Download `Tomato leaf curl New Delhy virus` (ToLCNDV)

Epidemiologia de
Tomato leaf curl New Delhi virus (ToLCNDV)
DIRK JANSSEN
IFAPA La Mojonera, Almería
VIROSIS EN HORTÍCOLAS, Almería, 22 de enero de 2015.
Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera
CONSEJERÍA DE AGRICULTURA, PESCA Y DESARROLLO
RURAL
El virus del rizado de la hoja del tomate de Nueva Delhi
Tomato leaf curl New Delhi virus (ToLCNDV)
• ¿Qué es ToLCNDV?
• Huéspedes encontrados en el laboratorio
… Y en el campo
• Aislados de ToLCNDV
• Eficiencia de transmisión
• La transmisión entre diferentes cultivos
......VERANO del 2013
Durante el verano del 2013 se detectó ToLCNDV en cultivos de
zucchini en Almeria y Murcia, España.
Síntomas de ToLCNDV en calabacín…
Juárez, Tovar, Fiallo-Olivé, Aranda, Gosálvez,
Castillo, Moriones & Navas, Plant Disease,
http://dx.doi.org/10.1094/PDIS-10-13-1050-PDN
Plantas de calabacin con infección natural
mostrando
mosaico
amarillo
y
deformación en hojas jovenes.
Sintomas de ToLCNDV en frutos de calabacín
Rizado de la piel
Deformación
Rajado
Tomato leaf curl New Delhi virus
Familia Geminiviridae
•Topocuvirus
•Curtovirus
•Mastrevirus
•Begomovirus
Solanaceae: tomate,
pimiento, y patata
Cucurbitaceae: pepino,
melón, sandía,
calabaza, calabacín,
Luffa, Lagenaria
Tomato leaf curl New Delhi virus
Organización
genómica
DNA-A:
-Rep (replication-associated protein)
- Ren ( replication enhancer protein)
- TrAP (transactivator protein)
- CP (coat protein)
DNA-B:
-NSP (nuclear shuttle protein)
- MP (movement protein)
CR (common region)
Contains motifs required for the control of gene expression and initiation of replication
Ciclos de cultivo en Almería
plantación (verde); veget. (amarillo), produc. (rojo)
Ene
Tomate
(aire
libre)
Tomate
(Invernad
ero)
Pimiento
Berenjena
Pepino
Sandía
Melón
Calabacín
Feb
Mar
Apr
May
Jun
Jul
Ago
Sep
Oct
Nov
Dic
Susceptibilidad de distintas especies
hortícolas en condiciones controladas
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Pepino cv. Cumlaude RZ (Rijk Zwaan)
Berenjena cv. Cristal (Fito)
Tomate cv.Tintoretto F1 (Ramiro Arnedo)
Melón cv. Vedrantais
Calabacín cv.Victoria (Clause)
Sandía cv. Sweet marvel (Syngenta)
Pimiento Capsicum annuum cv. mallorquín,
Capsicum chinense PI 152225
Judía cv. Donna (Nunhems)
INOCULACIONES CON B. tabaci
en cajas insectario
Calabacín
Melón
Berenjena
Tomate
Pimiento
+ 9 días dpi
Síntomas en CUCURBITÁCEAS
Calabacín
Pepino
Melón
Sandía
Síntomas en CUCURBITÁCEAS
Calabacín
Melón
Calabacín
Sandía
Síntomas en SOLANÁCEAS
Pimiento
Berenjena
Síntomas en SOLANÁCEAS
tomate
Detección de ToLCNDV
-En planta
PCR
Sana
Ca
To
C+
C-
-En B. tabaci
Sana
Ca
To
C+
C-
DETECCIÓN de ÁCIDO NUCLEICOS DEL VIRUS
HYBRIDACIÓN MOLCULAR CON SONDAS GENÉTICAS
TYLCV
ToLCNDV
• Sondas DIG homologas a parte del
gen cp de DNA-A y nsp de DNA-B
para ToLCNDV
• Sondas DIG homologas a parte del
gen cp de TYLCV.
