Download informe reunion panama - Virored-Cyted

MEMORIA DEL TALLER TEÓRICO PRÁCTICO VIRORED 2016
El Taller Teórico Práctico Virored 2016 ha tenido lugar en el Instituto Conmemorativo
Gorgas de Estudios de la Salud (ICGES), en Ciudad de Panamá, de 25 a 27 de abril.
En esta ocasión se ha pretendido que el tema principal de la reunión versara sobre la
puesta al día del conocimiento de la situación de los virus trasmitidos por vector artrópodo, con
especial foco en el virus Zika, dada la situación epidémica actual en las Américas. Además, se
realizó una sesión corta sobre virus respiratorios emergentes.
La reunión fue abierta con unas palabras de bienvenida del Dr Pascales, en
representación de ICGES, que fueron seguidas de una intervención del Dr José Cardier, vicegestor del Área de Salud de Cyted, quien puso de manifiesto el interés estratégico de Virored
para Cyted.
Durante los tres días tuvieron lugar presentaciones sobre la situación general de las
arbovirosis en América (Dra Marta Contigiani, Universidad de Córdoba, Argentina),
presentaciones de contenido clínico, sobre diagnóstico clínico diferencial de las infecciones por
dengue, chikungunya y Zika (Dra Ana Belén Arauz, Hospital Santo Tomás, Panamá), sobre las
complicaciones producidas por el virus Zika debidas a infección en el embarazo y los cuadros
neurológicos (Dr Xavier Saenz-Llorens, Hospital del Niño, Panamá). Se revisó la situación actual
del virus Zika en Brasil (Dra Ana Bispo, Fiocruz, Brasil) y en el resto de países de la red, tanto
americanos como europeos.
Se actualizaron aspectos del diagnóstico de laboratorio de virus Zika (Dra Maria Joao
Alves, Portugal), y los métodos diagnósticos de alfavirus (Dra Sandra Goñi, Universidad de
Quilmes, Argentina), comparando la detección directa por PCR con las aproximaciones
serológicas.
En la sesión sobre virus respiratorios emergentes (CoV-Mers, Gripe, respiratorio
sincitial) (Dra Elsa Baumeister, ANLIS, Argentina, Dra Inmaculada Casas, ISCIII, España y Dr Juan
Arbiza, Universidad de Montevideo), se puso en común la experiencia de España y Argentina
sobre las actuaciones realizadas para la atención de posibles casos importados de CoV-MERS y
por otra parte se puso de manifiesto la dificultad del aislamiento de los virus de influenza A (H3)
estacionales.
La reunión pretendió tener un componente práctico, que se plasmó en la realización de
tres demostraciones prácticas, una sobre PCR en tiempo real específica para virus Zika, dengue
y chikungunya, en el que se compararon los métodos de la compañía Altona y los del CDC,
ampliamente utilizados por los laboratorios de la red; otra sobre PCR en tiempo real diferencial
de chikungunya y Mayaro desarrollada en colaboración por diferentes laboratorios de la Red
(ISCIII-UNQ), que tenía por objetivo su validación, y una tercera sobre Serología, en la que se
puso en evidencia la dificultad de realizar diagnóstico diferencial entre los virus Zika y dengue.
Los métodos de qPCR comparados mostraron resultados similares en cuento a la detección de
los virus dengue y Zika; sin embargo, se obtuvieron resultados discrepantes con el virus
chikungunya que necesitan ser confirmados. El método múltiplex de detección diferencial
chikungunya-Mayaro mostró buenos resultados comparativos, aunque no pudo ser validado
completamente al no disponer material genético de todas las muestras clínicas, sobre todo de
Mayaro. La realización de estas actividades prácticas fue posible gracias a la contribución de las
empresas Altona y EuroImmun y, sobre todo, a la colaboración en su realización de Dimelza
Arauz y de María Chen (ICGES).
Otro objetivo de la reunión fue poner en común la disponibilidad de metodologías
diagnósticas en los laboratorios de la red, con el fin de identificar posibles colaboraciones. En
este contexto se identificaron las siguientes: 1. Evaluación de ensayos para diagnóstico
serológico de dengue desarrollados en Perú (Dra Paquita García [Centro Nacional de Salud
Pública - Instituto Nacional de Salud, Perú] y laboratorios de la red); 2. Puesta a punto de ensayos
para la caracterización de avidez de IgG frente a Zika (Dra Maria Joao Alves y Dr Fernando de
Ory, ISCIII); 3. Caracterización molecular de virus RSV (Dr Juan Arbiza, y otros países, que se
contactarán en el futuro inmediato); y 4. Posibilidad de transferencia de la PCR múltiple MAYVCHKV para los laboratorios interesados.
