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Nombre del grupo: Estrategias Quimiopreventivas frente a Compuestos Carcinogénicos de la Dieta
Dieta.. Acrónimo: EQUIMDIET.
EQUIMDIET Web: http://www.ucm.es/info/nutricio/.
http://www ucm es/info/nutricio/ E-mail:
E mail: pmorales@vet
[email protected]
ucm es
Keywords: Seguridad Alimentaria, Genotoxicidad, Apoptosis, Quimiopreventivos, Carcinógenos. De
epartamento de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos. Facultad de Veterinaria,
Universidad Complutense. Web: http://www.ucm.es/centros/webs/fvet/. E-mail: [email protected]
Avda. Puerta de Hierro s/n, 28040-Madrid. Teléfono: 91-394374. Fax: 91-3943743.
Nº total de integrantes: 6
N
Nº de licenciados: 2
N
Nº de doctores: 4
N
Responsable del grupo: Pa
aloma Morales Gómez,
Gómez NIF: 00387908J.
00387908J Teléfono: 91-3943747.
91 3943747 E-mail:
E mail: pmorales@vet
[email protected]
ucm es
¿Licenciado o Doc
ctor? Doctor
1 Sala Estéril de Cultivos Celulares (con Filtro HEPA)
1.
NPIP
NDBA
Objetivos:
Evaluación de la citotoxicidad, genotoxicidad (daño al DNA), y estrés oxidativo de
compuestos químicos presentes en los alimentos, utilizando modelos in vitro.
Disulfuro de
Sulfuro de
Metodologías especializadas
Dipropilo (DPDS)
Dipropilo(DPS)
2 Cabina de Seguridad Biológica BIO-II-A
2.
3 Microscopio Óptico Olympus
3.
4 Microscopio de Fluorescencia Zeiss
4.
5 Incubador de CO2
5.
1. Ensayos de Citotoxicidad: Se utilizan algunos marcadores de citotoxicidad como son: la actividad
mitocondrial (actividad de la enzima succinato mitocondrial, Método MTT), la permeabilidad de la
membrana
b
(lib
(liberación
ió de
d la
l lactato-deshidrogenasa,
l
d hid
Mé d LDH),
Método
LDH) la
l pérdida
é did de
d potencial
i l de
d
membrana mitocondrial (∆ψm), y el metabolismo energético (contenido en ATP).
2. Ensayos de Genotoxicidad: Ensayo Cometa (Determinación del daño al DNA): Inducción de la
ruptura de las cadenas del DNA, del daño oxidativo: oxidación de purinas y pirimidinas y del daño
alquilativo.
l il ti
3. Ensayos de Mutagenicidad: utilizando bacterias (Test de Ames) y líneas celulares (Ensayo de
Mutación Génica).
1 Título: EVALUACIÓN DE LA SEGURIDAD ALIMENTARIA DE MICROPARTÍCULAS (COLORANTES) Y
1.
NANOPARTÍCULAS DE ORO Y PLATA EN CÉLULAS HUMANAS: ESTIMACIÓN DE SUS RIESGOS Y BENEFICIOS
N
P
POTENCIALES.
Entidad financiadora: Ministerio de Ciencia e Innovación.
E
R
Referencia:
AGL2010-16561, subprograma ALI.
Acrónimo: SEGURNANO
Alcance: Nacional
2 Título
2.
Tít l : EVALUACIÓN
Ó DE LAS ACTIVIDADES ANTITUMORALES DE
MIELES DE DIFERENTES ORÍGENES
Í
B
BOTÁNICOS
(UNIFLORALES Y MULTIFLORALES) DE LA COMUNIDAD DE MADRID.
Entidad financiadora: Programa de Creación y Consolidación de Grupos de Investigación BSCH-UCM(pendiente de
E
r
resolución).
resolución)
Objetivos:
Evaluar el efecto protector de compuestos organosulfurados, isotiocianatos, polifenoles,
vitaminas, acidos grasos omega-3, etc. así como las interacciones entre los mismos (efectos
sinérgicos, aditivos o antagónicos) frente a N
N-nitrosaminas,
nitrosaminas, aminas heterocíclicas e hidrocarburos
policíclicos aromáticos presentes en los alimentos.
A
Acrónimo:
ANTITUMIEL
Alcance: Regional
Metodologías especializadas
1. Ensayo Cometa: daño al DNA
2. Actividad de las isoformas enzimáticas humanas del citocromo P450 (Fase I): CYP 1A1
(Método de la O-deetilación de la 7-etoxiresorufina), CYP2E1 (Método de la hidroxilación del pnitrofenol)
it f
l) y CYP2A6 (Método
(Mét d de
d la
l hidroxilación
hid
il ió de
d la
l cumarina).
i )
3. Actividad de las enzimas humanas de la Fase II: Determinación del glutation (GSH), de la
superoxidodismutasa (SOD) de la catalasa y de la UDP-glucuroniltranferasa (UDP-GT).
