Document related concepts
Transcript
CARACTERIZACIÓN DE LOS RECEPTORES 5-HT3 RECOMBINANTES Y NATIVOS DE NEURONAS MIENTÉRICAS DE RATÓN Y COBAYO Juárez EH1, Nieto-Pescador MG1, Ramos-Lomas T1, Liñan-Rico A1, Guerrero-Alba R1, Espinosa-Luna R1, Barajas-López C1*. 1. Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica (IPICYT) *[email protected] Los receptores 5-HT3 están constituidos por cinco subunidades; cada subunidad está formada por un N- y C-terminal extracelulares, cuatro pases transmembranales, y un asa grande y una pequeña intracelulares. En el sistema nervioso entérico de mamíferos, estos receptores están relacionados con el inicio del reflejo peristáltico, la émesis y el síndrome del intestino irritable. Las características biofísicas y farmacológicas de los receptores 5-HT3 nativos de las neuronas mientéricas del cobayo son distintas a aquellas de los receptores homoméricos 5-HT3A observadas en sistemas de expresión heteróloga, lo cual sugiere la presencia de un receptor heteromérico o de una variante distinta en éstas neuronas. Nuestro objetivo fue elucidar las subunidades que conforman al receptor nativo 5-HT3 en las neuronas mientéricas del cobayo y del ratón. Para esto utilizamos técnicas de patch clamp en la modalidad de célula completa con fijación de voltaje, y de biología molecular. Construimos curvas concentraciónrespuesta y obtuvimos la EC50 de la serotonina en neuronas mientéricas de ratón y cobayo, además obtuvimos la IC50 y eficacia del ondansetrón y picrotoxina sobre los receptores 5-HT3 de cobayo. Las neuronas mientéricas de ratón y cobayo mostraron poca rectificación y la cinética de desensibilización a la serotonina en neuronas mientéricas de ratón y cobayo se ajustó mejor a la suma de tres funciones exponenciales. Finalmente aislamos, clonamos y secuenciamos el cDNA que codifica para las subunidadades 5-HT3A y 5-HT3B del intestino del ratón y cobayo, con la finalidad de expresarlas en ovocitos de Xenopus laevis y así poder comparar las diferentes características entre los receptores nativos y heterólogos 5-HT3. Los resultados sugieren que los receptores nativos 5-HT3 de las neuronas mientéricas de cobayo y ratón están formados por las subunidades 5-HT3A y 5-HT3B.