Igualmente se discutió la actividad de la red y las perspectivas de futuro. En lo que se
refiere al primer aspecto se hizo una revisión de los controles de calidad distribuidos por Virored
en los dos últimos años (Dra Anabel Negredo, ISCIII). Los controles de calidad fueron valorados
como de gran utilidad para cumplir los objetivos de la red. Además, se discutió acerca de las
pasantías realizadas en los dos últimos años, como herramientas que permiten la formación de
personal investigador y la incorporación de tecnología a los laboratorios de Virored, poniéndose
de manifiesto su gran utilidad para el cumplimiento de los objetivos de la red.
En cuanto a las perspectivas de futuro, se identificó la necesidad de distribuir un control
de calidad para la detección por PCR del virus Zika, objetivo que se plantea para el presente año,
desde el ISCIII, considerándose de gran interés la realización de pasantías futuras, siempre en
función de la disponibilidad económica.
El informe del coordinador científico (Dr Fernando de Ory) versó sobre la actividad
desarrollada desde verano de 2014, en lo referido a transferencia de tecnología, asesorías
efectuadas, controles de calidad distribuidos, estancias realizadas y reuniones que han tenido
lugar.
Entre 2014 y 2015 se han concedido 13 pasantías, siendo un aspecto importante que
todos los países solicitantes con instituciones adheridas a la red han sido beneficiarios de
estancias. Un aspecto de gran interés es que las convocatorias se han adaptado a las necesidades
que se han ido detectando en el ámbito de la red (ébola y chikungunya en 2014, Zika en 2015).
Un último aspecto no menos importante se deriva de las colaboraciones que se abren entre el
laboratorio receptor del pasante y el del beneficiario de la pasantía. Se hace hincapié en que en
los productos de estas colaboraciones (publicaciones y otros) se refleje el reconocimiento a
Virored.
Igualmente, en los dos últimos años, se han celebrado dos reuniones de la red. La
primera en Montevideo: “Simposio Virored 2014: Virus Emergentes en IberoAmérica y
amenazas globales”, a la que asistieron 35 participantes, de 19 instituciones, de 14 países, y la
actual, en la que han asistido 37 participantes, de 19 instituciones (más dos no adheridas), de
15 países (más uno no adherido), incluyendo representación de OPS, Cyted y la compañía
Altona.
Se puso de manifiesto la cofinanciación de ambas actividades (pasantías y reuniones).
En este sentido se agradeció especialmente la generosa financiación aportada tanto por la DICyT
y FCIEN, para la reunión de Uruguay, y la de ICGES para la presente en Panamá.
Durante los dos últimos años se ha producido la adhesión de Nicaragua (Universidad
Nacional Autónoma) (noviembre de 2014), del Departamento de Laboratorios de Salud Pública
de Uruguay (abril 2016), estando en trámite la adhesión del Instituto Medicina Tropical,
Universidad Central de Venezuela.
Se presentó la iniciativa para solicitar financiación para un consorcio de investigación
sobre Zika, en el contexto del programa-marco Horizonte 2020 de la Unión Europea, para la que
se ha solicitado la participación de los laboratorios de Virored. La propuesta está liderada por el
Centro de Investigación Cooperativa en Biociencias (Bilbao, España), coordinada por Dr. Nicola
G. Abrescia. Desde la coordinación de la propuesta se decidió que la presentación debería ser
realizada de forma muy preliminar, sin entrar en excesivos detalles. Dadas las características de
nuestra red se entendió que la participación de Virored debe depender del Instituto de Salud
Carlos III, siendo la Dra. Mari Paz Sánchez-Seco quien, en función de su condición de
Coordinadora de Arbovirus de Virored, actúe en representación. Se discutió sobre la forma de
participación de los laboratorios, que en el estado actual de la propuesta tiene que ser
necesariamente a través de Virored. Aunque en el estado inicial de la propuesta no se contempla
que los laboratorios participen como partners, puesto que el número actual se considera
proporcionado a la propuesta, no se excluye que en sucesivos años pueda ser. La aportación que
se espera de Virored es la obtención de muestras de casos humanos con información clínicoepidemiológica de calidad, y de mosquitos. El consorcio proporcionará la financiación para la
realización de los estudios en cada país que aporte estas muestras. En lo que se refiere a la
posibilidad de financiación global para Virored, en el estado actual solo se contempla, la posible
financiación de expertos para participar en las reuniones de nuestra red que puedan tener lugar.