1.
Haza, A.I., Zabala, A. and P. Morales. 2004. Antiproliferative and protective effect of a Lb. plantarum strain of milk origin
ag
gainst cytotoxicity of N-nitrosamines and its induction on TNF-alfa, IL1-1 and IL-8 production. International Dairy Journal, 14:
29
9-38 (DOI: 10.1016/S0958-6946(03)00146-8). Factor de impacto: 2.031.
2. Arranz
A
N Haza,
N.,
H
A I García,
A.I.,
G
í
A Delgado,
A.,
D l d
E Rafter,
E.,
R ft
J and
J.
d P.
P Morales.
M
l
2007 Effects
2007.
Eff t off organosulfurs,
lf
is
sothiocyanates and vitamin C towards hydrogen peroxide-induced oxidative DNA damage (strand breaks and
ox
xidized purines/pyrimidines) in human hepatoma cells. Chemico-Biological Interactions, 169: 63-71 (DOI:
10
0.1016/j.cbi.2007.05.006). Factor de impacto: 3.09.0
3. Arranz N., Haza, A.I., García, A., Rafter, J. and P. Morales. 2007. Protective effect of vitamin C towards N-
Objetivos: Determinar si los compuestos presentes en la dieta inducen apoptosis en líneas celulares
tumorales humanas.
Metodologías especializadas
1. Microscopía de fluorescencia: Tinción con Hoechst 33342 y con Naranja de Acridina.
2. Citometría de flujo: Contenido de ADN, Anexina, TUNEL, Actividad de Caspasas, Determinación de
Proteínas Intracelulares, Especies Reactivas del oxígeno (EROs).
3 Western
3.
W t
Blot
Bl t de las moléculas
é
implicadas en el proceso apoptótico
ó
niitrosamines-induced DNA damage in the single-cell gel electrophoresis (SCGE/HepG2 assay). Toxicology in Vitro,
21
1: 1311-1317 (DOI: 10.1016/j.tiv.2007.03.015). Factor de impacto: 2.193.
4. Arranz N., Haza, A.I., García, A., Moller, L., Rafter, J. and P. Morales. 2007. Protective effects of organosulfur
co
ompounds towards N-nitrosamines-induced DNA damage in the single-cell gel electrophoresis (SCGE/HepG2
as
ssay. Food and Chemical Toxicology, 45: 1662-1669 (DOI: 10.1016/j.fct.2007.02.032). Factor de impacto: 2.186.
5. García, A., Haza, A.I., Arranz, N., Delgado, E. Rafter, J. and P. Morales. 2008. Organosulfur compounds alone or
in
n combination with vitamin C protect against N-nitrosodibutylamine and N-nitrosopiperidine-induced oxidative
DNA damage in HepG2 cells. Chemico-Biological Interactions, 173: 9-18 (DOI:10.1016/j.cbi.2008.01.011). Factor
de
e impacto:
p
3.077
6. Delgado, E., Haza, A.I., Arranz, N., García, A. and P. Morales. 2008. Dietary polyphenols protect against N-
niitrosamines and benzo(a)pireno-induced DNA damage (strand breaks and oxidized purines/pyrimidines) in
HepG2
p
human hepatoma
p
cells. European
p
Journal of Nutrition,, 47: 479-490 ((DOI: 10.1007/s00394-008-0751-6).
)
Fa
actor de impacto: 1.899
Objetivos: Evaluar la producción de citoquinas por compuestos quimiopreventivos de la dieta
Metodologías especializadas
1. Ensayos Inmunoenzimáticos ELISA: Se utilizan distintos formatos: ELISA Indirecto, Directo,
Sándwich, Competitivo
7. García, A., Haza, A.I., Arranz, N., Rafter, J. and P. Morales. 2008. Protective effects of isothiocyanates alone or in
co
ombination with vitamin C towards N-nitrosodibutylamine or N-nitrosopiperidine-induced oxidative DNA damage
in
n the single-cell gel electophoresis (SCGE)/HepG2 assay. Journal of Applied Toxicology, 28: 196-204 (DOI:
10
0.1002/jat.1270). Factor de impacto: 2.127.
8. Arranz N., Haza, A.I., García, A., Delgado, E., Rafter, J. and P. Morales. 2008. Inhibition by vitamin C of apoptosis
in
nduced by N-nitrosamines in HepG2 and HL-60 cells. Journal of Applied Toxicology, 28: 788-796 (DOI:
10
0.1002/jat.1340). Factor de impacto: 2.127.
