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Diagnóstico Microbiológico de las Enfermedades Infecciosas ¿Qué debe esperar un clínico del laboratorio de Microbiología? • • • • • • • Información para una decisión clínica Normas de recogida y transporte de muestras Identificación de microorganismos Sensibilidad a los antimicrobianos Control de tratamiento antimicrobiano Procesamiento y respuesta rápida Información actualizada Diagnóstico Microbiológico Fases 1. Recogida de muestras clínicas: 1. 2. Importancia Normas generales 2. Transporte de muestras clínicas: 1. 2. 3. Viales Condiciones de transporte Medios de transporte 3. Diagnóstico: 1. 2. Directo Indirecto IMPORTANCIA A. Muestras directas: El patógeno se localiza en un sitio que debería ser estéril. Ej. Absceso profundo, líquido cefalorraquídeo. Recolección mediante por métodos quirúrgicos o mediante aspiración. B. Muestras indirectas: El patógeno está localizado como en A pero debe pasar por un sitio que contiene flora normal. Ej. Esputo expectorado, orina emitida. C. Muestra de un sitio con flora normal. Ej. Faringe, intestino grueso CONSIDERACIONES GENERALES 1.- Antes de administrar antimicrobianos 2.- Tomar la muestra del sitio más probable. 3.- Estadio de la enfermedad. Elegir el momento en el que mayor número de gérmenes se encuentre probablemente en el lugar de la toma. 4.- Cantidad suficiente 5.- Entrega rápida 6.- Suministrar datos clínicos. Diagnóstico Directo 1. 2. 3. 4. Visualización de microorganismos Cultivo Identificación y antibiograma Detección de componentes estructurales o metabolitos 5. Detección de ácidos nucleicos Diagnóstico Directo 1. Visualización de microorganismos 1. Examen Directo – Examen en fresco – Microscopía de campo oscuro – Microscopía electrónica 2. Tinciones: – – – – Gram Ziehl: micobacterias Fluorescencia: IFD Giemsa: parásitos Microscopía óptica Fresco. Hifas Microscopía Electrónica Herpes simplex Microscopía Electrónica de barrido. Hifas y conidias Tinción de Gram Uretritis gonocócica Streptococcus mitis Tinción de Gram Bacillus anthracis Tinción de Ziehl Nielsen B.A.A.R Inmunofluorescencia Directa Legionella pneumophila Tinción de Giemsa Filarias Diagnóstico Directo 2. Cultivo 1. Medios artificiales Tipos Condiciones de incubación 2. Cultivos celulares: Efecto citopático 3. Huevos embrionados 4. Animales de experimentación Medios de Cultivo Placas de Petri Jarra para bacterias anaerobias Cultivos Celulares Herpes Simplex Diagnóstico Directo 3. Identificación y antibiograma Diagnóstico Directo 4. Detección de componentes o metabolitos CIE, LATEX, CO-AGLUTINACION, ELISA....... Diagnóstico Directo 5. Diagnóstico Molecular Técnica Nº bacterias detectables ELISA 105-107 SONDAS 104-105 PCR, LCR 1-10 Diagnóstico Directo 5. Diagnóstico Molecular Diagnóstico Indirecto Técnicas • • • • • • Precipitación Aglutinación Fijación del complemento Neutralización IFI ELISA.....