La reunión terminó manifestando todos los participantes el agradecimiento al ICGES, en las
personas de las Dras Sandra L. López-Vergés y Brechla Moreno, por la excelente organización
del evento.
Anexo I. Agenda
Taller Teórico Práctico Virored
INSTITUTO CONMEMORATIVO
GORGAS DE ESTUDIOS DE LA SALUD
Panamá 25-27 de abril
25 DE ABRIL
8:00-8:30
8:30-9:00
9:00-9:30
9:30-10:00
10:00-10:30
10:30-10:45
10:45-11:15
11:15-11:45
11:45-12:45
12:45-13:45
13:45-14:15
14:15-15:30
15:30-16:30
Acreditación
Bienvenida.
Dirección del ICGES
Programa Cyted: importancia de Virored.
José Cardier
Situación general de las arbovirosis en las Américas.
Marta Contigiani
Diagnóstico clínico de las infecciones por dengue, chikungunya y zika.
Ana Belén Arauz
Complicaciones por virus Zika: embarazo y cuadros neurológicos.
Xavier Saez-Llorens
Café
Diagnóstico de laboratorio de infecciones por virus Zika.
Maria Joao Alves
Altona Diagnostics
Hans Kuhn
Diagnóstico de CHIK / DENV / ZIKV
Volkan Duvan
PRACTICA 1.
PCR en tiempo real específica para virus Zika, Dengue y Chikungunya.
Dimelza Arauz/María Chen/Anabel Negredo
Comida/Reunión Comité Científico
Actualización y situación actual del virus Zika en las Américas.
Ana María Bispo
El virus Zika en los países de la red: situación. Disponibilidad y necesidades
diagnósticas. DISCUSION ABIERTA.
Moderadoras: Ana Bispo/Maria Joao Alves
PRACTICA 1 (continuación).
PCR en tiempo real específica para virus Zika, Dengue y Chikungunya.
Lectura e interpretación de resultados.
Dimelza Arauz/María Chen/Anabel Negredo
26 DE ABRIL
8:30-9:00
Evaluación de controles de calidad, 2014-15.
Anabel Negredo
9:00-9:15
1.Situación del diagnóstico de CoV-MERS en Europa. Reactivos y técnicas de
WHO-ECDC.
Inmaculada Casas
2. Situación del diagnóstico de CoV-MERS en Iberoamérica. Reactivos y
técnicas CDC.
Elsa Baumeister
3. Situación de Influenza: caracterización de Gripe A (H3).
Elsa Baumeister/Inmaculada Casas
4. Situación de RSV para su adecuación a la vigilancia global: Acciones
conjuntas a desarrollar.
Juan Arbiza
5. Discusión general: ECDC vs CDC carencias de los laboratorios e
implementación: CoV MERS; Acciones a desarrollar: valoración del interés
de los laboratorios; Planificación de dichas acciones en función del interés:
Realización de acciones: ¿Quién? ¿Dónde? ¿Cómo? ¿Cuándo?
Elsa Baumeister /Inmaculada Casas/Juan Arbiza
Café
SESIÓN DE VIRUS RESPIRATORIOS
9:15-9:30
9:30-9:45
9:45-10:00
10:00-10:30
10:30-10:45
10:45-11:15
11:15-12:15
12:15-12:45
12:45-13:45
13:45-16:30
Métodos diagnósticos Alfavirus. PCR vs serología.
Sandra Goñi
PRACTICA 2. PCR en tiempo real diferencial de Chikungunya y Mayaro.
Sandra Goñi/Anabel Negredo
Pasantías de Virored. DISCUSION ABIERTA
Moderador: Fernando de Ory
Comida/Reunión Comité Ejecutivo
PRACTICA 3. SEROLOGIA. Inmunofluorescencia para virus Zika, Euroimmnun
Maria Joao Alves/Fernando de Ory
PRACTICA 2 (continuación). PCR en tiempo real diferencial de Chikungunya
y Mayaro: lectura e interpretación de resultados.
