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EVALUACIÓN DE LA EFICACIA DE AGROXIGREEN-Mg
CODIAGRO SOBRE LA CAÍDA DEL FRUTO EN CÍTRICOS
de
Dpto técnico CODIAGRO
Este trabajo ha sido realizado por la unidad de:
Ecofisiologia i Biotecnologia
Departament de Ciències Agraries i del Medi Natural
Universitat Jaume I
1. Resumen
En este trabajo se estudió el efecto de AGROXIGREEN-Mg de CODIAGRO en la
abscisión de frutos cítricos. Para completar la caracterización del sistema, se evaluaron
distintos parámetros fisiológicos en planta y fruto. Los resultados mostraron que el
tratamiento con el producto reduce la abscisión del fruto cítrico notablemente. Este hecho
puede beneficiar notablemente la cosecha en aquellas variedades con problemas de cuajado
y/o en años de condiciones climáticas adversas. Según los datos, el producto parecía ejercer
su efecto beneficioso a través de la inducción, directa o indirecta, de la acumulación de
carbohidratos en el fruto. El tratamiento mejora la capacidad fotosintética de los árboles,
hecho que podría traducirse en un mayor transporte de fotoasimilados desde las hojas
(fuente) a los frutos en desarrollo (sumidero). Para demostrar este efecto, se cuantificó la
concentración de carbohidratos en hojas de plantas de tomate tratadas con el producto. Se
realizaron dos determinaciones que muestran una tendencia idéntica. El tratamiento con
AGROXIGREEN tuvo un efecto estimulador de la síntesis de carbohidratos en hojas. Los
resultados muestran que aumentaron las concentraciones de glucosa, fructosa, sacarosa y
almidón aunque este último de forma más moderada Por último, la bajada en el contenido
de hormonas relacionadas con el estrés en hojas (ácido abscísico, ácido jasmónico y ácido
salicílico) en árboles tratados indicaría que los tratamientos con AGROXIGREEN-Mg
estimulan el metabolismo vegetal y, por tanto, mejoran el estado fisiológico de la planta.
En definitiva, podríamos concluir que el tratamiento con AGROXIGREEN-Mg de
CODIAGRO puede ser empleado eficazmente para inhibir la caída fisiológica (también
llamada caída de junio) de frutos cítricos.
2. Materiales y métodos
2.1. Material vegetal
El ensayo se realizó en la parcela experimental de la Universitat Jaume I en el campus Riu
Sec de Castellón. Se trata de un huerto de árboles de 6 años de edad de Clementina de
Nules injertada sobre citrange Carrizo. La extensión de la parcela es de unos 1.000 m2
Para el ensayo de cuantificación de carbohidratos, se cultivaron plantas de tomate en
contenedores de 12 litros que contenían perlita como sustrato inerte. Las plantas se
germinaron en semilleros en cámaras de cultivo y una vez trasplantadas se colocaron en los
invernaderos de la Universitat Jaume I
2.2. Tratamientos y muestreos
El diseño experimental constó de tres grupos de tratamiento: un grupo control pulverizado
con un placebo y dos grupos tratados con concentraciones crecientes de AGROXIGREENMg de CODIAGRO 0) – árboles no tratados 1) - dosis altas (0.5%) 2) - dosis bajas (0.3%)
Los días específicos de tratamiento fueron:6 de mayo de 2008, 20 de mayo de 2008, 30 de
mayo de 2008 y 12 de junio de 2008
Para el ensayo de cuantificación de carbohidratos en tomate, Las plantas se regaron según
el régimen previsto en la parcela a estudiar y se pulverizó AGROXIGREEN-Mg a la dosis
alta dos veces (con un intervalo de 15 días). En el momento de la pulverización las plantas
tenían un piso de fruta cuajada y frutos en desarrollo. Se originaron 2 grupos de plantas:
0) – plantas no tratadas
1) – plantas tratadas con el compuesto 1
2.3. Cuajado del fruto
Se marcaron 200 ovarios de flores campaneras (en estadio de caída de pétalos) en árboles
tratados y un idéntico número en árboles no tratados. Se realizó el seguimiento de su
cuajado o abscisión hasta pasada la caída de junio (o caída fisiológica).
