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PRÁCTICO N° 6 Control de calidad microbiana de inoculantes, agua y alimentos Objetivos: conocer las técnicas de análisis para el control de calidad de inoculantes, agua y alimentos INOCULANTES: Productos formulados con microorganismos vivos que se aplican a la semilla para mejorar la nutrición de los cultivos Características de los componentes de un inoculante Bacterias: • específicas • seleccionadas para fijar N2 • adaptadas a las condiciones ambientales del lugar • número adecuado (fabricación: 10 x 108 bacterias/ g o ml de inoculante y vencimiento: 10 x 106 bacterias/ g o ml inoculante ). Ley 20466/80 • máxima pureza Soporte: • sólido o líquido • proveer alimento, oxígeno y humedad • evitar la competencia con otros microorganismos • no poseer sustancias tóxicas Recomendaciones al comprar un inoculante • Características del envase (permeable, cámara de aire) • Fecha de vencimiento • No formulado (mezclado) con curasemillas • Condiciones de comercialización (cadena de frío) • Análisis de calidad de la muestra Análisis de control de calidad de inoculantes Control de calidad: Verificar la cantidad de células viables de las bacterias especificas y las contaminantes Rizobios: recuento en placa (medio YEM con rojo congo) Azospirillum: NMP (medio NFB semisólido) Análisis de control de calidad de inoculantes 10 ° 10 ° inoculante sólido (X g + X ml H2O) inoculante líquido 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 9 ml de agua 10 -1 -2 10 -3 10 -4 10 10 -5 1 ml 10 -6 10 1 ml -7 10 -8 1 ml medio YEM incubar calcular Análisis de control de calidad de inoculantes Rizobios: recuento en placa (medio YEM con rojo congo) Recuento: 47 colonias contaminantes + + + + + - - - + 6 6 6 7 7 7 8 8 8 2 1 Azospirillum: NMP (medio NFB semisólido) NMP= 15 número característico: 3 Técnicas de inoculación a campo INOCULAR : contactar la semilla con el inoculante previo a la siembra Método húmedo Preparar la dilución del inoculante Agregar a la semilla Mezclar en inoculadora, hormigonera o tolva inoculante + agua + curasemilla • Semillas grandes (soja): hasta 2,4 l/100 Kg. de semilla • Semillas chicas (alfalfa): hasta 4l/100 Kg. de semilla Recomendaciones para inocular a campo • Inocular a la sombra. • Inocular solo la cantidad para un día de siembra. • Al aplicar el curasemilla respetar el volumen total de agua. • No conservar el inoculante mezclado con el curasemillas mas de un día. • No usar recipientes de combustibles o pesticidas. Análisis de control de calidad de agua y alimentos Verdura fresca (X g en X ml H2O) 10 ° 10 ° 1 ml 1 ml 1 ml 9 ml H2O destilada por tubo 1 ml 1 ml 10 1 ml Recuento bacteriano total -1 -2 10 1 ml Escherichia coli Organismos coliformes INCUBAR LECTURA Muestra de agua Análisis de control de calidad de agua y alimentos Control de calidad: Verificar la cantidad de bacterias viables presentes en el agua y verdura Recuento bacteriano total (RBT) (medio sólido general) Recuento de organismos Coliformes (NMP) (medio liquido Mc Cokey) Presencia de Escherichia coli (medio sólido Levine) Normas de calidad para agua y alimentos Valores límites permitidos / ml o g RBT Coliformes fecales E. coli Agua potable (Dipas) 100 0.01 Ausente Uso agrícola (Hidráulica) ND <10 Ausente Recreacional (Dipas) ND <20 Ausente Agua envasada (Código Alimentario) 500 <0.01 Ausente Efluentes (Dipas) 5000 < 10 Ausente Verdura fresca (Código Alimentario) 10.000 ND Ausente Actividades 1. Control de calidad de inoculante: observar caja de Petri. 2. Inoculación de semillas: inocular con inoculantes sólidos y líquidos. 3. Control de calidad de agua y alimentos: observar tubos y cajas de Petri. 4. Control de calidad microbiana: resolver los problemas. Degradación de residuos orgánicos Objetivo: acelerar los procesos de degradación natural para reducir la masa de residuo y alternativamente producir energía (biogas) y otros compuestos de interés (abonos orgánicos) •Tratamientos aeróbicos de residuos sólidos Compost y vermicompost •Tratamientos anaeróbicos de residuos sólidos Producción de biogas •Tratamientos de efluentes líquidos Convencional Biorremediación Tratamientos aeróbicos de residuos sólidos Compost y vermicompost • Objetivo: – Obtención de MO de calidad – Mejorar la fertilidad: suelo y cultivo – Eliminar el residuo sin producir olor – Eliminar microorganismos patógenos Fase estabilización: termofila Fase de maduración: mesofila Tratamientos anaeróbicos de residuos sólidos Producción de biogas Tratamiento de efluentes líquidos Convencional Cloración (terciario) Tratamiento de efluentes líquidos Biorremediación: uso de la capacidad de organismos vivos para eliminar contaminantes • Métodos utilizados: – Manejo de hábitat: • Mezcla de materiales y aireación para optimizar actividad microbiana • Vegetación para absorción de nutrientes y agua • Aumento de MO del suelo para retención de metales – Manejo de microorganismos: selección e inoculación Ventajas Desventajas Bajo costo operativo Mucho terreno Bajo consumo de energía Tiempo de adaptación Alta flexibilidad de carga Poco caudal de efluente Afectados por el clima Tratamiento de efluentes líquidos Sistema de biorremediación