Sandra Goñi/Anabel Negredo
27 DE ABRIL
8:30-9:30
9:30-10:30
10:30-10:45
10:45-11:15
11:15-11:45
11:45-12:45
12:45-14:00
Evaluación y discusión de las clases prácticas
Necesidades de laboratorios de la red. DISCUSION ABIERTA
Moderador: Fernando de Ory
Café
Informe del Coordinador Científico
Fernando de Ory
Perspectivas de futuro y Evaluación de la Red. DISCUSION ABIERTA
Moderador: Fernando de Ory
Conclusiones y Clausura
Comida
Ponentes:
José Cardier (Programa Iberoamericano Cyted, Ciencia y Tecnología para el desarrollo)
Marta Contigiani (Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella, Universidad Nacional de
Córdoba, Argentina)
Ana Belén Araúz (Hospital Santo Tomás, Panamá)
Xavier Sáez Llorens (Hospital del Niño, Panamá)
Maria Joao Alves (Instituto Nacional de Saúde Dr Ricardo Jorge, Portugal)
Hans Kuhn (altona Diagnostics GmbH, Alemania)
Volkan Duvan (altona Diagnostics GmbH, Alemania)
Ana María Bispo (Laboratorio de Flavivirus, IOC/Fiocruz, Brasil)
Anabel Negredo (Centro Nacional de Microbiología, ISCIII, España)
Inmaculada Casas (Centro Nacional de Microbiología, ISCIII, España)
Elsa Baumeister (INEI, ANLIS Dr. Carlos G. Malbrán, Argentina)
Juan Arbiza (Facultad de Ciencias, Universidad de la República, Uruguay)
Sandra Goñi (Universidad Nacional de Quilmes, Argentina)
Fernando de Ory (Centro Nacional de Microbiología, ISCIII, España)
Organización:
Instituto Conmemorativo Gorgas de Estudios de la Salud (ICGES)
Sandra Laurence Lopez-Verges, Brechla Moreno
Instituto de Salud Carlos III
Ana Vázquez, Fernando de Ory
Prácticas:
Dimelza Arauz (ICGES)
María Chen (ICGES)
Anabel Negredo
Sandra Goñi
María Joao Alves
Fernando de Ory
Patrocinadores
Organización
Anexo II. Participantes
Nombre
correo
Elsa Baumeister
[email protected]
Sandra Goñi
[email protected]
Marta Contigiani
[email protected]
Gerhaldine Morazan
[email protected]
Rosario Rivera
[email protected]
[email protected]
Ana Bispo
Rita Nogueira
[email protected]
Elizabeth Saenz Bolaños
[email protected]
Eduardo Jurado
[email protected]
[email protected]
Inmaculada Casas
Ana Isabel Negredo
[email protected]
Fernando De Ory Manchon
[email protected]
Leticia del Carmen Castillo
[email protected]
[email protected]
Alma Nuñez León
Marlene Muñoz Gaitan
[email protected]
José Gonzalez
[email protected]
[email protected]
Xania León
María Chen
[email protected]
Dimelza Araúz
[email protected]
Daniel Castillo
[email protected]
[email protected]
Sandra López
Alcibiades Guerra
[email protected]
Shirley Villalba
[email protected]
Alejandra Rojas
[email protected]
[email protected]
Dana Figueroa R
María Paquita García Mendoza [email protected]
Maria João Alves
[email protected]
María Noelia Morel
[email protected]
Adriana Delfraro
[email protected]
Juan Arbiza
[email protected]
Nahir Martínez**
[email protected]
Daría E. Camacho
[email protected]
Jesús D. Reyes
[email protected]
José Cardier
[email protected]
Hans Kuhn
[email protected]
Volkan Duvan
[email protected]
Leticia Franco
[email protected]
*país no adherido; **de institución no adherida
País
Argentina
Argentina
Argentina
Belice*
Bolivia
Brasil
Brasil
Costa Rica
Ecuador
España
España
España
Guatemala
Mexico
Nicaragua
Panamá
Panamá
Panamá
Panamá
Panamá
Panamá
Panamá
Paraguay
Paraguay
Perú
Perú
Portugal
Uruguay
Uruguay
Uruguay
Venezuela
Venezuela
Venezuela
Cyted
Altona
Altona
OPS
Anexo III. Prácticas
Taller Teórico Práctico Virored
Panamá 25-27 de abril, 2016
Guion para la Práctica 1. PCR en tiempo real específica para virus Zika, dengue y
chikungunya (Altona Kits)
OBJETIVO
Realizar una PCR en tiempo real comparativa para los virus Zika, dengue y chikungunya con el
protocolo establecido por el CDC y los kits comerciales de Altona. Valoración de la sensibilidad
de cada técnica con muestras clínicas.