2.4. Medidas de Intercambio gaseoso
Las medidas de intercambio gaseoso (tasa neta de fotosíntesis, transpiración, conductancia
estomática, relación de la concentración de CO2 en la cavidad subestomática y CO2
ambiental) se realizaron en hojas adultas con un equipo portátil de fotosíntesis (LCpro+,
ADC Bioscientific Ltd., Hoddesdon, Reino Unido) entre las 9’00 y las 11’00 h de la
mañana. Se seleccionaron 200 hojas de posición intermedia en 10 árboles tratados y sobre
otras 200 hojas de las mismas características en árboles no tratados
2.5. Medida del contenido hormonal foliar
El material vegetal congelado se extrajo en agua ultrapura con la ayuda de un instrumento
dispersador (Ultra Turrax, Ika-Werke, Staufen, Alemania). El homogenato resultante se
centrifugó y se recuperó el sobrenadante, que se acidificó a pH 3.0 y particionó con éter de
etilo. Se recuperó la fase orgánica que se evaporó en un concentrador centrífugo (Jouan,
Saint Herblain, Francia). El residuo resultante se resuspendió en una mezcla de
metanol:agua en proporción 10:90. La solución final, previamente filtrada, se inyectó en un
equipo de HPLC acoplado a espectrometría de masas. Las hormonas se separaron mediante
cromatografía de fase reversa utilizando un gradiente lineal de metanol:agua suplementados
con ácido acético a una concentración de 0.05%.
2.6 Cuantificación de carbohidratos
Diez días después de cada una de las pulverizaciones se cosecharon distintas plantas de los
dos grupos y se cuantificó la concentración foliar de los siguientes carbohidratos: almidón,
sacarosa, glucosa y fructosa.
El análisis de carbohidratos se realizó como se describe en Gómez-Cadenas et al., 2000
(Planta, 210: 636-643). Brevemente, las muestras se purificaron secuencialmente mediante
columnas de intercambio aniónico y catiónico y cartuchos de C-18. La sacarosa, glucosa y
fructosa se analizaron en un HPLC Agilent 1200 equipado con una columna de HPLC para
carbohidratos (250 mm longitud, 4.6 mm diámetro interno; Waters-Millipore) y un
refractómetro diferencial. La efectividad de la extracción se analizó usando fucosa como
estándar interno. El almidón se analizó tras la hidrólisis de los pellets.
Se realizaron tres extracciones independientes por fecha de ensayo. Los datos mostrados en
las distintas gráficas son medias ± error estándar.
3. Resultados
3.1. Cuajado del fruto
El tratamiento con el producto proporcionado por CODIAGRO redujo significativamente la
abscisión de frutos cítricos, inversamente correlacionada con el grado de cuajado. La
abscisión natural de los frutos se vio significativamente reducida cuando se trataron los
árboles con las dos concentraciones utilizadas (Figura 1). Ambos tratamientos mostraron
resultados positivos pero la concentración más alta fue la más efectiva. Así, al finalizar el
experimento, la diferencia en número de frutos entre árboles control y los tratados con
dicha concentración era de un 20% mientras que los tratados con la dosis baja mostraron
una reducción de la abscisión ligeramente menor (12%). Este dato es altamente
significativo y puede marcar diferencias muy importantes de cosecha.
3.2. Medidas de Intercambio gaseoso
Para intentar explicar las bases fisiológicas de estas diferencias se realizaron una serie de
medidas. En primer lugar se determinaron varios parámetros de intercambio gaseoso: tasa
de transpiración, tasa fotosintética neta, relación entre la concentración de CO2 en la
cavidad subestomática y CO2 ambiental, conductancia estomática y eficiencia en el uso del
agua.
