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Métodos de Conservación de Fitopatógenos Dra. Ing. Agr. Sandra Alaniz Mayo de 2012 Métodos de Conservación 1) Repique continuo en medio de cultivo INCONVENIENTES: - contaminaciones - degeneración de cepas - perdida de virulencia - disminución de capacidad de esporulación - alto costo Métodos de Conservación A) CORTO PLAZO (< 2 años) - medio de cultivos a baja temperatura Ventajas: bajo costo Desventajas: baja duración B) MEDIANO PLAZO (2 a 8 años) - desecación (sílica gel, perlas de vidrio, otros) - en suelo - en tejido vegetal deshidratado - suspensión en agua estéril Importancia de conservar los Fitopatógenos ¿Para qué hay que conservar las cepas de los patógenos? - intercambio de cepas - nuevas investigaciones - docencia Métodos de Conservación Objetivos: - no afecten sus características (expresión fenotípica, virulencia, esporulación) - bajo riesgo de contaminación - bajo costo - no ocupen mucho espacio Se basan en: disminuir al mínimo la actividad del patógeno mediante - bajada de temperatura - deshidratación Métodos de Conservación C) LARGO PLAZO (> 8 años) - criopreservación (almacenar a < 20 ºC) - liofilización Ventajas: larga conservación Desventajas: alto costo de los aparatos y materiales Métodos de Conservación- Corto plazo 1)Tubos con medio de cultivo a 5ºC - en general medio de cultivo pobre (AA, otros) - se puede cubrir superficie con aceite - hongos, bacterias Métodos de conservación – Mediano plazo 1) Papel de filtro colonizado deshidratado y almacenado a -20ºC - papel se deseca con sílica gel (hidróxido de sílice) - hongos (productores de esporas) y bacterias Métodos de Conservación- Corto plazo 2) En planta viva - virus - se mantienen en invernáculo Métodos de Conservación – Mediano plazo 2) Material vegetal deshidratado - se deseca el vegetal y almacena con sílica gel - en general se almacena a temperatura ambiente - hongos, bacterias y virus Métodos de Conservación – Mediano plazo Métodos de Conservación – Mediano plazo 3) Embebidos en agua - temperatura almacenamiento depende del patógeno - problemas de contaminación - hongos 4) En suelo - se puede o no almacenar en frío - para hongos de suelo ( ej: Monosporascus cannonballus) Métodos de Conservación- Largo Plazo 1)Solución con glicerol a - 70ºC - solución de glicerol (alcohol):10-15 % - clave: congelamiento y descongelamiento rápido - hongos y bacterias Métodos de Conservación- Largo Plazo 2) Nitrógeno líquido a -196ºC - hongos, bacterias y virus Métodos de Conservación- Largo plazo 3) Liofilizados - se mantienen entre 0 y 5ºC - hongos, bacterias, virus Muchas gracias!!! Dra. Ing. Agr. Sandra Alaniz Mayo de 2012