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La detección de ISAV-HPRO en Salmón del Atlántico (Salmo salar) cultivado en las Islas Faroes es asociada a una
infección subclínica, transitoria y altamente prevalente (Christiansen et al., 2011).
I.- Introducción
A.
Hemaglutinina (HE)
El Virus de la Anemia Infecciosa del salmón (ISAV) ha sido
clasificado en la familia de los Orthomyxovirus (Krossoy
et al., 1999), género Isavirus. En la envoltura lipídica se
insertan las dos glicoproteínas características que son la
hemaglutinina (HE) y proteína de fusión (F), las cuales se
proyectas como espigas sobre la superficie viral.
La vacunación contra ISAV en Islas Faroes se inicio en abril
del año 2005. Para monitorear la reemergencia del ISAV
se estableció un programa de vigilancia, en 4 a 6 jaulas
en todos los centros de cultivo con Salmón del Atlántico
(Salmo salar). Este estudio resume los resultados
obtenidos en muestreos realizados entre agosto del 2005
y diciembre de 2009 (Christiansen et al., 2011).
Figura 1: a) Estructura del Virus de la Anemia Infecciosa
del Salmón. b) Gen de la Hemaglutinina del Virus
de la Anemia Infecciosa del Salmón. Se destaca la
región altamente polimórfica (HPR). c) Características
principales delos grupos HRP0 y HPR vilulentos.
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B.
Hemaglutinina - Esterasa (HE)
Cola Citoplasmatica
NH2 -
- COOH
{
La hemaglutinina posee una región altamente polimórfica
(HPR), limitada a 35 aminoácidos, pudiendo de esta
forma clasificar a los ISAV en dos grupos ISAV-HPR0 y ISAVHPR virulentos. Los primeros no se asocian enfermedad
clínica, mortalidad y hasta ahora no ha sido posible su
aislamiento en cultivo celular. Por otro lado, el grupo
ISAV-HPR virulento presenta todas las características
mencionadas de forma opuesta.
Proteina de Fusión (F)
HPR
(Highty Polymorphic
Region)
Región N-terminal
C.
Dominio Transmembrana
Grupos HPR
HPR Virulento
HPR0
Mortalidad
Sin Mortalidad
Signos Clínicos
No presentes
Signos Clínicos
Crece en Cultivo
celular
No Crece en Cultivo
celular
Año 01/ Abr. de 2011 - Nº 01
Situación de ISAVHPR0 en Islas Faroe
Situación de ISAVHPR0 en Islas Faroe
II.- Resultados
2.1.- ISAV-HPR0 es prevalente en el cultivo
de Salmón del Atlántico (Salmo salar) en Islas
Faroes
Durante el periodo de estudio de 53 meses (Agosto del
2005 a Diciembre del 2009), se detectaron 2.787 (8.1 %)
muestras positivas a ISAV-HPR0, de un total de 34.573
muestras analizadas. La prevalencia anual de ISAV-HPR0
fluctuó entre un 0% el año 2005 y un 15.1 % en el año
2007. La frecuencia de positivos se incremento con
cambio de metodología de análisis (RT-PCR convencional
a real time RT-PCR) y metodología de muestreo, uso de
branquias (tabla 1).
2.2.- ISAV-HPRO muestra una tendencia
diferente de tropismo tisular que ISAV
virulento
La detección en paralelo de ISAV-HPR0 en branquias y
riñón muestras diferencias significativas en los resultados,
observándose un porcentaje significativamente superior
en branquias respecto de riñón. Solo 14 peces de un total
de 1.095 fueron positivos en el riñón y no en branquias
(tabla 2).
La media del valor de Ct en branquias 28.1 con un rango
entre 19.0 to 36.7, mientras que en riñón la media del
valor de Ct en riñón fue de 35.9 con un rango de 31.4 a
36.5.
Considerando ciclos de producción cerrados en la
vigilancia un total de 27 de 31 (87 %), fueron positivos
a ISAV.
Riñón
Año
2005
2006
2007
2008
2009
Total
Total
N
Riñón
Branquias
ISAV +ve
N
%
Total
N
ISAV +ve
N
%
2998
0
7157
10
6505* 142
-
0
0.1
2.2
-
5387* 811 15.1
9066 1100 12.1
8847 8847 9.6
16660 152
0.9
23300 2763 11.9
Christiansen et al., 2011
Tabla 1: Resultados de programa de Vigilancia, centros de
cultivo Salmón del Atlántico (Salmo salar), Islas Faroe.
La tabla muestra el número de peces (N) muestreados
por año, positivos en número y porcentaje (N, ISAV +ve),
testeados por RT-PCR (Agosto 2005 a Marzo 2007) y realtime RT-PCR (Abril 2007 a Diciembre 2009).
* En Enero y Febrero del 2007 se muestreo solo riñón de
1118 peces.
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Negativo
Positivo
Total
Negativo
480
(43,83%)
14
(1,27%)
494
Positivo
474
(43,28%)
127
(11,59%)
601
954
141
Branquias
Total
1095
Christiansen et al., 2011
Tabla 2: Frecuencia de detección de ISAV-HPR0 de 16
poblaciones de muestreo en las cuales al menos una
branquia o riñón fueron positivas. El muestreo incluye
1.095 peces de los cuales fue analizado en paralelo
branquias y riñón mediante real time RT-PCR.
