TI) son precisamente
los que tuvieron una o dos cucurbitacinas menos;
en el caso del tratamiento (AA) no se observó la
cucurbitacina 2, mientras que en (TS) y (TI) no se
pudieron apreciar las cucurbitacinas 2 y 9 (Fig. 2).
23
Rev. Mex. Fitosanidad, 1(1): 20−28, 2017.
Cuadro 1. Variables (Severidad, absorbancia, PBF) del cultivo de
calabacita, var. Greyes Zucchini, evaluadas en análisis de varianza.
Tratamientos
Severidad
PBF
Absorbancia
ASA
2.9 a
15.4211 e
0.24917 c
GZI
2.9 a
21.1209 c
0.3405 ab
BS
2.8 a
20.6469 c
0.26567 c
MI
2.7 a
20.9501 c
0.29467 b
AA
2.4 b
16.4293 d
0.35167 a
TRI
1 c
33.7436 b
0.38317 a
TRS
0 d
35.5767 a
GZS
0 d
32.4102 b
*Cantidades seguidas de la misma letra, son estadísticamente
similares, T de Student P ≤ 0.05.
Figura 1. Efecto de la aplicación de aminoácidos (AA), ácido acetil salicílico (ASA), miel (M), Bacillus subtilis (BS), testigo
inoculado (TI) y testigo no inoculado (TS) en la A) severidad de la virosis, B) Peso fresco C) absorbancia y D) contenido
total de cucurbitacinas en extracto de éter en plantas de calabacita inoculadas con el Cucumber mosaic virus en invernadero.
*Medias con la misma letra son estadísticamente similares, t de Student P ≤ 0.05.
En estudios realizados con rizobacterias
promotoras de crecimiento (RPCP) en dos
cultivares de pepino, uno con altos y otro con
bajos niveles de cucurbitacina, los resultados
indicaron que las plantas con RPCP de ambos
cultivares contenían niveles significativamente
más bajos de cucurbitacina que las plantas no
tratadas (Zehnder et al., 1997), caso contrario a lo
ocurrido en el presente estudio, pues en el
tratamiento con (BS) se incrementó su contenido.
Esto sugiere que un mecanismo de resistencia
contra el escarabajo del pepino inducido por
RPCP puede involucrar un cambio en la ruta
metabólica de la síntesis de la cucurbitacina. El
soporte de esta hipótesis se basa en estudios
previos, en los cuales se demuestra que las rutas
metabólicas de la cucurbitacina y otros
compuestos de defensa de las plantas comparten
precursores similares (Balliano et al., 1982).
Análisis nutrimental: Los porcentajes de N, P,
K, Ca y Mg fueron muy similares en las plantas
de los diferentes tratamientos ya que las
diferencias entre el nivel más alto y el más bajo
para cada uno de ellos fue menor del 1 % (0.61,
0.04, 0.13, 0.82 y 0.04 %, respectivamente)
(Cuadro 2).
Por el contrario, las diferencias de 9.08 a 52.31
mg∙Kg-1 se observaron en el caso del Fe, Cu, Zn
y Mn (52.31, 9.08, 12.86 y 19.38 %,
respectivamente), los tratamientos de M y BS
presentaron valores iguales de nutrientes (Cuadro
2).
24
Reyes-Osornio et al., Efecto de tratamientos alternativos contra Cucumber Mosaic Virus.
Figura 2. Cromatoplaca en capa fina sistema tolueno:acetato de etilo (3:1) y revelador vainillina/ácido fosfórico al 50 %, que
muestra el número de cucurbitacinas encontradas en extractos de éter en plantas de calabacita sometidas a diferentes
tratamientos: TS, testigo sin inocular; TI, testigo inoculado; AA, aminoácidos; ASA, ácido acetil salicílico; BS, Bacillus
subtilis y M, miel.
*número de cucurbitacina indicada con flechas negras; las flechas rojas marcan las cucurbitacinas no detectadas en esos
tratamientos.
Cuadro 2. Contenido de nitrógeno (N), fósforo (P), potasio (K), calcio (Ca), magnesio (Mg), fierro (Fe), cobre
(Cu), zinc (Zn) y manganeso (Mn) en tejido foliar de plantas de calabacita inoculadas con Cucumber mosaic
virus y sometidas a seis tratamientos.
Nutrimentos
Tratamiento#
N
P
K
Ca
Mg
Fe
Cu
Zn
Mn
mg∙Kg-1
mg∙Kg-1
TS
3860
530
560 4.96
1.06 49.71 15.10 58.54 52.23
TI
3860
570
490 5.12
1.10 44.32
6.02 55.74 40.74
M
3450
550
510 5.56
1.06 94.02 10.76 65.06 60.12
BS
3450
550
510 5.56
1.06 94.02 10.76 65.06 60.12
ASA
4060
530
430 5.30
1.07 96.63
9.98 60.78 54.69
AA
4060
570
440 5.78
1.08 52.53
9.56
52.2 48.93
# (TS)
testigo sin inocular; (TI), testigo inoculado; (M), miel; (BS), Bacillus subtilis; (ASA), ácido acetil
salicílico y (AA), aminoácidos.
