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DIAONÓSTICO DE LAS COLlBACILURIAS. EL VALOR DE LA REACCIÓN DE ORIESS (*) Dr. M. MISERACHS-RIGALT Jefe del Laboratorio del Hospital Municipal de Infecciosos de Barcelona L A lectura del trabajo de ARNOLD publicado en el M.M.W. en 1943 nos llamó la atención y decidimos comprobar el interés que podía tener en la práctica la utilización de la reacción de Griess practicada en la orina para el diagnóstico de las colibacilurias. El hecho de que dicho trabajo haya tenido la fortuna de merecer su reproducción en forma extractada, e incluso in extenso, en numerosas revistas españolas, y la aceptación que ha merecido por parte de algún autor español, ha aumentado nuestro interés en la comprobación de su utilidad práctica. La reacción propuesta por GRIESS para investigar químicamente la presencia de nitritos, consiste en di azotar una amina aromática en medio ácido mediante el ácido nitroso procedente de los nitritos existentes en el .¡:nedio y posteriormente copular esa amina diazotada con otra amina aromática o con un compuesto fenólico formando un compuesto di azoico coloreado. ZIEGLER (M. Kl. 1941) advierte la posibilidad de utilizar esta reacción en técnica bacteriológica para investigar la presencia de nitritos en los cultivos bacterianos como consecuencia de la acción de las bacterias sobre los nitratos transformándoles en nitritos, y ARNOLD (1. c.) aplica el método a la orina y a la bilis para investigar la presencia de colibacilos. La técnica resumida de la reacción consiste en mezclar un volumen de orina con el mismo volumen del Reactivo de Griess (mezcla de sol, ácida de ác. sulfanílico y de sol. ácida de alfanaftilamina). En caso de presencia de nitritos aparece • un color rosado que aumenta de intensidad hasta llegar al color rojo cereza intenso en los casos muy positivos. Como el resultado de la reacción en la orina depende de los nitratos reducidos a nitritos y (según ARNOLD) de la de la de colibacilos, en caso de que la prueba sea negativa es preciso añadir a una muestra de orma unas gotas de solución de NO. Na y tenerla d.os horas en ía estufa a 37° C. a fin de favorecer la acción de las bacterias sobre los nitratos y repetir la prueba después de la incubación. PERMANYER en 1944 (Col. Esp. M. M.) dice que en muchas ocasiones el resultado de la Reacción de Griess orienta un diagnóstico, el cual es comprobado por el examen bacteriológico del sedimento. El mismo autor, en «Síntesis Médica» 1945-46, insiste en la bondad de este método comprobado por él en más de 1.000 ensayos. En realidad dicha pruebd tiene el valor de descubrir en la orina la presencia de nitritos formados por la acción denitrificante de las bacterias. Ciertamente el bacilo Coli reduce los nitratos a nitr;tos y la comprobación de una reacción de Griess positiva en un medio que contenga supuestos colibacilos es un dato que puede ayudarnos para la identificación bacteriana. Pero antes de dar un valor patognómico al resultado de la reacción en la orina, debemos recordar la posible presencia en la misma de otros gérmenes con capacidad reductora sobre los nitratos. BEHGAARD, P. Y ]ANSEN, K. F. (Nordisk Medicin 1943) dicen que la formación de nitritos a partir de los nitratos en la orina, es una indicación de existencia en la misma de bacterias numerosas. Los autOl'es han realizado el estudio de 700 orinas obtenidas por cateterismo y de 1.000 orinas eliminadas espontáneamente. La reacción dió resultados útiles en un 70 por 100 de los casos, y creen que puede ser de valor para el diagnóstico de las infecciones asintomáticas de las vías urinarias. De entre los gérmenes de presencia miís frecuente en la orina cabe citar los (*) Comunicación presentada al 1.er Congreso Hispano - Portugués