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Transcript
Instituto Superior de Ciencias Médicas
Villa Clara
“Dr. Serafín Ruiz de Zárate Ruiz”
Unidad de Investigaciones Biomédicas
Determinaciones enzimáticas que se realizan
Superóxido Dismutasa (SOD)
Catalasa (CAT)
Glutation Reducido (GSH)
Fosfolipasa A2 (FLA2)
Determinación de la actividad
enzimática Superóxido Dismutasa
-
Pirogalol
SOD
Inhibe el proceso
O2
Purpurogalina
420 nm
Para evaluar la cantidad de enzima presente en la
muestra se emplea el grado de inhibición
Determinación de la actividad
enzimática Catalasa
H2O2
CAT
O2 +
H2O
c(H2O2)descompuesto~ c(CAT)
Las mediciones se realizan a 240 nm, siguiéndose la variación en
la densidad óptica que tiene lugar durante la descomposición del
sustrato por la enzima.
Determinación de la concentración de
Glutation reducido
GSH
+
Muestra
desproteinizada
ELIMAN
ácido 5-tio-2-nitrobenzoico
412 nm
La concentración de GSH se cuantifica
utilizando una curva patrón de GSH.
Determinación de la actividad
enzimática Fosfolipasa A2
Muestra
Ácidos grasos
Lisofosfolípidos
El ensayo es realizado mediante el empleo
de una curva patrón de HCl 0,1N midiendo
los cambios producidos en la absorbancia
de la solución sustrato (578 nm)
Muestra
La muestra fue obtenida por medio de un pesquisaje a
población adulta normal de la provincia de Villa Clara
Fue empleada la técnica de punción venosa
extrayendo en cada caso 10 cc de sangre, llevando a
cabo las determinaciones en suero
En todos los casos fue seguida una secuencia lógica
para las determinaciones, SOD, CAT, GSH, FLA2
teniendo en cuenta su estabilidad en la muestra
Resultados
n
SOD
CAT
normotensos
127
2.75227± 0.83128
4.05E-2 ± 3.80E-2
hipertensos
42
3.24383 ± 0.19497
6.42E-2 ± 0.10E-2
n
GSH (μM)
FLA2 (U/ml)
normotensos
127
26.6667 ± 2.5482
4,4776
hipertensos
42
14.3422 ± 1.0496
6,8715
(U/ml)
Teniendo en cuenta que:
 Los radicales libres circulan por el organismo
humano teniendo acceso a todos los órganos y
tejidos.
 Las reservas antioxidantes del organismo
contribuyen a mantener este equilibrio.
 Los antioxidantes exógenos actúan como
moléculas suicidas oxidándose al neutralizar los
radicales libres.
Recomendamos:
 La ingestión de frutas y vegetales
frescos en la dieta diaria como
una de las mejores formas de
prevenir la aparición de radicales
libres
 La dieta balanceada puede
cambiar nuestro destino y
prolongar la vida:
EL FAMOSO ELIXIR DE LA
INMORTALIDAD