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TRADUCCIÓN - ARN de transferencia - Aminoacil tRNA sintetasa elementos necesarios - Ribosomas -El proceso de traducción en eucariotas en procariotas tRNA aa tRNA sintetasa tRNA cargado mRN ribosoma A tRNAs Adaptan física e informacionalmente al mRNA con la proteína codificada Prokaryoti c tRNA genes Eukaryotic tRNA genes 7 pb 5 pb 3-4 pb 5 pb Elementos de identidad en los tRNA Estructura terciaria de un tRNA AA + ATP + AARS AARS AA-AMP + PPi AARS AA-AMP + tRNA + AMP AARS+AA-tRNA enlace covalente del aminoácido al extremo 3´CCA del tRNA Activación y anclaje covalente del aminoácido al tRNA E. coli GlnRS·tRNAgln · ATP Complejo del tipo I Yeast AspRS·tRNAasp·ATP Complejo del tipo II Estructura y función del ribosoma Eucariótico Valor S 40S Masa molecular 1,400 kDa rRNAs 18S, 1900 nts Proteínas > 33 Procariótico 30S 900 kDa 16S, 1540 nts 21 Valor S 60S Masa molecular 2,800 kDa rRNAs 28S, 4700 nts 5.8S, 160 nts 5S, 120 nts Proteínas > 49 50S 1,600 kDa 23S, 2900 nts 5S, 120 nts 34 sitios funcionales en el ribosoma 5’ 3’ Estructura de la subunidad grande 1. rRNA 16S 2. rRNA 5S 3. proteínas (LSU) 4. centro peptidil-transferasa y mecanismo catalítico rRNAs 23S y 5S en la estructura terciaria del ribosoma estructura terciaria del rRNA 5s Bases conservadas en la estructura terciaria de la subunidad grande bases muy conservadas (rojo) -ligado de substrato y factores -actvidad catalítica -estabilización de estructura tridimensional (gran número de adeninas) extensiones variables (verde) Estructura de proteínas ribosomales 13/30 proteínas presentan extensiones largas: -estabilizan el plegamiento terciario - rellenan los huecos - funcionan como un pegamento molecular -23/29 interaccionan con más de un dominio rRNA 23s - 1157/2923 nucleótidos hacen contactos de van der Waals con proteínas Localización de proteínas en la subunidad grande del ribosoma Estructura cristalográfica del ribosoma de Haloarcula marismortui a 2.4Å Túnel de salida de la proteína y extensiones cercanas de proteínas ribosomales Túnel de salida de la proteína en la subunidad grande del ribosoma Comparación de las estructuras secundarias predichas para los rRNAs 16S de (a) Halobacterium volcanii, (b) levadura y (c) mitocondria bovina Traducción Fibroína 0.1 mm Resumen del tema de la traducción Bioquímica de la traducción 1. Activación del aminoácido (ATP, aminoacil-tRNA sintetasa) 2. Pegado covalente del AA al 3´OH del CCA terminal del tRNA 3. Unión del tRNA al mRNA por apareaminento codónanticodón 4. Formación del enlace peptídico en el ribosoma 5. Terminación del polipéptido Procariotes: 20aa/s = 20s por 400 AA/proteína Eucariotes: 2 aa/s INICIO DE LA TRADUCCIÓN INICIO DE LA TRADUCCIÓN CAP DEPENDIENTE ELONGACIÓN DE LA TRADUCCIÓN Mecanismo de formación del enlace peptídico Formación del enlace peptídico TERMINACIÓN DE LA TRADUCCIÓN Mecanismo de terminación del polipéptido Mecanismo de inicio de la traducción en E. coli Estructura del factor de iniciación de la traducción EF-Tu unido a GDP y a GDPNP Orientación de las moléculas de tRNA unidas a los sitios E-, A- y P- anticodones Algunos antibióticos que funcionan como inhibidores de la traducción en bacterias Rescate de ribosomas bacterianos por tmRNAs Modificación de los rRNA y funcionalidad del ribosoma