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QUIMICA BIOLOGICA Ing. en Alim. y Lic. en CyT de los Alim. Bolilla 11: Biosíntesis de Proteínas. Traducción de la información genética. Universalidad del código genético. Activación de los aminoácidos, fidelidad de la síntesis proteica. Etapas de iniciación, formación del enlace peptídico, elongación y terminación de la síntesis, factores que intervienen, consumo energético y regulación. Inhibidores de la síntesis. Nociones sobre alimentos transgénicos. Replicación ADN DOGMA CENTRAL DE LA GENETICA Transcripción ARN Traducción Péptido o proteína Transcripción de un gen eucariota, maduración del ARNm y traducción Transcripción 5'UTR preARN o Transcripto primario 3'UTR Exon 1 Intron 1 Exon 2 Exon 3 Intron 2 AUG UAA 5‘CAP / Polyadenylation/Splicing polyA ARNm maduro: AUG UAA AAAAAAAAA 5’metGGAUG…….CAGUGGAAA……..CUAGUCGCC……..UAAAAAA…AAA-3’ Traducción Proteína MCPLTW..... ..............GFL Código genético -Universal: es idéntico para todas las especies anim. y veget. -Degenerado: más de un codón codifican para el mismo aa. codón ARNt(s) ARNm AUGCAGUGGAAACUAGUCGCCUAA anticodón UACGUCACCUUUGAUCAGCGG stop Met Gln Trp Lys Leu Val Ala Péptido Tipos de ARN: ribosomal, transferencial y mensajero Activación de aminoácidos en procariotas (síntesis de los AA-ARNt) R Aminoacil-ARNt sintetasa +NH -C-COO3 + ATP R Enz-+NH2-C-COO-AMP + PPi Complejo Aminoaciladenilato-Enzima R Aminoacil-ARNt sintetasa Enz-+NH2-C-COO-AMP + ARNt Enz- fMet R +NH -C-COO-ARNt 3 fMet -AMP UAC UAC Anticodón + AMP + Enz IF-3 Subunidad 30S Traducción de Proteínas en procariotas. Iniciación. IF-1 P A NH2- fMet mARN UAC Codón de inicio 5’ 3’ mARN IF-3 NH2- AUG P 5’ IF-1 A 3’ IF-3 AUG P IF-2 GDP + Pi GTP UAC IF-1 A Subunidad 50S fMet tARN IF-2 GTP NH2- IF-1 IF-2 IF-3 fMet Anticodón NH2- fMet UAC UAC AUG P 3’ IF-3 AUG P IF: factor de iniciación IF-1 A 3’ 5’ IF-2 GTP 5’ Complejo de Iniciación 30 S A Complejo de Iniciación 70 S NH2Complejo de inicio 70S Traducción de Proteínas. Alargamiento de la cadena peptídica fMet AA2 UAC 3’ 5’ Codón de inicio AminoaciltARN entrante AUG P Codón siguiente A NH2AA2 EF EF- fMet AA2 GTP GTP Unión del Aminoacil-tARN entrante 3’ 5’ AUG Pi NH2- EF fMet GDP NH2- fMet AA2 AA2 Peptidil transferasa UAC 3’ 5’ AUG P A A P Translocasa UAC GTP 3’ 5’ AUG P A GDP + Pi Traducción de Proteínas. Alargamiento de la cadena peptídica Aminoácidos libres Cadena polipeptídica en formación NH2-fMet tARN transportando un Aminoácido Gli 1 Leu tARN Fen Val Val Ala Anticodón tARN 2 3’ A P Dirección de lectura del mARN Codón de terminación Gli 5’ Ala mARN Ribosoma 1 Codón Val Codones para los correspondientes aminoácidos Enzima Peptidililtransferasa 2 Translocasa Transcripción de un gen eucariota, maduración del ARNm y traducción 5'UTR 3'UTR Exon 1 preARN: Intron 1 Exon 2 Exon 3 Intron 2 AUG UAA 5‘CAP / Polyadenylation/Splicing polyA ARNm maduro: AUG UAA AAAAAAAAA 5’metGGAUG…….CAGUGGAAA……..CUAGUCGCC……..UAAAAAA…AAA-3’ Traducción Proteína MCPLTW..... ..............GFL Modificaciones postransduccionales MCPLTW..... ..............GFL Modificaciones postraduccionales de las proteínas • Desformilación (eliminación de grupo formilo de la fMET inicial por deformilasas en procariotas). • Glicosidación (adición de cadenas de oliosacáridos a las proteínas por acción de las glucosil transferasas). • Formación de puentes disulfuros -S-S- (entre grupos –SH de cisteínas dentro de la misma cadena o de cadenas diferentes por acción de proteín-disulfuro isomerasa). • Fosforilación. • Acetilación. • Metilación. Modificaciones postraduccionales Fosforilación-Defosforilación Carboxilación Acetilación Metilación R E G U L A C I O N Regulación transcripcional en eucariotas Promotor GC CAAT TATA atg Inr Exon 1 Exon 2 5’ Exon 3 3’ Sitios reguladores Región +1 iniciadora Intrones Regulación transcripcional en procariotas. Operón Lac El operón lac es una unidad de transcripción que codifica proteínas (enzimas) requeridas para el transporte y metabolismo de la lactosa en la bacteria Escherichia coli, así como en algunas otras bacterias entéricas. Regulación del operón lac En ausencia de Lactosa En presencia de Lactosa