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 Al ser las células muy pequeñas y notablemente complejas, su estudio siempre
depende de una serie de herramientas que se han desarrollado en tiempos
relativamente recientes:
1 mm (milímetro) = milésima parte de un metro.
1 µm (micrómetro ó micra) = milésima parte de un milímetro.
10-3 mm
1 nm (nanómetro) = milésima parte de un micrómetro.
10-6 mm
1 Å (Angstrom) = 0.1 nm
10-7 mm
Técnica empleada para producir imágenes visibles de estructuras o detalles demasiado
pequeños para ser percibidos a simple vista.
La microscopía generalmente implica la difracción, reflexión o refracción de radiación
incidente en el sujeto de estudio. En la microscopía de luz clásica, esto implica el paso de
luz transmitida a través o reflejada desde el sujeto mediante una serie de lentes, para
poder ser detectada directamente por el ojo o impresa en una placa fotográfica.
Microscopio de luz transmitida (la luz atraviesa la muestra).
Permite ver objetos tan pequeños como 0.5 µm (bacterias y mitocondrias).
Los estereoscopios permiten hacer estudios de objetos y especímenes demasiado pequeños
para ser estudiados a simple vista, pero demasiado grandes para ser estudiados bajo el
microscopio compuesto. Su magnificación va desde cerca de 5x hasta más de 60x. Los
estereoscopios también son conocidos como microscopios de disección, pues en muchas
ocasiones son usados para disecar los especímenes o muestras, separando de ellos aquellas
partes que serán examinadas mediante otros tipos de microscopía.
Aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una
célula y en distintas partes de una muestra de tejido. Las partes oscuras de la imagen
corresponden a las porciones densas del espécimen; las partes claras de la imagen corresponden
a porciones menos densas. Estos microscopios se utilizan para observar células vivas, tejidos
vivos y cortes semifinos no coloreados.
Bacillus thuringensis
Uronemas (protozoarios )
El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espécimen. Es útil para
observar autorradiografías, cristales en la orina y para detectar espiroquetas, en particular el
Treponema pallidum microorganismo causante de la sífilis.
Algas
Flor de Haya
Una molécula que fluoresce emite luz de longitud de onda que se encuentra dentro del
espectro visible, cuando es expuesta a una fuente de luz ultravioleta. Se usa para revelar
moléculas fluorescentes naturales, como la vitamina A y algunos neurotransmisores.
Corte del cerebelo de un ratón
Astrocito
Se usa para estudiar la estructura de los materiales biológicos. Emplea un sistema de
iluminación con rayo láser. Tiene la ventaja de que se pueden tomar imágenes de la muestra
en cortes muy finos. Las regiones fuera de foco se restan de la imagen mediante un programa
para dar una definición máxima a la imagen.
Retina de mono
Un microscopio electrónico es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para
formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar una
capacidad de aumento muy superior a los microscopios convencionales.
Los hay de dos tipos: de transmisión y de barrido.
El microscopio electrónico de transmisión emite un haz de electrones dirigido hacia el objeto
cuya imagen se desea aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos por el
objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada de la muestra. Para utilizar un
microscopio electrónico de transmisión debe cortarse la muestra en capas finas, no mayores de
un par de miles de ángstroms. Los microscopios electrónicos de transmisión pueden aumentar la
imagen de un objeto hasta un millón de veces.
Se utiliza en microbiología, para observar la estructura de los virus. También es usado para
observar a detalle la ultraestructura celular.
Virus Hanta
Mitocondrias de células de mamífero.
Punta de hifa de Aspergillus nidulans
En el microscopio electrónico de barrido la muestra es recubierta con una capa de metal
delgado, y es barrida con electrones enviados desde un cañón. Un detector mide la cantidad de
electrones enviados que arroja la intensidad de la zona de muestra, siendo capaz de mostrar
figuras en tres dimensiones, proyectados en una imagen de TV.
Permite obtener imágenes de gran resolución en materiales pétreos, metálicos y orgánicos. Su
resolución está entre 3 y 20 nm, dependiendo del microscopio.
La luz se sustituye por un haz de electrones, las lentes por electroimanes y las muestras se hacen
conductoras metalizando su superficie.
Zancudo
Mosca
Sangre humana
El fraccionamiento subcelular es un conjunto de métodos y técnicas que tienen como
objetivo obtener fracciones puras o enriquecidas en un determinado componente celular,
ya sea éste un organelo, una fracción de membrana, complejos multiproteicos, etc...
Todo proceso de fraccionamiento subcelular tiene dos etapas :
• Rotura de las células o tejidos.
• Separación de la fracción.
Rama de la biología celular enfocada en el estudio de la composición química de las células y sus
procesos biológicos moleculares mediante análisis químicos y quimicofísicos que permitan su
observación. Se considera como un nexo de unión entre la morfología y la bioquímica. Permite
detectar la localización topográfica de algunos principios inmediatos, enzimas, metales pesados y
otras sustancias.
La citoquímica se dedica a la identificación y localización de los compuestos químicos y
macromoleculas dentro de las células, basándose en métodos de reacciones colorimétricas, como
la Reacción de Feulgen, verde janus B, rojo oleoso, Sudán rojo, Técnica de Schiff, entre otros.
Isótopo radiactivo de un elemento. Los más usados en biología celular son
24Na.
32P, 14C, 2H, 3H, 35S, 131I
y
Consiste, básicamente, en marcar la molécula cuyo destino nos interesa seguir uniéndole un isótopo
radiactivo, cultivar las células con la molécula marcada y detectar la radiación a intervalos regulares
de tiempo.
El uso de radioisótopos ha encontrado un terreno particularmente propicio en los campos del
metabolismo, biodistribución de drogas farmacéuticas, farmacodinámica, etc. Los radioisótopos y
las radiaciones también son frecuentemente utilizados en medicina tanto para el diagnóstico como
para la terapia de enfermedades malignas y no malignas.