Download medios bacteriológicos

TIPOS DE MEDIOS,
MEDIOS BACTERIOLÓGICOS
Cuando se desea un medio sólido Los ejemplos de medios de cultivos que se han
apuntado su de composición química conocida (medios sintéticos o definidos
químicamente), los cuales, se han diseñado para el cultivo de tipos específicos de
bacterias conocidas. Se necesita un gran número de sustancias químicamente
puras para cultivar bacteria que tengan necesidades nutricionales como los
lactobacílos. Aunque para el cultivo de bacterias heterótrofas en laboratorio de
rutina, tanto si son similares a las especies de escherichia o de lactobacillus,
generalmente se basan en medios de cultivos sintéticos. En lugar de esto, se usan
ciertos materiales crudos como peptonas, extracto de carne y extracto de levadura
y así el medio de cultivo que se obtiene hace posible el desarrollo de gran
variedad de bacterias y otros microorganismos, se toma el agar como agente
solidificarte. En la tabla 6-7 se hace una descripción de estos materiales crudos.
Ejemplos de medios líquidos y sólidos relativamente simples que hacen simple el
desarrollo de muchas bacterias heterótrofas comunes, son el caldo nutritivo y el
agar nutritivo. Mediante la adicción de extracto de levadura a estos medios, se
mejora de manera importante la calidad nutritiva de los mismos, ya que el extracto
de levadura contiene varias de las vitaminas B y otras sustancias promotoras del
crecimiento.
MATERIAL CRUDO
CARACTERISTICAS
VALOR NUTRITIVO
Agar
Carbohidratos complejos
Extracto de carne
Extracto acuoso de carne Contiene
la
sustancia
magra de res concentrado soluble en agua de tejidos
en pasta.
animales.
entre
ellas
carbohidratos
Extracto de levadura
Solución
acuosa
de
levaduras
Peptona
Es le producto que resulta Fuente
de
la
digestión
materiales
Por
de
de nitrógeno orgánico, puede
proteínicos. contener
ejemplo:
principal
vitaminas
carne, algunas
caseína y gelatina.
y
veces
carbohidratos.
TIPOS DE MEDIOS
Aunque muchos de los heterótrofos se desarrollan bien en agar nutritivo o caldo
nutritivo, otros no crecen bien,, y otros más,
simplemente no se desarrollan.
Algunos heterótrofos tienen requerimientos nutricionales muy elaborados para
nutrientes específicos, por ejemplo: vitaminas y sustancias promotoras del
crecimiento. A estos organismos se les llama heterótrofos exigentes. Además,
se necesitan muchos medios de cultivos elaborados para propósitos especiales
que facilitan la identificación, aislamiento y cuantificación de ciertos tipos de
bacterias. Para conocer estas necesidades, el bacteriólogo cuenta con numerosos
medios de cultivo a los cuales, de acuerdo con su función o aplicación, se les
puede clasificar de la siguiente manera:
MEDIOS ENRIQUECIDOS: son medios en el que se le adiciona componentes
como sangre, suero o extracto de tejidos de animales y plantas al caldo nutritivo o
agar, les proporciona sustancias nutritivas complementarias para que el medio
pueda soportar el crecimiento de los heterótrofos exigentes.
MEDIOS SELECTIVOS: son medios en el que se le adiciona
agar nutritivo de
ciertas sustancias químicas específicas, no permitirá el desarrollo de un grupo de
bacterias, sin inhibir al mismo tiempo el crecimiento de otros grupos. Por ejemplo,
el cristal violeta en concentraciones específicas previene el crecimiento de
bacterias grampositivas sin afectar el desarrollo de variedades de gramnegativas.
De manera similar, un medio en el cual la única fuente de carbono sea la maltosa,
permite seleccionar las bacterias que puede asimilarla. En principio se puede
seleccionar las bacterias que sólo se desarrollen en presencia de compuestos
orgánicos pocos comunes agregando dichos compuestos al medio de cultivo y
omitiendo todos los demás compuestos de carbono.
MEDIOS DIFERENCIALES: son medios en el que se le adiciona
ciertos
reactivos o sustancias químicas a los medios de cultivo y trae como resultado
determinado tipo de crecimiento bacteriano o de cambios, lo cual permite al
observador diferenciar distintos tipos de bacterias. por ejemplo, si se siembra una
mezcla de bacterias en un medio agar sangre, algunas de las bacterias pueden
hermolizar (destruir) los glóbulos rojos, mientras que otros no lo hacen. Cuando
aparece una zona clara alrededor de la colonia bacteriana es indicativo de que
ocurre la hemólisis. Así es posible distinguir entre bacteria hermolíticas y no
hemolitícas que proliferan en el mismo medio.
MEDIOS DE PRUEBA: son medios para el ensayo de vitaminas, aminoácidos y
antibióticos, se utilizan medios de cultivos de composición conocida. Así mismo,
se recurre a medios de composición especial para probar desinfectantes.
