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Rendimiento
Montaje
• Se analizaron un total de 270 muestras NF (aspirado nasofaríngeo) obtenidas
mediante hisopo archivadas para la Influenza A, el subtipo de la Influenza
A H1N1 de 2009 y la influenza B mediante el ensayo Xpert® Flu y cultivos.
Se analizaron un total de 357 muestras archivadas de A/LN (aspirados/lavados
nasales) para la Influenza A, el subtipo de la Influenza A H1N1 de 2009
y la Influenza B mediante el ensayo Xpert® Flu y ProFlu+ (DFA). Todas
las muestras positivas para Influenza A identificadas mediante cultivo viral
o el ensayo ProFlu+ se secuenciaron para diferenciar el subtipo de la Influenza
A H1N1 de 2009 de otros subtipos de Influenza A.
El montaje de la prueba se realiza todos los días de la semana las 24 horas
del día.
Resultados
Los resultados de la prueba son emitidos ocho horas máximo, después de
tomada la muestra.
• Con las muestras NF mediante hisopo, el ensayo Xpert® Flu demostró
una sensibilidad y especificidad para la detección de la Influenza A de 97,5%
y 100%, respectivamente, en relación a un cultivo viral más DFA, con
confirmación de secuencias de todas las cepas positivas de la Influenza A.
• La sensibilidad y especificidad del ensayo Xpert® Flu para el subtipo
de Influenza A H1N1 de 2009 a partir de muestras NF mediante hisopo
fueron ambas de un 100%.
• La sensibilidad y especificidad del ensayo Xpert Flu para la Influenza B
a partir de muestras NF mediante hisopo fueron de un 93,8% y un 99,6%,
respectivamente.
®
Ensayo
Xpert® Flu
Rendimiento del ensayo Xpert® Flu frente al método de referencia con muestras NF
mediante hisopo: N1H1 de 2009.
Cultivo viral + DFA / secuenciación
Pos.
Neg.
Total
Pos.
85
0
85
Neg.
0
182
182
Total
85
182
267
Sensibilidad:
Especificidad:
Exactitud:
PPV:
NPV:
100% (95% IC: 95,6 - 100)
100% (95% IC: 98,0 - 100)
100% (95% IC: 98,6 - 100)
100% (95% IC: 95,6 - 100)
100% (95% IC: 98,0 - 100)
Ensayo
Xpert® Flu
Rendimiento del panel A de Xpert® Flu frente al método de referencia con muestras
de A/LN: H1N1 de 2009.
Pos.
Neg.
Total
ProFlu + / secuenciación
Pos.
Neg.
94
0
2
261
96
261
Sensibilidad:
Especificidad:
Exactitud:
PPV:
NPV:
Total
94
263
357
97,9% (95% IC: 92,7-99,8)
100% (95% IC: 98,6-100)
99,4% (95% IC: 98-99,9)
100% (95% IC: 96,1-100)
99,2% (95% IC: 98,6-100)
Referencias
1. Petric M, Comanor L, Petti CA. Role of the laboratory in diagnosis of
influenza during seasonal epidemics and potential pandemics. J Infect Dis.
2006;194:S98-110.
2. Schweiger B, Zadow I, Heckler R, et al. Application of a fluorogenic PCR
assay for typing and subtyping of influenza viruses in respiratory samples.
J Clin Micro. 2000;38:1552-1558.
3. http://www.cdc.gov Acceso el 22 de febrero de 2010.
4. Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades. Biosafety in
Microbiological and Biomedical laboratories. Richmond JY y McKinney RW
(eds) (1993). Número de publicación del HHS (Departamento de Salud y
Servicios Humanos de EE.UU.) (CDC) 93-8395.
5. Interim Biosafety Guidance for All Individuals Handling Clinical Specimens
or Isolates Containing 2009-H1N1 Influenza A Virus (Novel H1N1), including
Vaccine Strains, 15 de agosto de 2009;
http://www.cdc.gov/h1n1flu/guidelines_labworkers.htm
6. Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (anteriormente denominado
Comité Nacional de Estándares Clínicos y de Laboratorio). Protection of
Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections; Approved
Guideline. Document M29
También pueden aparecer síntomas gastrointestinales
(náuseas, vómitos o diarrea), especialmente en los niños,
aunque no son tan comunes. Los síntomas suelen aparecer
en el plazo de dos días desde la exposición a un individuo
infectado. Es posible que la infección de la influenza
se complique hasta derivar en neumonía, provocando
una mayor morbilidad y mortalidad en niños, ancianos
y personas inmunodeprimidas.
