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Dos tipos de reacciones de sellado de muescas de DNA. Se representan dos formas de sellado de muesca; estos procesos proceden en cuatro pasos (i) → (iv). Las enzimas involucradas se denotan por E (arriba, abajo), mientras que los reactivos y productos de molécula pequeña se indican como fosfato (P); pirofosfato (PP), fosfato inorgánico (Pi; generado a partir de PP por la acción de pirofosfatasas omnipresentes), ribosa (R) y adenina (A). La reacción de sellado de muesca en la parte superior es catalizada por DNA a topoisomerasa I, y es independiente de energía de ATP porque la energía para la reformación de enlaces fosfodiéster de DNA es almacenada dentro de la unión covalente de topoisomerasa a DNA (-P-E; arriba) como se muestra por el ataque nucleofílico del grupo OH 3′ (flecha verde, paso iii) al fosfato del complejo P-E. La reacción de sellado de muesca catalizada por DNA ligasa De: Organización, replicación y reparación del DNA, Harper. Bioquímica ilustrada, 30e (abajo) repara roturas en el esqueleto fosfodiéster de DNA que se producen por replicación del DNA y/o reparación del DNA. La reacción de DNA ligasa Citación: Rodwell DA, Botham KM, Kennelly Weil P. Bioquímica ilustrada, 30e; En: http://mhmedical.com/ completa requiere hidrólisis deVW, dos Bender de los enlaces fosfodiéster de altaPJ, energía delHarper. ATP. Se describe el esquema de 2016 la reacción general de la DNA ligasa Recuperado: June 06, 2017 desde enzima libre, pasando por activación de enzima que libera pirofosfato (PP), hasta la liberación de enzima libre y liberación de AMP (abajo; como se © 2017 McGraw-Hill mencionó, elCopyright PP es convertido con rapidez Education. en 2 molesAll derights Pi porreserved la acción de pirofosfatasas omnipresentes). La ligasa activada (E-P-R-A) reacciona con el P 5′ en el sitio de la muesca para formar un complejo de DNA-P-P-R-A(P-R-A=AMP) transitorio que libera la enzima, E. El ataque nucleofílico del grupo