MATERIAL
Muestras
Se emplearán muestras caracterizadas de casos de infección por virus Zika, chikungunya y
dengue. El RNA de las diferentes muestras biológicas estará ya extraído previamente para su uso
directo en las diferentes técnicas.
Material
- Termociclador Tiempo Real 7500 Fast de Applied Biosystem
- RealStar® Zika Virus RT-PCR Kit (Altona)
- RealStar® Dengue Virus RT-PCR Kit (Altona)
- RealStar® Chikungunya Virus RT-PCR Kit (Altona)
PROCEDIMIENTO
1. REAL TIME RT-PCR CHIKV (ALTONA) Ref: 012013
Una vez obtenido el RNA se añaden 10 µl del mismo a la placa de 96 pocillos que
contienen una mezcla de reacción (premix) con 21 µl de:
MÁSTER MIX
Master A
Master B
CI (tapón verde)
Muestras:
C- (Agua)
C+ (tapón rojo)
X1
5 µl
15 µl
1 µl
Xn
5 µl Xn
15 µl Xn
1 µl Xn
Detalles programación:
Fluorocromos: FAM (tapón rojo) para ZIKV, DENV y CHIK.
JOE (tapón verde) para CI
Volumen de reacción final: 30 µL
Ramp Rate: Default
Referencia Pasiva: ROX para ZIKV y CHKV / en Dengue: NINGUNA
La reacción se inicia con la retrotranscripción (20 min a 55ºC), seguido de una
desnaturalización a 95ºC durante 2min, posteriormente ocurre una amplificación con
45 ciclos de 15 seg a 95ºC y 45 seg a 55ºC (medida de fluorescencia) y 72ºC durante 15
seg.
Taller Teórico Práctico Virored 2016
Panamá 25-27 de abril, 2016
Guion para la Práctica 1. Mayaro-Chikungunya
OBJETIVO
Realizar un ensayo de PCR en tiempo real para la detección múltiple y diagnóstico diferencial
con virus Mayaro (MAYV) y chikungunya (CHIKV).
MATERIAL
Muestras
Se emplearán muestras problema de posibles casos de infección por los virus Mayaro y
chikungunya. Las muestras ya han sido extraídas y se les ha hecho una retrotranscripción para
pasarlas a cDNA, que es el tipo de muestra que necesita este ensayo.
Emplearemos una Master Mix de Qiagen optimizada para el uso en Múltiplex-PCR, para más de
dos sondas. Para ello, 8 muestras problema se analizarán en una qRT-PCR específica para los
virus MAYV y CHIKV, dando lugar a la identificación independiente de cualquiera de los dos
agentes que esté involucrado en la infección.
Material
- Termociclador Tiempo Real 7500 Fast de Applied Biosystem
- QuantiTect Multiplex PCR Kit (Qiagen)
PROCEDIMIENTO
Se ensayará la técnica de qRT-PCR sobre el ADNc sintetizado previamente. Una vez obtenido el
ADNc se añaden 5 µl del mismo a la placa de 96 pocillos que contienen una mezcla con 20 µl de
la siguiente reacción (premix):
X1
Premix
QP RT MM 2X
Alfa RT_S 100 uM
Alfa RT_AS 100 uM
Sonda MAYV 10 uM
Sonda CHKV 10 uM
Sonda CI 10 uM
CI (2000 copias)
Agua
Total (sin molde)
12,5 µl
0,3 µl
0,2 µl
0,75 µl
0,5 µl
0,5 µl
1 µl
4,25 µl
20 µl
Muestras:
C- (Agua)
C+ CHKV 103 copias/µl
C+ MAYV 103 copias/µl
Detalles programación:
Fluorocromos: FAM para CHIK
JOE para MAYV
y NED para CI
Volumen de reacción final: 25 µL
Ramp Rate: Default
Referencia Pasiva: ROX
xn
La reacción se inicia con una desnaturalización inicial y activación de la polimerasa de 15 min a
95ºC, seguido de 40 ciclos de 15 seg a 95ºC y 1 min a 60ºC (medida de fluorescencia).