ToLCNDV EN CALABACÍN
DNA -A
DNA B
C+ C-
C+ C-
ToLCNDV EN TOMATE
DNA -A
DNA -B
C+ C-
C+ C-
C-
DETECCIÓN de ÁCIDO NUCLEICOS DEL VIRUS
PCR a TIEMPO REAL (qPCR)
•Cebadores específicos para el
gen cp (DNA-A) y mp (DNA-B).
•Sondas Taq-Man específicos
para DNA-A y DNA-B.
ToLCNDV en distintas especies hortícolas
en condiciones naturales
pepino
melón
ToLCNDV en distintas especies hortícolas
en condiciones naturales
pepino
melón
ToLCNDV en distintas especies hortícolas
en condiciones naturales
pepino
melón
......OTOÑO 2013
TYLCV
Síntomas en especies espontáneas
Chenopodium album
- Cenizo -
Síntomas en especies espontáneas
Sonchus oleraceus
- Cerraja -
Aislados de ToLCNDV
Aislados de ToLCNDV
La eficiencia transmisión de ToLCNDV
por mosca blanca
Eficiencia de Transmisión
en tomate
INOCULACIÓN 48 H
Eficiencia de Transmisión
en calabacín
INOCULACIÓN 48 H
Eficiencia de Transmisión
+9 días dpi
Eficiencia de Transmisión
% de plantas infectadas
Nº de moscas blancas
calabacin
tomate
1
2
5
20
96
100
100
100
0
0
15
30
Resultados anteriores con ToLCNDV: 90%
Sohrab et al., 2013, DOI: 10.5897/AJB2013.12012
Resultados con TYLCV y B. tabaci : 40-50 %
Ensayos de transmisión con
B. tabaci entre diferentes especies
C-
A
B
C
D
C+
750bp
600bp
A) TRANSMISIÓN de CALABACÍN a CALABACÍN
B) TRANSMISIÓN de CALABACÍN a TOMATO
C) TRANSMISIÓN de TOMATE a CALABACÍN
D) TRANSMISIÓN de TOMATE a TOMATE
A) TRANSMISIÓN DE CALABACÍN A CALABACÍN
B) TRANSMISIÓN DE CALABACÍN A TOMATE
C) TRANSMISIÓN DE TOMATE A CALABACÍN
D) TRANSMISIÓN DE TOMATE A TOMATE
RESULTADOS
ORIGEN
TRANSMISIONES con B. tabaci
PRIMEROS
DESTINO
ANÁLISIS
SINTOMAS
Calabacín
Calabacín
9 dpi
PCR+/qPCR +
Calabacín
Tomate
Tomate
Calabacín
10-15 dpi
8 dpi
PCR+/qPCR +
Tomate
Tomate
13 dpi
PCR+/qPCR +
PCR+/qPCR +
Ruiz, Simon, Velasco, García & Janssen. Plant Disease,
http://dx.doi.org/10.1094/PDIS-10-14-1072-PDN
Conclusiones
- Diferentes aislados de ToLCNDV son molecularmente similares entre
si y se diferencian de aislados de otros países y cultivos.
-En condiciones controladas, la mosca blanca B. tabaci es capaz de
infectar miembros de especies de los principales cultivos en
invernadero, salvo la judía.
- La eficiencia de transmisión de ToLCNDV por B. tabaci es mas elevada
en calabacín que en tomate.
- Mientras que infecciones naturales en calabacín suelen producir
sintomas evidentes, en otros cultivos, como tomate, pueden ser mas
discretas. Sin embargo, este último no debe ser subestimado como
fuente de nuevas infecciones.
Gracias por su atención
Leticia Ruíz
Almudena Simón
Antonia Belmonte
Carmen García
Leonardo Velasco
Centro La Mojonera
Camino de San Nicolás 1
04745 La Mojonera
[email protected]
- Proyecto IFAPA: AVA201301.8 "virus en horticultura“
- INIA E-RTA2013-00020-C04: Epidemiologia y Control de Tomato leaf curl New Delhi virus.
Instituto de Investigación y Formación Agraria y Pesquera
CONSEJERÍA DE AGRICULTURA, PESCA Y DESARROLLO RURAL