Si se consideran como base las concentraciones
de Fe, Cu, Zn y Mn del (TS), se observa una
disminución de todas ellas en el (TI), sobre todo
en el caso del Cu y el Mn con una reducción de
9.08 y 11.49 mg∙Kg-1, respectivamente (Cuadro
1). Por otro lado, el contenido de Fe, Zn y Mn
aumentó en los tratamientos (M), (BS) y (ASA)
con respecto al testigo sano, sobre todo en el caso
del Fe donde se registraron incrementos de 44.31,
44.31 y 46.92 mg∙Kg-1, respectivamente. En el
caso del Cu, los valores obtenidos en estos tres
tratamientos fueron menores en 4.34 a 5.12
mg∙Kg-1 con relación al testigo no inoculado. Los
contenidos de Cu, Zn y Mn fueron menores en
(AA) con respecto al (TS), sobre todo en el caso
del Cu y el Mn (5.54 y 3.3 mg∙Kg-1,
respectivamente) mientras que se tuvo un
incremento de 2.82 mg∙Kg-1 en el contenido de Fe
(Cuadro 2).
A pesar de que en diversos estudios se menciona
que altos contenidos de nitrógeno amoniacal,
fósforo y potasio pueden incrementar la severidad
de diversos virus como el Potato virus Y o
Cucumber mosaic virus (Huber y Watson, 1974;
Huber, 1980; Huber y Arny, 1985), en el presente
estudio estos elementos no parecen tener una
influencia en esta variable debido a que sus
contenidos fueron muy similares en todos los
casos.
Las plantas de calabacita tratadas (M), (ASA) y
(BS) tuvieron la menor concentración de CMV
misma que pudo estar asociada al mayor número
de cucurbitacinas y los más altos contenidos de
Fe, Zn y Mn registrados en estos tratamientos (Fig.
25
Rev. Mex. Fitosanidad, 1(1): 20−28, 2017.
1D, Fig. 2, Cuadro 2). En este último caso, en un
trabajo realizado con diferentes variedades de
jitomate susceptibles y resistentes al Tomato
spotted wilt virus (TSWV) se encontró un mayor
contenido de Fe, Zn y Mn en una variedad
resistente comparado con una susceptible, el cual
estuvo
fuertemente
asociado
a
este
comportamiento (Quintero et al., 2002, datos no
publicados). Asimismo, se encontró que el Fe
estuvo principalmente relacionado con la
resistencia a TSWV en las variedades de jitomate.
Por su parte, Huber (1980) menciona que en
plantas de tomate, tabaco y frijol inoculadas con
el Tobacco mosaic virus presentaron una
disminución de la enfermedad al fertilizarlas con
Fe. Este último elemento está presente en varias
enzimas oxidantes como la catalasa y la
peroxidasa, mientras que en el caso del Cu se le
atribuyen funciones catalíticas como parte de las
enzimas polifenol oxidasa y la ácido ascórbico
oxidasa, todas ellas relacionadas con la defensa de
las plantas (Bidwell, 1979).
CONCLUSIONES
La aplicación de aminoácidos en plantas de
calabacita,
incrementó
la
severidad
y
concentración de CMV y disminuyó el peso
fresco al igual que el ácido acetil salicílico. Los
contenidos de N, P, K y Ca fueron similares en
todos los tratamientos. Hubo una disminución en
la concentración de CMV y un incremento de los
niveles de Fe, Cu, Zn y Mn en las plantas tratadas
con miel, Bacillus subtilis y ácido acetil salicílico
con relación a los testigos inoculados y no
inoculados. En las plantas tratadas con miel,
Bacillus subtilis y ácido acetil salicílico se
detectaron 12 cucurbitacinas, en el tratamiento
con aminoácidos 11 y en las plantas inoculadas y
no inoculadas 10. Finalmente las plantas tratadas
con miel tuvieron el mayor contenido total de
cucurbitacinas.
LITERATURA CITADA
AFIFI, M. S., ROSS, S. A., SOLY, M. A., NAEEM, Z. E.
AND F. T. HALAAWELSH. 1999. Cucurbitacins of
cucumis prophetarum, J. Chem. Ecol., 25(4):
847−859.
BALLIANO, G., CAPUTO, O., VIOLA, F., DELPRINO, L.
AND L. CATTEL. 1982. The transformation of 10a-
cucurbita-5,24-dien-3ß-ol into cucurbitacin C by
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909−913.
BIDWELL, R. G. S. 1979. Fisiología vegetal, Traducido
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Garcidueñas, M. AGT. Editor, S.A. D. F. México.,
784 p.
BLANCARD, D., LECOQ, H. AND M. PITRAT. 1996.
Enfermedad de las Cucurbitáceas. Ed. Mundiprensa, España. 301 p.
CRANE, E. 1985. El libro de la miel. Fondo de la
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Apéndice 1. PESO DE EXTRACTOS
Peso de extracto acuoso y extracto en éter etílico en
calabacita del hibrido TR y la variedad GZ, con diferentes
tratamientos a los 31 días después de la siembra.
Tratamiento
MI
BS
ASA
TRS
TRI
GZI
GZS
AMA
Peso EE
4.149
2.13
1.776
1.136
0.928
0.901
0.882
0.855
Peso EA
2.33
0.85
1.55
2.777
2.286
0.935
3.305
2.194
27
Rev. Mex. Fitosanidad, 1(1): 20−28, 2017.
Apéndice 2. DIAGRAMAS DE SEVERIDAD
Diagramas y escalas de severidad de CMV en calabacita.
No.
Diagrama
Escalas de severidad
de CMV en calabacita.
0
Hoja sana.
1
Enchinamiento
área foliar.
en
el
2
Venas
cloróticas
enchinamiento.
y
3
No.
Diagrama
Escalas de severidad de CMV en
calabacita.
4
Mosaico severo y deformación
foliar y achaparramiento.
5
Clorosis y deformación de foliolos
y chaparramiento.
6
Clorosis severa y deformación
foliar, achaparramiento severo.
Mosaico y deformación
de foliolos además de
achaparramiento.
28