9. García, A., Morales, P., Arranz, N., Delgado, E., Rafter, J and A.I. Haza. 2008. Induction of apoptosis and reactive
Objetivos:
Estimación de los posibles riesgos derivados del empleo de nuevos nanomateriales
(nanopartículas de oro y plata de diferentes tamaños) en contacto con los alimentos, así como sus
posibles beneficios para la Industria Alimentaria.
Metodologías especializadas
ox
xygen species
i production
d ti
b N-nitrosopiperidine
by
N it
i
idi
and
d N-nitrosodibutylamine
N it
dib t l
i
i human
in
h
l k
leukemia
i cells.
ll Journal
J
l off
Ap
pplied Toxicology, 28: 455-465 (DOI: 10.1002/jat.1295). Factor de impacto: 2.127
10. Delgado, E., Haza, A.I., Arranz, N., García, A. and P. Morales. 2009. Myricetin, quercetin, (+)catechin and (-)
ep
picatechin
i t hi protect
t t against
i t N-nitrosopiperidine
N it
i
idi
and
d N-nitrosodibutylamine-induced
N it
dib t l
i
i d
d DNA damage
d
i human
in
h
he
epatoma cells. Toxicology in vitro, 23: 1292-1297 (DOI: 10.1016/j.tiv2009.07.022). Factor de impacto: 2.473
1. Cultivo y manipulación de células humanas de hepatoma (HepG2), leucemia (HL
(HL-60),
60),
carcinoma mamario (Hs578T), fibroblastos de pulmón, (IMR90), fibroblastos epiteliales (NHDF), de
tejido mamario (Hs 578Bst) y de adenocarcinoma de colon (Caco2), así como la determinación de la
viabilidad celular, genotoxicidad y apoptosis (ver metodologías especializadas de las líneas de
investigación 1 y 3).
2. Ensayos de absorción intestinal: evaluación de la integridad de la monocapa celular: Resistencia
eléctrica transepitelial (TEER) y permeabilidad aparente. Evaluación de la actividad transportadora.
3. Estrés Oxidativo: determinación de Especies reactivas del oxígeno (EROs).
1 Almudena García, Paloma Morales, Nuria Arranz, Eugenia Delgado y Ana I. Haza. 2008. Free radical scavenging and anti1.
apoptotic effects of vitamin C towards N-nitrosopiperidine and N-nitrosodibutylamine-induced apoptosis. 45th Congress of the
E
European
Societies of Toxicology (EUROTOX 2008). Rhodes (Greece). Toxicology Letters, 180S: S181. Factor de impacto: 3.249.
2. Eugenia Delgado, Paloma Morales , Almudena García,, y Ana I. Haza. 2009. Differential apoptosis response of HL-60 and
2
H
HepG2
cells to docosahexanoic acid. 46th Congress of the European Societies of Toxicology (EUROTOX 2009). Dresden
(G
Germany). Toxicology Letters, 189S: S68. Factor de impacto: 3.479.
3. Haza, A.I., García, A. and P. Morales. 2009. Vitamin C protects from oxidative DNA damage and apoptosis caused by food N3
N
Nitrosamines.
In: Handbook of Vitamin C Research: Daily Requirements, Dietary Sources and Adverse Effects. Eds: Kucharski,
H Zajac, J. Nova Publishers, NY, USA.
H.,
1. Karolinska Institutet. Department of Medical Nutrition, Huddinge (Suecia).
2. University
y of Applied
pp
Sciences of Osnabrück. Department
p
of Food Hygiene
yg
and
Nutrition. Osnabrück, (Alemania).
4 Tesis Doctoral Europea. 2009. Efecto Protector de Compuestos Organosulfurados, Isotiocianatos y Vitamina C frente al Daño
4.
al DNA Inducido por N-Nitrosodimetilamina y N-Nitrosopirrolidina Presentes en Alimentos: Mecanismos de Acción. Autora:
N
NURIA
ARRANZ GUERRERO. Directoras. Paloma Morales y Ana I. Haza. Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense de
M
Madrid.
5. Tesis Doctoral Europea.
5
Europea 2010.
2010 Efecto Protector de Compuestos Organosulfurados e Isotiocianatos Sólos o en Combinación con
V
Vitamina
C frente al Daño Oxidativo al DNA Inducido por N-Nitrosodibutilamina y N-Nitrosopiperidina Presentes en los
A
Alimentos:
Mecanismos de Acción. Autora: ALMUDENA GARCÍA PÉREZ. Directoras. Paloma Morales y Ana I. Haza. Facultad de
V
Veterinaria.
Universidad Complutense de Madrid.