Taller Teórico Práctico Virored 2016
Panamá 25-27 de abril, 2016
Guion para la Práctica 3. Serología
OBJETIVO
Realizar un ensayo para detectar anticuerpos IgG e IgM frente a virus Zika, para el diagnóstico
diferencial con virus Chikungunya y valoración de reactividad cruzada con virus dengue.
MATERIAL
Muestras
Se emplearán muestras caracterizadas de casos de infección por virus Zika, Chikungunya y
dengue. Las muestras estarán preparadas para su uso directo (el pretratamiento no se realizará
durante la práctica)
Material
- IIFT Arboviral Fever Mosaic 2 (IgG or IgM), Euroimmun
- Absorbente de IgG (suero anti-IgG humana), Euroimmun
PROCEDIMIENTO
Los portas, los reactivos y las muestras a ensayar deben estar a temperatura ambiente
Preparación del ensayo
Preparación de solución de lavado: un sobre se disuelve en 1 L de agua destilada y se mezcla con
2 mL de Tween 20
Pretratamiento de muestras
2. Ensayo de IgM
Se tratan las muestras para eliminar IgG (para eliminar interferencias debidas a la presencia
simultánea de IgG y factor/es reumatoide/s).
- 10 µL de muestra + 40 µL de diluyente de muestra + 50 µL de absorbente de IgG.
- Agitación en vórtex
- Incubación 15 min a temperatura ambiente
- Centrifugación a 4000 rpm, 5 min
- Se emplea el sobrenadante, que es una dilución 1:10.
3. Ensayo de IgG
- Se diluyen las muestras: 10 µL de muestra + 90 µL de diluyente de muestra
- Se realizan diluciones en base 10, para obtener las que se van a ensayar
Las muestras y diluciones a ensayar durante la práctica están prediluidas y pretratadas
Realización del ensayo
- Se dispensan las diluciones (30 µL/pocillo) de acuerdo con el siguiente esquema:
1
2
3
4
5
-
#1, 1/10
#1, 1/100
#1, 1/1000
#1, 1/10000
#1, 1/10
6
7
8
9
10
#2, 1/10
#2, 1/100
#2, 1/1000
#2, 1/10000
#2, 1/10
Se incuba 30 min a temperatura ambiente, en cámara húmeda
Se lava con solución de lavado, un lavado rápido y otro de 5 min
Se escurren los portas, sin secar
Se dispensan el conjugado anti-IgG o anti-IgM, en los pocillos correspondientes
Se incuba como antes
-
Se lava como antes
Se escurren, se dejan secar y se montan los portas con glicerina tamponada
Se observa en microscopio de fluorescencia a 200 aumentos
LECTURA
Cada pocillo incorpora seis chips que incluyen células infectadas por los seis virus, de acuerdo
con el siguiente esquema:
1. Virus Zika
2. Virus Dengue 1
3. Virus Dengue 2
6. Virus Chikungunya
5. Virus Dengue 4
4. Virus Dengue 3
La detección de anticuerpos específicos frente a virus Zika se observa como presencia de
fluorescencia fina o gruesa de localización citoplásmica (figura, izquierda). Frente a los virus
dengue la fluorescencia es fina a gruesa, con cuerpos de inclusión (figura, derecha). En el caso
de virus Chikungunya la fluorescencia es homogénea, con mayor intensidad en la membrana
(figura, centro). En cualquier caso, la intensidad es variable, dependiendo de la concentración
de anticuerpos presentes en la muestra.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
-
La presencia de IgM específica frente a virus dengue o virus Zika indica infección
probable por estos virus.
- La presencia de IgG específica frente a virus dengue o virus Zika indica infección previa
por alguna de estos virus.
Para la caracterización definitiva de las respuestas serológicas frente a los flavivirus se
requiere la confirmación por técnica de neutralización.
- La presencia de IgM específica frente a virus Chikungunya indica infección reciente por
el virus (en ausencia de circulación de otros Alfavirus)
- La presencia de IgG específica frente a virus Chikungunya indica infección previa por el
virus