Download Temario - genoma . unsam . edu . ar

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOTECNOLOGICAS
UNIVERSIDAD NACIONAL DE GRAL SAN MARTIN
TECNICAS DE CULTIVO CELULAR
CURSO TEÓRICO PRÁCTICO
17 de noviembre al 14 de diciembre de 2012
9-13 hs
Coordinadores:
Dra. Marcela Brocco
Dr. Juan Mucci
Curso con evaluación final destinado a graduados o estudiantes del último año
de carreras afines a Biología.
Temario:
Día 1
- La célula en cultivo: características y requerimientos.
- El laboratorio de cultivos celulares: equipos y cuidados. Incubadoras. Flujos
laminares. Microscopios. Material descartable.
- Bioseguridad. Tipos de flujos laminares. Funcionamiento.
- Contaminaciones. Formas de control, identificación y eliminación.
Día 2
- Líneas celulares: mantenimiento y preservación.
- Sistemas de cultivo de células a gran escala.
- Aspectos prácticos: recuento celular (cámara de Neubauer), colorantes vitales
(Trypan blue)
- Células del sistema inmune: cultivo y producción de anticuerpos
monoclonales.
Día 3
- Cultivos primarios. Obtención de células de distintos tejidos: neuronas,
linfocitos, miocardiocitos, fibroblastos, etc.
- Cultivos primarios de células de tejido nervioso. Neuronas, glía. Tejidos
usados para obtener células. Explantos, cultivos organotípicos. Medios
condicionados.
- Cultivos de tejidos primarios: Aplicaciones Biotecnológicas.
Día 4
- Células madre.
- Cultivo de gametas con fines reproductivos.
Día 5
- Expresión de genes heterólogos. Métodos de transfección: electroporación,
reactivos lipofílicos, fosfato de calcio. Interferencia de RNA
- Cultivos de retina entera y aplicaciones.
Clases Prácticas
Lunes
TP1a: Cultivo primario de neuronas de hipocampo.
Martes
TP2: Aislamiento de linfocitos. Ensayos de proliferación celular.
TP1b: Transfección con liposomas.
Miércoles
TP3: Maduración oocitaria.
Continuación de TP2: Marcación con timidina.
Jueves
TP4: Manejo de la línea celular COS-7. Pasajes. Descongelación y congelación.
Electroporación. Recuento con Trypan Blue.
Continuación de TP2: Cosechar linfocitos y cuantificación.
Observación microscópica.
Viernes
Observación y evaluación de los cultivos