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“Los mejores hombres
son producto
de sus propios
Laboratorio # 3
Bacteriología
Objetivos del laboratorio



Entender la clasificación de las bacterias de
acuerdo a sus características
Describir las estructuras y morfología de las
bacterias
Prácticar técnicas de cultivos de bacterias
LA CÉLULA

Unidad básica de los organismos
Unicelular
Características de los seres vivos:
•Movimiento
•Respiración
•Metabolismo
•Reproducción
•Responden a estímulos
Pluricelular
LA CÉLULA
Dos tipos de células:
Eucariótica
Procariótica
CÉLULA EUCARIÓTICA



Eu = verdadero
Karios = núcleo
Organelos
definidos
Grande y
compleja
CÉLULA PROCARIÓTICA


Pro = Antes
Karios = núcleo
Pequeña y simple
Clasificación

Reinos


Categoría
taxonómica formada
por fila o divisiones
relacionados
Considerada la
categoría más alta
hasta finales del
s. XX
Clasificación

Se reconocen cinco reinos en la actualidad
Prokaryotae: organismos unicelulares, bacterias
y algas llamadas cianobacterias. Célula
procariótica
 Protista: organismos que solo tienen una célula
eucariótica
 Fungi: (hongos) descomponedores, parásitos
(patógenos)
 Plantae: organismos que usan clorofila para
captar la energía lumínica y convertirla en
alimento (fotosíntesis). Son autótrofos
 Animalia: organismos heterótrofos

Dominio

Nivel taxonómico más alto
Dominio Archaea
Arqueas:
•Halogeometricum
borinquensis
•Haloterrigena
thermotolerans
Dominio Bacteria
•Células procariotas (estructura simple)
•Carecen de núcleo u organelos
limitados por una membrana
•Tienen importancia positiva y negativa
Cianobacterias
•Eran conocidas como algas azulverdosas
•Organismos fijadores de nitrógeno
•Abundantes en charcas y lagos
Dominio Eukarya
•Se encuentran
los diferentes
reinos
•Organismos
con núcleo
verdadero
Bacterias
Bacterias
•Descubiertas por Anton Van Leeuwenhoek (1674)
•Células microscópicas que se miden en micras (u)
•Mayoría presentan pared celular compuesta de
peptidoglucano (polimero de proteínas y
carbohidratos)
•Reproducción por fisión binaria (asexual)
•Material genético encontrado en plásmidos
•Algunas poseen cápsula
•Pueden formar colonias
Bacterias
•Crecimiento de
las colonias
•Su morfología
y tamaño se
utilizan para
identificar las
especies de
bacterias
Formas comunes
Márgenes comunes
Características de la superficie
Tinción Bacteriana
•Utilización de tintes para identificar
bacterias
•Tinción Gram
•Células responden al tinte de acuerdo a
la complejidad y composición de su pared
celular (pared delgada o gruesa)
•Bacterias Gram +
•Gram –
•Gram variable (menos común)
Tinción Gram
Bacteria Gram +
Pared celular simple
Bacteria Gram Pared celular compleja
Capa de peptidoglucano gruesa Capa de peptidoglucano fina
No capa externa de
lipopolisacáridos
Capa externa de
lipopolisacáridos
Retienen cristal violeta/iodocolor azul/violeta
Retienen safranina-color
rojo/rosado
Parte experimental
Técnicas de asepsia







Contaminación de cultivos
Trabajamos con posibles patógenos
Limpiar mesas con Lysol
Lavarse las manos
Utilizar zafacón
Utilizar guantes
Utilizar bata
Ejercicio # 1: Preparación de laminilla

Preparar laminilla con muestra de sarro

Procedimiento:
Gota de agua en laminilla
 Raspar sarro con palillo
 Pasar palillo en gota de agua
 Secar la laminilla utilizando lámpara de alcohol
 Derramar cristal violeta a la laminilla (2-3 gotas)
 Lavar exceso de tinte
 Secar con papel especial
 Observar preparación a través del microscopio
 Dibujar lo observado.

Ejercicio # 2: Observación de laminillas

Observar laminillas





Bacterias - tinción gram
Bacilos
Cocos
Otras morfologías
Dibujar lo observado
Ejercicio # 3: Morfología bacteriana

Observar bajo
estereoscopio las
placas Petri para
identificar la
morfología de
las colonias
Ejercicio # 4: Exposición de platos





Tomar muestra de aire, agua, suelo, entre otros,
utilizando la técnica a explicarse en el laboratorio
Colocarla en las placas Petri conteniendo un
medio de cultivo (TSA) utilizando las técnicas
asépticas correspondientes
Cerrar con parafina y rotular las placas: nombre,
sección, clave, instructor.
Incubar a 25°C por 48 hrs
Anotar y dibujar los resultados

Tomar en consideración a las bacterias, no a los
hongos
Ejercicio # 5: Control de crecimiento
Bacteriano

Utilizar antibióticos, desinfectantes y/o
antisépticos para determinar su eficacia inhibiendo
el crecimiento de bacterias




Inocular de forma estriada la muestra de bacterias en el
medio de cultivo
Colocar 3 discos, impregnados con 3 diferentes
sustancias químicas, sobre el agar y un disco con agua
(control)
Rotular las placas
Incubar a 37°C, observar en 24 hrs y anotar/dibujar los
resultados (medir la zona de inhibición-cm)
Informe Escrito (40 pts)

Será solo del ejercicio de control de
crecimiento bacteriano






Página presentación
Introducción (incluir objetivos)
Materiales y métodos
Análisis de resultados (incluir gráficas, dibujos y/o
tablas)
Conclusión
Bibliografía (mínimo cinco)