Las dos medidas de la tasa de transpiración que se realizaron en plantas control y tratadas
con AGROXIGREEN-Mg indican que este parámetro aumentó en las hojas de plantas
tratadas. En la figura 2 se puede apreciar que el primer día de medición, la tasa de
transpiración había aumentado significativamente en las plantas tratadas con la menor
concentración del producto mientras que en la segunda fecha de medición el aumento de
este parámetro fue significativo en las plantas tratadas con la concentración mayor.
De forma paralela a la tasa de transpiración, se midió la tasa neta fotosintética (Figura 3).
En este caso, se observa que el tratamiento con el producto menos concentrado induce un
aumento de este parámetro en las dos fechas de medición.
La relación (Ci/Ca) expresa el grado de eficiencia fotosintética, su incremento respecto de
plantas control crecidas en condiciones óptimas, representa una inhibición fotosintética
(Figura 4). Como se puede observar, las plantas tratadas con AGROXIGREEN mostraron
en general, un descenso en este parámetro, lo que indica una mejora en la eficiencia
fotosintética.
La conductancia estomática (Figura 5) siguió un perfil similar al que presentó la tasa de
transpiración (Figura 2) o la tasa neta de fotosíntesis (Figura 3) indicando una fuerte
correlación entre el cierre estomático y la capacidad fotosintética.
La eficiencia en el uso del agua es un parámetro indicativo de la capacidad de las plantas
para ajustar la toma de CO2 y la emisión de vapor de agua. Las plantas tratadas con
AGROXIGREEN-Mg mostraron un ligero aumento de este parámetro (Figura 6).
3.5. Medida del contenido hormonal
Por último se estudió la influencia del tratamiento sobre el contenido hormonal en hojas
El análisis de ácido abscísico (ABA) en hojas muestra una ligera reducción del contenido
foliar de esta hormona el día 13 de junio en los árboles tratados con las dosis más alta de
AGROXIGREEN. Sin embargo, en la otra fecha en la que se realizaron determinaciones de
hormonas no se observó ninguna variación significativa. El tratamiento a baja
concentración tampoco alteró el contenido endógeno de ABA en hojas de cítricos (Figura
7).
La figura 8 muestra la concentración de ácido jasmónico (JA) en hojas de árboles tratados o
no con AGROXIGREEN-Mg:
Los resultados indican que la concentración de JA se vio reducida en hojas de árboles
tratados. Este descenso fue significativo para las dos dosis ensayadas el día 28 de mayo y
únicamente para la aplicación con menor concentración de producto el día 13 de junio.
La figura 9 muestra la concentración de ácido salicílico (SA) en hojas de árboles tratados o
no con AGROXIGREEN-Mg. Los resultados indican que la concentración de SA se vio
significativamente reducida en hojas de árboles tratados con ambas concentraciones la
segunda fecha de medida.
3.4 Cuantificación de carbohidratos en hojas de tomate
El tratamiento con AGROXIGREEN-Mg promovió un incremento significativo en la
concentración de glucosa en las dos fechas ensayadas (Figura 10).
La concentración de fructosa también se vio incrementada en hojas de tomate tratadas con
Agroxigreen-Mg. Es importante apreciar que este incremento se mantuvo en las dos fechas
ensayadas (Figura 11)
La concentración de sacarosa, principal azúcar de transporte entre hojas y frutos también
aumentó como consecuencia del tratamiento con AGROXIGREEN-Mg. Es importante
apreciar que este incremento se mantuvo en las dos fechas ensayadas (Figura 12).
La concentración del carbohidrato de reserva también aumentó en las hojas de plantas
tratadas con AGROXIGREEN-Mg. Sin embargo, este incremento no fue tan apreciable
como en los otros carbohidratos. Pese a esta menor diferencia, el dato es muy significativo
ya que la concentración de almidón es mucho mayor que la de los azúcares solubles y
ligeras diferencias en su contenido pueden ser muy importantes en periodos de importante
demanda de carbohidratos por el fruto.
4. Discusión
Los datos obtenidos a lo largo de este experimento sugieren una influencia positiva de los
tratamientos químicos sobre los distintos parámetros fisiológicos estudiados. En primer
lugar hay que destacar que AGROXIGREEN-Mg reduce la abscisión del fruto cítrico
notablemente y, además, lo hace a las dos dosis ensayadas.
