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XI CONGRESO NACIONAL DE LA CIENCIA DEL SUELO
XI CONGRESO NACIONAL DE LA CIENCIA DEL SUELO
Los resultados obtenidos indican que el EEP comercial utilizado fue un fungicida efectivo. No
obstante, para futuros estudios, debe conocerse su origen botánico y geográfico para poder
estandarizar su posterior uso y si los resultados obtenidos en este estudio son reproducibles
in situ.
INMOVILIZACIÓN DE LA ENZIMA FOSFATASA ÁCIDA
EN NANOPARTÍCULAS MINERALES DE ORIGEN NATURAL
Roxana López1, Ada López2, Analí Rosas3
Depto. de Producción Agrícola, Universidad de Talca, Casilla 721, Talca, Chile.
Laboratorio de Fisiología Vegetal y Genética, Universidad de Talca, Casilla 721, Talca, Chile.
3
Depto. De suelos y Recursos Naturales, Universidad de Concepción, Casilla 537, Chillán, Chile.
1
Agradecimientos
Proyecto DIUFRO DI08-0045 y Proyecto Apoyo a Profesores Patrocinantes de Alumnos de
Pre y Postgrado UFRO (Ex Convenio de Desempeño II) DI09-2006, ambos financiados por
la Dirección de Investigación de la Universidad de La Frontera. El Sr. Vidal agradece Beca UFRO para obtener grado de Magíster.
2
Resumen
En el suelo existe una fracción de fósforo (P) orgánico potencialmente biodisponible (500
- 2,330 mg kg-1), a través de la actividad fosfatasa ácida. Este proceso de mineralización
natural de P puede ser acelerado por adición de fosfatasa altamente activa.
Actualmente existe un amplio campo de aplicación de las enzimas lo que ha generado nuevos
soportes para preservar su actividad y estabilidad frente a agentes desnaturalizantes. La
inmovilización enzimática en arcillas naturales, orientada principalmente a los filosilicatos,
ha resultado en una reducción de la actividad enzimática y propiedades catalíticas. Sin
embargo, existen otras arcillas no laminares que no han sido evaluadas como potenciales
soportes enzimáticos. El alofán es el constituyente principal de los minerales de arcilla de los
Andisoles. Corresponde a una arcilla silicatada no cristalina que presenta un área superficial
que varía entre 700 a 1100 m2 g-1 y un tamaño aproximado de 35 a 55. La zeolita pertenece
a la familia de los tectosilicatos y son alúminosilicatos cristalinos. La estructura presenta
cavidades y canales de dimensiones moleculares. Este tipo de estructura hace que las
zeolitas presenten una superficie interna de de 500-1000 m2 g-1 en relación a su superficie
externa. El diámetro de poros y el diámetro de cavidades corresponden de 2 a 12 Å y 6-12
Å respectivamente. Considerando estos antecedentes, se realizó un estudio que tiene como
objetivo determinar el efecto de la inmovilización de la enzima fosfatasa ácida sobre zeolita
comprada con su inmovilización alofán.
La enzima fosfatasa ácida se inmovilizó en arcilla zeolita y también en alofán, para lo cual
se formaron complejos entre la enzima y cada una de estas nanopartículas. Inicialmente se
realizaron isotermas de adsorción entre la enzima y cada uno de las arcillas que se utilizarían
como soportes para la inmovilización. Luego se determinó la actividad y parámetros cinéticos
de la fosfatasa y se evaluó la estabilidad térmica de la enzima a 60 ºC y distintos intervalos
de tiempo por un período de tres horas.
Las isotermas de adsorción entre la enzima y cada una de estas nanopartículas, mostraron
que ambos soportes presentaron un nivel de saturación de enzima con niveles inferiores a 5
mg de arcilla y 0.0285 mg de proteína.
En estudios previos nosotros hemos demostrado que la inmovilización de fosfatasa ácida
en alofán genera un incremento de alrededor del 30 %en la actividad y eficiencia catalítica
de esta enzima (1). En este estudio la actividad enzimática se incrementó en más del 100%
debido a la inmovilización en zeolita y en más del 30 % para la inmovilización en alofán en
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