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INSTRUCCIONES DE USO
Revisión 1 Feb.2014
BASE DE AGAR COLUMBIA
Base de Agar Columbia presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1104
Agar Sangre (Base de Agar Columbia) presentación placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 912
Agar Chocolate (Base de Agar Columbia) presentación Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5106
USO PREVISTO
Base de Agar Columbia está recomendada para el aislamiento y cultivo de microorganismos exigentes y para la
determinación de reacciones hemolíticas a partir de muestras clínicas.
FORMULA EN g/l
Digerido Pancreático Caseína
10.00 Digerido Pancreático
Corazón
Extracto Levadura
5.00 Almidón maíz
Digerido Péptico Carne
5.00 Agar Bacteriológico
Cloruro Sódico
5.00
3.00
1.00
13.50
Final pH 7.3 ± 0.2 a 25ºC
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
PREPARACION
Base de Agar Columbia presentación 500 gramos, 5, 25, 50 kilos. Catálogo 1104 (Medio deshidratado)
Suspender 42.5 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien. Calentar agitando frecuentemente y hervir
durante un minuto. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar a en autoclave 121°C durante 15 minutos.
Generalmente el medio se enriquece con sangre desfibrinada estéril, suero o algún otro material. Enfriar a 45-50°C y añadir
asépticamente el 5-10% de sangre desfibrinada estéril, homogenizar evitando la formación de burbujas y verter en placas
Petri. Se puede preparar Agar chocolate por calentamiento a 80°C, después de añadir la sangre. El color del medio
preparado sin sangre es ámbar claro ligeramente opalescente. Las placas preparadas deben almacenarse entre 8-15°C. El
color del medio preparado con sangre es opaco rojo cereza.
El medio deshidratado debe ser homogéneo, libre de floculos y de color beige claro. Si hay algún cambio físico no utilizar
el medio.
Si se desea hacer el medio más selectivo se pueden añadir los siguientes suplementos
CNA Suplemento (Cat. 6016) para aislamiento de Estafilococos, Estreptococos y Neumococos
Brucella Suplemento (Cat. 6017) para aislamiento de Brucella
Agar Sangre (Base de Agar Columbia) presentación placas de 90 mm Caja 20 unidades. Catálogo 912
(Medio preparado). Listo para su uso
Agar Chocolate (Base de Agar Columbia) Frascos 100 ml Caja 12 unidades. Catálogo 5106. Medio preparado
Listo para su uso (fundir y dispensar en placas)
PRINCIPIOS Y APLICACIÓN
BASE AGAR COLUMBIA es un medio altamente nutritivo para el cultivo de microorganismos exigentes especialmente
cuando se utiliza como base para chocolate. Puede ser utilizado para aislamiento selectivo, por la adición de agentes
antimicrobianos. La mayoría de las bacterias patógenas comunes crecen bien en este medio sin la adición de sangre.
El Digerido Pancreático de Caseína, Digerido péptico de carne y Digerido pancreático de corazón, aportan nitrógeno
vitaminas minerales y amino ácidos esenciales para el crecimiento; el extracto de Levadura y el Almidón de maíz son
fuentes de vitaminas, particularmente del grupo B esencial para el crecimiento bacteriano; el Cloruro sódico mantiene el
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balance osmótico. El Agar bacteriológico es el agente solidificante. La sangre es otra fuente factores de crecimiento
para los microorganismos y es la base para determinar las reacciones hemolíticas.
Con la adición de 5-10% de sangre desfibrinada estéril y especialmente con el suplemento Polienriquecimiento
(Cat.6011) y el suplemento VCN (Cat.6013), el Base de Agar Columbia llega a ser un excelente Agar chocolate que se
puede utilizar para el aislamiento de patógenos como Neisseria, Gonococos y Meningococos, mientras el paciente está
recibiendo tratamiento con antibióticos.
TIPO DE MUESTRAS
Sangre
La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Standards en
Microbiología Clínica.
PROCEDIMIENTO
1.
Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo.
2.
Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 18-72 horas.
3.
Lectura e interpretación de los resultados
Tipos de Hemolisis
1. Alpha-hemolisis: decoloración verdosa de medio
2 .Beta-hemolisis: zona clara alrededor de la colonia
3. Gamma-hemolisis: sin cambio
CONTROL MICROBIOLOGICO
Los siguientes resultados, fueron obtenidos en el desarrollo del medio a partir de cepas patrón con el 7% de sangre
desfibrinada de carnero, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados después de 18-72 horas.
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Inoculo
cfu/ml
103-105
Desarrollo
Bueno
Recuperación
%
≥70
Staphylococcus epidermidis ATCC 12228
103-105
Bueno
≥70
-
Streptococcus pneumoniae ATCC 6303
103-105
Bueno
≥70
Alpha
Streptococcus pyogenes ATCC 19615
103-105
Bueno
≥70
Beta
Microorganismos
Hemolisis
Beta
BIBLIOGRAFIA
Ellner, Stossel, Drakeford and Vasi. AM J. Clin. Path. 45:502-504. 1966.
European Pharmacopoeia. 6.5
Diagnostico in vitro
Solo para uso profesional
Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad
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EP
25ºC
C
ALMACENAMIENTO
Una vez abierto guardar el medio cerrado para evitar la hidratación
Utilizable hasta la fecha de caducidad.
2ºC
Placas preparadas almacenar entre 8-15°C. Frascos preparados almacenar entre 2-8°C
Utilizable hasta la fecha de caducidad.
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