Este hecho puede beneficiar notablemente la cosecha en aquellas variedades con problemas
de cuajado y/o en años de condiciones climáticas adversas. En investigaciones pasadas
(Gómez-Cadenas et al. 2000, Talón et al. 2002) se demostró que la abscisión del fruto en
crecimiento está controlada hormonalmente y que depende del contenido en carbohidratos
del fruto. Aquellos frutos que trascurridos 35 días desde la antesis no hayan alcanzado un
umbral mínimo en el contenido de carbohidratos entran en un programa de senescencia
mediado por el ABA y el etileno que acaba en la abscisión de los mismos.
El efecto beneficioso de AGROXIGREEN-Mg se debe, en principio, al incremento directo
o indirecto de los carbohidratos del fruto. En efecto, el tratamiento mejora los parámetros
fotosintéticos de forma clara. Esta mejora de la capacidad fotosintética de los árboles se
traduciría en un mayor transporte de fotoasimilados desde las hojas (fuente) a los frutos en
desarrollo (sumidero). La cuantificación de los carbohidratos en plantas de tomate tratadas
con AGROXIGREEN-Mg demuestra de forma clara esta hipótesis. El tratamiento con
AGROXIGREEN tuvo un efecto estimulador de la síntesis de carbohidratos en hojas. Los
resultados muestran que aumentaron de forma significativa las concentraciones de glucosa,
fructosa, sacarosa y almidón aunque este último de forma más moderada
Por último es destacable la bajada en el contenido de hormonas relacionadas con el estrés
en hojas (ABA, JA, SA). Estos datos podrían indicar que los tratamientos potenciaron el
metabolismo vegetal y, por tanto, mejoraron el estado fisiológico de la planta.
En definitiva, los datos apuntan a que el tratamiento con AGROXIGREEN-Mg de
CODIAGRO puede ser aplicado como tratamiento eficaz para inhibir la caída fisiológica de
frutos cítricos (también llamada caída de junio) y que la explicación a este efecto
beneficioso está en la mejora del metabolismo vegetal que se traduce en una mejor
eficiencia fotosintética y, por tanto, una mayor exportación de fotoasimilados desde las
hojas a los frutos. Además, la aplicación de AGROXIGREEN-Mg induce una disminución
de las señales de estrés en hojas lo que, de forma sinérgica, podría contribuir a potenciar el
crecimiento reproductivo del árbol.
Bibliografía citada
Gómez-Cadenas, Mehouachi J, Tadeo FR, Primo-Millo E, Talon M. Hormonal regulation
of fruitlet abscission induced by carbohydrate shortage in citrus. Planta, 210: 636643. 2000
Talón M, Mehouachi J, Iglesias DJ, Tadeo FR, Lliso I, Moya JL, Gómez-Cadenas A,
Primo-Millo E. Abscisión de los frutos cítricos. Bases fisiológicas que apoyan la
“hipótesis de la competencia. Todo Citrus, 16: 11. 2002.
Figura 7 Contenido de ácido abscísico en hoja
Figura 8: Contenido del ácido Jasmónico en hoja
Figura 9: contenido de ácido salicílico en hoja
Figura-10 Contenido foliar de Glucosa
Control
Agroxigreen-Mg
-1
Glucosa (mmol Kg PS)
25
20
15
10
Primer tratamiento
Segundo tratamiento
Figura-11 Contenido foliar de Fructosa
16
-1
Fructosa (mmol Kg PS)
14
Control
Agroxigreen-Mg
12
10
8
6
4
Primer tratamiento
Segundo tratamiento
Figura-12 Contenido foliar de Sacarosa
Control
Agroxigreen-Mg
-1
Sacarosa (mmol Kg PS)
8
6
4
2
Primer tratamiento
Segundo tratamiento
Figura-13 Contenido foliar de almidón
-1
Almidón (mmol Kg PS)
450
Control
Agroxigreen-Mg
400
350
300
Primer tratamiento
Segundo tratamiento