2.3.- ISAV-HPR0 no se asocia con signos
clínicos o enfermedad
A pesar de la alta prevalencia de ISAV-HPR0 en Salmón del
Atlántico (S. salar), no se detectó la presencia de signos
clínicos o cambios patológicos consistentes con Anemia
Infecciosa del Salmón (cuadros clínicos).
Situación de ISAVHPR0 en Islas Faroe
Después de la infección primaria de ISAV-HPR0,
la diseminación del virus muestra dos patrones,
caracterizados por la presencia de uno o dos peaks a lo
largo del ciclo de producción (Figura 2 y 3).
Un análisis de 18 ciclos muestra que el 56 % de estos
presenta el patrón de un peak, con una prevalencia
promedio de ISAV-HPR0 de 74 % y un 6 % de los ciclos
presentaron el patrón de dos peaks, con prevalencia de
ISAV-HPR0 promedio de 64 %. El tiempo promedio entre
el primer y segundo peak es de 7,5 meses con un rango
de 4 a 12 meses.
el ISAV aislado responsable del brote de ISA en Faroes,
mientras que el segundo grupo se encuentra relacionado
con los aislados de ISAV European-like en Norte América.
Provalence in gills (%)
2.4.- Las infecciones por ISAV-HPR0 son
temporales y altamente infecciosas
100
75
50
25
0
2 3 4 6 7 8 9 1113 14 151617 18 19
Months post seawater transfer
2.5.- Los centros marinos se infectan por ISAVHPR0 después de transferidos al mar
2.6.- La infección por HPR0 es estacional
La figura 5 muestra la prevalencia de ISAV-HPR0 entre el
año 2007 y 2009, basado en el screening de branquias. La
detección de ISAV-HPR0 en branquias presenta un patrón
estacional con alzas y bajas, registradas en invierno y
verano respectivamente.
Figura 2: Patrones de infección de ISAV-HPR0 en cultivo
de Salmón del Atlántico (Salmo salar), Islas Faroes. El
gráfico muestra patrón caracterizado por un peak, 7
meses post transferencia al mar.
Provalence in gills (%)
La detección de ISAV-HPR0 después de transferidos los
peces al mar ocurre en promedio a los 8,5 meses, rango
1 a 20 meses (figura 4). Si se considera solo aquellos
sitios en los cuales se utilizo branquias como tejido, el
promedio de la primera detección fue de 7,7 meses con
un rango 1 a 13 meses.
Christiansen et al., 2011
100
75
50
25
0
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Months post seawater transfer
2.7.- En Islas Faroes se encuentran dos
genotipos de ISAV-HPR0
Christiansen et al., 2011
El análisis de las secuencias genéticas muestra que en
Islas Faroes se encuentran dos clases de aislados de
ISAV-HPR0 identificadas como EU-G2-like y EU-NA-like.
El primero se encuentra genéticamente relacionado con
Figura 3: Patrones de infección de ISAV-HPR0 en cultivo
de Salmón del Atlántico (Salmo salar), Islas Faroes. El
gráfico muestra patrón caracterizado por dos peaks, el
primero de estos 10 meses y el segundo 16 meses, post
transferencia al mar.
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Situación de ISAVHPR0 en Islas Faroe
III.- Discusión
El presente estudio muestra que ISAV-HPR0 en Islas
Faroes presenta una distribución endémica y estacional,
no asociado a mortalidad, presencia de signos clínicos
o cambios histopatológicos. Esto apoya la hipótesis de
que la infección subclínica por ISAV-HPR0 no se relaciona
directamente con la presentación de brotes de ISA.
Los datos analizados muestras dos patrones de infección,
el primero caracterizado por presentar un peak de
infección a lo largo del ciclo de producción, con un
rápido incremento en la prevalencia y clearence del
virus y un segundo patrón con dos peaks a lo largo del
ciclo de producción, siendo el último sugerente de una
reinfección.
100
Provalence in gills (%)
Accumullated % infected
Este estudio apoya la hipótesis sobre el probable origen de
que las cepas de ISAV causantes de los brotes correspondan
a una adaptación de virus ISAV-HPR0 endémicos y de baja
patogenicidad (Christiansen et al., 2011).
50
0
50
25
0
FMAMJJASONDJ FMAMJJASONDJ FMAMJJASOND
2007
0
5
10
15
20
2008
2009
Christiansen et al., 2011
Months post seawater transfer
Christiansen et al., 2011
Figura 4: Periodo de tiempo acumulado post transferencia
hasta la primera detección de ISAV-HPR-0. El promedio
de infección fue de 8,5 meses post transferencia al agua
de mar (rango de 9 a 20 meses).
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Figura 5: Prevalencia mensual de ISAV-HPR0 en 10 sitios
de producción de Salmón del Atlántico (Salmo salar),
entre los años 2007 y 2009. La prevalencia alcanza el
peak en los meses de de invierno.