de Médicos Especialistas de Análisis Clínicos. Madrid 15·18, X. 1947. Enero de 1948 77 ANALES DE MEDICINA Y CIRUCIA siguientes: Escherichia Coli. B. Lactis aerogenes, Neumobacilo, Proteus vulgaris, Shigellia, B. Faecalis Alcaligenes, Salmonellas, Pseudomonas. B. Seudodiftéricos, Estafilococos, Estreptococos piógenos, Estreptococos hemolíticos, Enterococos, Ganococos, etc., y es preciso recordar que además del Escherichia Coli reducen los nitratos a nitritos el B. Lactis aerogenes, el Neumobacilo, el Proteus vulgaris y los Pseudomonas entre los bacilos Gram negativos, además del bacilo Seudodiftérico y de los Estafilococos. He aquí pues cuatro posibles causas de error suponiendo que se haga un control microscópico en preparación teñida por el método de Gram y seis causas de error si la reacción trasciende al médico práctico y sin e.l control microscópico de la flora urinaria se hace sinónima de colibaciluria la aparición de coloración roja al añadir Reactivo de Griess a una orina. Nosotros hemos estudiados 50 muestras de orina obtenidas por cateterismo vesical elegidas al azar y hemos practicado la reacción de Griess a todos ellas, obteniendo los siguientes resultados: Positivos sin adición de Sol. de Nitrato Sódico ... Positivos previa adición dc N0 3 Na e incubación 37° C. 13 26 En total 39 11 Negativos • o sea que el 78 por 100 de las orinas dan resultado positivo puesto que sólo pueden conceptuarse como negativos ciertos los resultados después de asegurar la presencia de nitratos por su adición a la orina y esperar la acción denitrificante de los gérmenes que puedan existir. Nótese la semejanza de la frecuencia global de resultados pos;tivos entre nuestra estadística y la de BECHGAARD y JANSEN. Simultáneamente a la reacción de Griess, he.mos sembrado orina en diversos medios a fin de estudiar la reducción del rojo neutro, la fermentación de la glucosa y de la lactosa, la producción de indol, el enrojecimiento del medio de Endo, la reacción del rojo de metilo y la de Voges Praskauer, el desarrollo en medio de Koscr y la licuación de la gelatina. En los 11 casos en que hemos obtenido reacción de Griess negativa los cultivos de orina han resultado 7 negativos para el bacilo Coli y 4 estériles. En los 39 casos en que la reacción de Griess ha resultado positiva hemos podido identificar 12 veces el bacilo Coli, siete veces puros y cinco veces asociado a otros gérmenes especialmente cocos Gram positivos. En los restantes 27 casos de reacción de Griess positiva no hemos podido aislar ninguna vez Bacilo Coli, pero hemos aislado un Pseudomona piocián'co, un Bacilo Proteus y numerosos Estafilococos. Con estos resultados a la vista creemos poder afirmar que la reacción de Griess : 1. ° Conserva todo su valor para investigar la presencia de nitritos en los medios nitratados y conta.minados por bacterias capaces de reducir los nitratos a nitritos. 2. ° La reacción de Griess no nos ha fallado en ninguna orina contaminada por bacilo Coli, ni aún en los casos en que además coexisten otras bacterias. 3.° La reacción de Griess puede ser util'zada para descartar la existencia de colibaciluria a condición de nitratar la orina y tenerla siempre dos horas en incubación a 37° C. antes de practicar la prueba. 4.° Debe hacerse entender bien cLaro a Los prácticos que la. reacci6n de Criess no puede 'ser utilizada como pl1ueba rutinaria pa,ra La in'1Jestigaci6n dd Baci.o CoU en La orina debido a las numerosas causas de error derivadas de la existencia de otros gérmenes reductores de los nitratos en la or111a, y 5.° El único procedimiento para diagnosticar ciertamente la presencia de Colibacilo es el de la siembra de la orina en medios adecuados, cultivo e identificación bacteriológica subsiguiente de los gérmenes aislados.