Características
Los virus de la influenza se clasifican en tipos A, B y C, siendo los dos primeros
los que provocan un mayor número de infecciones en humanos. La Influenza
A es el tipo más habitual de virus de influenza en humanos y suele ser
responsable de las epidemias de gripe estacional, pudiendo llegar a causar
pandemias. Los virus de la Influenza A también pueden infectar a algunos
animales, como las aves, los cerdos y los caballos. Las infecciones provocadas
por los virus de la Influenza B suelen estar restringidas a los humanos y es
menos común que causen epidemias. Los virus de la Influenza A se dividen
en varios subtipos atendiendo a dos proteínas superficiales: la hemaglutinina
(H) y la neuraminidasa (N). La gripe estacional suele estar provocada por
combinaciones de los subtipos H1, H2, H3, N1 y N2. Además de los virus
de la gripe estacional que ya se encuentran en circulación, a principios
de 2009 se identificó una nueva cepa H1N1 en humanos.
Las ventajas
Es importante establecer programas
de vigilancia activa y tomar precauciones
para el control de infecciones a fin de prevenir
la transmisión de la influenza.
La influenza o gripe es una infección vírica
contagiosa del tracto respiratorio que suele
presentarse en invierno. La transmisión de la
influenza se produce principalmente por el aire,
es decir, mediante la tos o los estornudos.
Los síntomas más comunes son fiebre, escalofríos,
dolor de cabeza, malestar general, tos y congestión
nasal.
El uso de ensayos que proporcionan resultados rápidos para identificar
y diferenciar el agente infeccioso en pacientes infectados con la gripe
estacional y la gripe H1N1 de 2009, también constituyen un factor
importante a la hora de controlar de forma efectiva la influenza, elegir
el tratamiento adecuado y prevenir brotes generalizados.
Solución
El ensayo Cepheid Xpert® Flu es un ensayo de RT-PCR en tiempo real múltiple
automatizado, indicado para la detección y diferenciación cualitativas in vitro
de la Influenza A, la Influenza B y el ARN vírico de la Influenza H1N1 de 2009.
El ensayo Xpert® Flu está diseñado como ayuda para el diagnóstico de la
influenza.
Integrado:
• Este sistema combina la preparación de la muestra con amplificación
y detección de las secuencias de ácidos nucleicos blanco con reacción
en cadena de la polimerasa en tiempo real (TR-PCR).
• No se produce contaminación por arrastre en muestras negativas analizadas
después de muestras altamente positivas en el mismo módulo del equipo.
• Es un proceso completamente automatizado que reduce el tiempo
del montaje de la prueba.
• Provee resultados rápidos.
• Detecta la variedad H1N1 de 2009 de la Influenza A.
Beneficios de la prueba
• Los resultados del Xpert® Flu proporcionan oportunidad en las respuestas
de los exámenes generando seguridad a los pacientes y sus familias para
reducir la ansiedad.
• Los resultados rápidos implican que los pacientes infectados pueden
ser aislados y tratados eficientemente antes de que tengan oportunidad
de contaminar otras personas.
• La detección rápida del virus de la influenza ayuda no solamente como guía
en el tratamiento de los pacientes sino también en el control de la infección
y en actividades de prevención de salud pública.
Muestras
El ensayo Xpert® Flu utiliza muestras procedentes de aspirados o lavados
nasales y muestras de aspirados nasofaríngeos tomadas mediante hisopos,
los cuales son depositados en el medio de transporte universal (tubos de MTU
de 3 ml), a pacientes con signos y síntomas de infección respiratoria en
combinación con factores de riesgo clínicos y epidemiológicos.
Las muestras deben transportarse a una temperatura entre 2 y 8 °C,
y se pueden almacenar hasta 72 horas a esa misma
temperatura antes de procesarlas.