Download Presentación de PowerPoint

CARBOXIPEPTIDASA
P.M.; 34,300; 1 Zn++.
Esta enzima está localizada en el páncreas de los
mamíferos, cataliza la
hidrólisis del péptido
unido al final carboxílico
de la cadena peptídica.
La enzima tiene una preferencia particular por
aquellos sustratos en los que la cadena lateral R
es aromática, es decir -CH2 (C6 H5) , o bien, -CH2
(C6 H4) OH.
Su estructura y mecanismo de acción se han
dilucidado parcialmente. El ion zinc está
enlazado,
en
distorsionado,
un
con
entorno
dos
tetraédrico
átomos
de
nitrógeno-histidina, un átomo de oxígeno
carboxílico glutamato y una molécula de agua
como ligandos.
Por mecanismo de sitio activo
Las Carboxipeptidasas generalmente se
clasifican en una de varias familias en función
de su mecanismo de centro activo.
• Las enzimas que utilizan un metal en el sitio
activo se llaman "metalo-carboxipeptidasas".
• Otros carboxipeptidasas que usan sitio activo
serina se llaman "serina carboxipeptidasas".
• Los que utilizan una cisteína del sitio activo
son llamados "carboxipeptidasa cisteína".
Otro sistema de clasificación para las
carboxipeptidasas se refiere a su preferencia de
sustrato.
Las carboxipeptidasas que tienen una mayor
preferencia por los aminoácidos que contienen
cadenas de hidrocarburos aromáticos o
ramificada que se llaman carboxipeptidasa A.
Las carboxipeptidasas que escinden
aminoácidos cargados positivamente se llaman
carboxipeptidasa B.
• Un metalo-carboxipeptidasa que escinde un
glutamato C-terminal del péptido se llama
"glutamato carboxipeptidasa".
• Una serina carboxipeptidasa que escinde el
residuo C-terminal de péptidos que
contienen la secuencia-Pro-Xaa se llama
"carboxipeptidasa prolil".
Enzima proteolítico que contiene Zn++
La hidrólisis se produce más
rápidamente con la aparición de cadena
lateral aromática o voluminosa del lado
carboxilo terminal
1 sola cadena de 307 aa
Forma compacta 50x42x38 A°
Regiones de hélice α (38%)
Regiones de hoja plegada β (17%)
Existe un ión Zn++ perfectamente unido,
esencial para la actividad enzimática
El átomo de Zn++ ubicado en un surco máximo
en la sup de la molécula, coordinado con 3 aa y
1H2O
Un gran bolsillo lateral
ADAPTACIÓN INDUCIDA (el S desplaza al agua)
TENSIÓN ELECTRÓNICA
una mutación de la
Tyr248 no inactiva pero
aumenta el KM
La unión del S induce
grandes cambios en el
centro activo de la E.
Tyr 248 interacciona con el carboxilato terminal
(pte H)
Arg 145 interacciona electrostáticamente con
el carboxilato
La cadena lateral de tirosina del sustrato se
une al bolsillo apolar del enzima. Interacción
hidrofóbica.
La CARBOXIPEPTIDASA B Contiene en este
bolsillo un residuo de aspartato, y es específico
para residuos de lisina y arginina.
El O2 carbonílico del enlace que será roto se
coordina con el Zn++
La unión del S provoca grandes cambios, cierra
la cavidad y desplaza el agua.
El entorno apolar del Zn++ aumenta su carga
efectiva.
La carboxipeptidasa A induce tensión
electrónica
Es una E flexible tiene mayor repertorio de
conformaciones catalíticamente activas.
• FIN