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Inhibición de la formación de biopelícula de Escherichia coli 278-1 y Aeromona caviae sch3 por un purificado de Paraoxonasa humana 1 (PONh1) a partir de sangre Mercado Monroy José, Manterola Quezada Oyuki Nallely y Betanzos Cabrera Gabriel* Área Académica de Nutrición, Instituto de Ciencias de la Salud, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, Correspondencia de autor: Abasolo 600, Pachuca de Soto, Hidalgo, México C.P.42000 tel. 771 7172000 ext. 4312, 4316, e-mail: [email protected] Introducción: En la naturaleza las bacterias existen de dos formas: Planctónicas y formadoras de biopelícula, estas últimas tienen la capacidad de desarrollar resistencia a tratamientos del agua, incluso a los efectos de los antibióticos; tales microorganismos mediante el sistema Quorum Sensing (QS), ocupan pequeñas moléculas de acilhomoserina lactonas (AHL) para la comunicación, formación de biopelículas y el factor de la virulencia, por lo que es de interés encontrar métodos o mecanismos para la inhibición de la formación de biopelícula. Por su parte, la Paraoxonasa humana 1 (PONh1), es una enzima que se secreta en hígado con propiedad de esterasa, aunque su función fisiológica está aún por esclarecer. Objetivos: Inhibir la formación de biopelícula en Escherichia coli 278-1 y Aeromona caviae Sch3, por PONh1 purificada. Metodología: La enzima será purificada a partir de suero sanguíneo humano por cromatografía de interacción hidrofóbica empleando un sistema FPLC. Se cultivarán las cepas reconocidas por formar biopelícula con y sin purificado de enzima, la inhibición de la formación de biopelícula se medirá por un método indirecto-espectrofotométrico empleando una tinción con cristal violeta. La disminución de unidades de densidad óptica en cultivos crecidos con enzima comparada con muestras control (bacterias crecidas sin enzima) representará la inhibición de formación de biopelícula. Asimismo, las muestras serán observadas empleando microscopía electrónica de barrido para comprobar la inhibición de biopelícula. Resultados: Cultivos de Aeromona caviae Sch3 y Escherichia coli 278-1 en presencia de purificado de PONh1 inhibieron la formación de biopelícula, 63.5 y 63.9% respectivamente. Discusión: En este trabajo demostramos que la purificación de la enzima a parir de sangre, mantuvo su actividad biológica de lactonasa, al inhibir la formación de biopelícula en bacterias comprobadas formadoras de biopelícula, debido a que moléculas AHL son utilizadas por bacterias Gram (-) en la formación de biopelícula. Palabras clave: Biopelícula, Paraoxonasa humana 1, Escherichia coli 278-1, Aeromona caviae Sch3, Cromatografía de interacción hidrofóbica, lactonasa.
