Download ENZIMA CONVERTIDORA DE ANGIOTENSINA (ACE

ANGIOTENSIN
CONVERTING ENZYME
(ACE)
COD 12796 1 x 50 mL
CONSERVAR A 2-8ºC
Reactivos para medir la concentración de ACE.
Sólo para uso in vitro en el laboratorio.
ENZIMA CONVERTIDORA DE
ANGIOTENSINA (ACE)
FAPGG
FUNDAMENTO DEL MÉTODO
2. Pipetear en una cubeta:
La enzima convertidora de angiotensina (ACE) cataliza la hidrólisis del sustrato
furilacriloilfenilalanilglicilglicina (FAPGG), obteniéndose furilacriloilfenilalanina (FAP) y
glicilglicina. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de desaparición
del FAPGG, medido a 340 nm1,2,3.
FAPGG
ACE
Reactivo A
1.0 mL
Muestra
100 µL
3. Mezclar e insertar la cubeta en el instrumento. Poner el cronómetro en marcha.
4. Pasados 3 minutos de incubación a 37°C, anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas
lecturas cada minuto durante 5 minutos.
FAP + Glicilglicina
5. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio (∆A/min).
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
A. Reactivo. 1 x 50 mL. TAPS 100 mmol/L, FAPGG 0,5 mmol/L, azida de sodio 0,96 g/L,
pH 8,2.
6. Calcular la concentración de ACE en la muestra utilizando las fórmulas siguientes:
∆A/min Muestra
x C Calibrador = U/L
∆A/min Calibrador
CONSERVACIÓN
VALORES DE REFERENCIA4
Conservar a 2-8ºC.
Reactivos estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se
conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso.
Indicaciones de deterioro:
− Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco inferior a 0,600 a
340 nm (cubeta de 1 cm).
REACTIVOS AUXILIARES
Calibrador de Bioquímica (BioSystems cod. 18011) o Calibrador de Bioquímica Humano
(BioSystems cod. 18044).
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Los reactivos están listos para su uso.
Los reactivos abiertos y conservados en el compartimento refrigerado del analizador son
estables 3 meses.
EQUIPO ADICIONAL
Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 37ºC para lecturas a
340 nm.
Suero o plasma: 13,3 - 63,9 U/L = 0,22 - 1,06 µkat/L.
Estos valores son sólo orientativos. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
rangos de referencia.
CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda el uso de los Sueros Control Bioquímica niveles I (cod. 18005, 18009 y 18042) y
II (cod. 18007, 18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida.
Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno, así como
procedimientos de corrección en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias
aceptables.
CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
Los datos siguientes se obtuvieron utilizando un analizador A25. Los detalles sobre los datos de
evaluación están disponibles bajo solicitud.
− Límite de detección: 4,20 U/L = 0,07 µkat/L.
− Límite de linealidad: 150 U/L = 2,50 µkat/L.
− Repetibilidad (intraserie):
MUESTRAS
Suero o plasma con heparina recogidos mediante procedimientos estándar. No utilizar muestras
hemolizadas.
La enzima convertidora de angiotensina en suero o plasma es estable 7 días a 2-8ºC o 5 meses
a -20ºC. Como anticoagulante no puede utilizarse EDTA porque inhibe a la ACE.
Se recomienda calibrar al menos cada 3 meses, después de un cambio de lote de reactivo o
cuando lo requieran los procedimientos de control de calidad.
Procedimiento automatizado (Nota 1)
GENERAL
PROCEDIMIENTO
Volúmenes
Filtros
Tiempos
CALIBRACIÓN
OPCIONES
A25
A15
Técnica
Modo de análisis
Tipo de muestra
Unidades
Tipo de reacción
Decimales
Nº Replicados
Nombre de la técnica en
el informe de paciente
ACE
Cinética mono.
SER
U/L
Decreciente
1
1
-
ACE
Cinética mono.
SER
U/L
Decreciente
1
1
-
Lectura
Muestra
Reactivo 1
Reactivo 2
Lavado
Factor predilución
Factor postdilución
Principal
Referencia
Lectura 1
Lectura 2
Reactivo 2
Monocromática
30
300
1,2
2
340
180 s
480 s
-
Monocromática
30
300
1,2
2
340
192 s
480 s
-
Específica
3
3
-
Específica
3
3
-
0,600
150
0,600
150
Tipo de calibración
Replicados calibrador
Replicados blanco
Curva de calibración
Límite absorbancia blanco
Límite blanco cinético
Limite de linealidad
Procedimiento manual
1. Precalentar los reactivos y el instrumento a 37ºC.
M12796c-01
CV
n
3,3 %
20
143 U/L = 2,38 µkat/L
2,5 %
20
− Reproducibilidad (interserie):
CALIBRACIÓN
PROCEDIMIENTO
Concentración media
76,0 U/L = 1,27 µkat/L
Concentración media
CV
n
76,0 U/L = 1,27 µkat/L
5,4 %
25
143 U/L = 2,38 µkat/L
4,4 %
25
− Veracidad: Los resultados obtenidos con este procedimiento no mostraron diferencias
sistemáticas cuando se compararon con un procedimiento de referencia. Los detalles de los
experimentos de comparación están disponibles bajo solicitud.
− Interferencias: La bilirrubina (< 20 mg/dL) no interfieren. La lipemia (triglicéridos > 400 mg/dL)
y la hemoglobina (> 300 mg/dL) pueden interferir. Otras substancias podrían interferir5.
CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
La enzima convertidora de angiotensina (ACE), es una glicoproteína expresada
mayoritariamente en las células endoteliales de los capilares pulmonares, y es liberada al
torrente circulatorio mediante cortes proteolíticos. En el sistema renina-angiotensina, la ACE
cataliza la conversión de angiotensina I a angiotensina II, un potente vasoconstrictor, regulando
la presión sanguínea y la homeostasis electrolítica. La ACE también puede hidrolizar diferentes
sustratos como las encefalinas, neurotensinas y la bradiquinina, participando en su
degradación4.
La medida de la concentración de la ACE en suero es utilizada principalmente para el
diagnostico diferencial de la sarcoidosis pulmonar y para la monitorización de la eficacia de los
tratamientos con esteroides. Otra de sus aplicaciones es en la monitorización del efecto de los
inhibidores de la ACE utilizados para el tratamiento de la hipertensión y de la insuficiencia
cardiaca3,4.
NOTAS
1. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayoría de analizadores automáticos. Solicite
información a su distribuidor.
BIBLIOGRAFÍA
1. Ronca-Testoni S. Direct Spectrophotometric assay for angiotensin-converting enzyme in
serum. Clin Chem 1983;29:1093-1096.
2. Buttery J.E, Stuart S. Assessment and optimization of kinetic methods for angiotensinconverting enzyme in plasma. Clin Chem 1993;39:312-316.
3. Muller BR. Analysis of serum angiotensin-converting enzyme. Ann Clin Biochem
2002;39:436-443.
4. Camós S, Cruz M.J, Morell F, Solé E. Genetic-based reference values for angiotensinconverting enzyme (ACE) according to I/D polymorphism in a Spanish population sample.
Clin Chem Lab Med 2012;50:1749-1753.
5. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
BioSystems S.A. Costa Brava, 30. 08030 Barcelona (Spain)
Quality System certified according to
EN ISO 13485 and EN ISO 9001 standards
04/2014