MEDIOS PARA CUENTA DE BACTERIAS: son medios para determinar el
contenido bacteriano de sustancias tales como la leche y el agua, se emplean
ciertos tipos específicos de medios de cultivos. Se debe señalar su fórmula, así
como las especificaciones prescritas.
MEDIOS PARA CARACTERIZAR BACTERIAS: son medios para determinar el
tipo de crecimiento producido por los organismos, así como la capacidad de las
bacterias para producir cambios químicos, se utiliza de manera convencional una
amplia variedad de medios de cultivos.
MEDIOS DE MANTENIMIENTO: son medios para preservar las características
fisiológicas y la viabilidad de un cultivo, quizás se requiera de un medio diferente
de aquellos que son óptimos para el crecimiento. El crecimiento rápido y prolífico
suele ocasionar la muerte rápida de células. En relación con su estado físico se
puede establecer diferencias más amplías entre los medios. Se emplea
ocasionalmente. Medios sólidos tales como rebanadas de papas, para cultivos
especiales de bacterias. Medios sólidos - reversibles a líquidos se ejemplifican con
el agar nutritivo. Los medios semisólidos contienen pequeñas cantidades de agar
(0.5 % o menos), el cual le imparte una consistencia de natillas.
MEDIOS DE CULTIVO DE VIRUS
1. Supervivencia del virus en las heces y en la orina:
El virus es estable en las heces (y en la orina) a temperatura ambiente por al
menos 1 a 2 días. El virus es más estable (hasta 4 días) en las heces de pacientes
con diarrea (que tienen un pH más elevado que las heces normales).
2. Desinfectantes y fijadores (para su uso en laboratorios):
El virus pierde su capacidad de infectar después de su exposición a diferentes
fijadores y desinfectantes generalmente empleados.
3. Supervivencia del virus en el sobrenadante del cultivo de células:
Reducción mínima solamente en la concentración del virus después de 21 días a
4°C y a -80°C.
Reducción en la concentración del virus mediante un log sólo a temperatura
ambiente estable durante dos días. Esto podría indicar que el virus es más estable
que los coronavirus humanos conocidos en estas condiciones.
El calor a 56°C inactiva el coronavirus del SARS en alrededor de l0000 unidades
por l5 minutos (reducción rápida).
Lab*
Substrato
Conteo
inicial
viral
Estado
Tiempo de
Método de
supervivencia la prueba
de
viabilidad
Log 10PFU
GVU
QMH
Virus mezclado
en las heces del
niño
1.00E+03 PH 6-7
3 horas
Aislamiento
del virus en
cultivo de
células
Virus mezclado
en las heces
normales
7.50E+03 PH 8
6 horas
Aislamiento
del virus en
cultivo
celular
Virus en diarrea
7.50E+03 PH 9
4 días
Aislamiento
del virus en
cultivo
celular
Heces fecales
1.00E+03 Temperatura Al menos dos Aislamiento
ambiente
días
del virus en
cultivo
celular
Orina
1.00E+03 A
temperatura
ambiente
Al menos 24
horas
Medio de cultivo
del virus + 1% de
suero bovino
1.00E+03 Sobre
superficie
plástica a
temperatura
ambiente
Al menos dos Aislamiento
días
del virus en
cultivo
celular
Medio de cultivo
del virus + l% de
suero bovino
1.00E+04 30-37°C
Al menos l
hora
Aislamiento
del virus en
cultivo
celular
Medio de cultivo
del virus +1% de
suero de feto de
ternero
1.00E+04 56°C
Degradación
del título con
el tiempo
(10000
Aislamiento
del virus en
cultivo
celular
Aislamiento
del virus en
cultivo
celular
unidades
infecciosas
del virus en
15 min.
NIID
UniM
Virus en acetona, 1.00E+06 A
10% formaldehido
temperatura
y
ambiente
paraformaldehido,
10% de cloro,
75% de etanol, 2
% de fenol
5 min.
Aislamiento
del virus en
cultivo
celular
Cultivo del virus + 1.00E+06 Minus 80°C
2% del suero
bovino
Al menos 4
días
Aislamiento
del virus y
RT-PCR
Culltivo del virus 1.00E+06 4°C
+ 2% de suero de
feto de ternero
Al menos 4
días
Aislamiento
del virus y
RT-PCR
Cultivo del virus + 1.00E
2% de suero del
+06
feto del ternero
Menos de 4
días
Aislamiento
del virus y
RT-PCR
37°C
Cultivo del virus + 1.00E+05 56°C
2% de suero del
feto de ternero
Menos de 30
min.
Cultivo del virus
1.00E+06 4°C
Al menos 21
días
Aislamiento
del virus
Cultivo del virus
1.00E+06 Minus 80°C
Al menos 21
días
Aislamiento
del virus
La siembra viral es por corto tiempo y
los anticuerpos anti VHS están
presentes. Se consideran factores
precipitantes el estrés físico y
emocional, el contacto sexual, la
menstruación, exposición al calor, etc.
Al parecer existe una relación entre el
inicio de la menstruación y la
reactivación del virus. En el hombre
puede coincidir con el contacto sexual.
Complicaciones
Locales. Uretra y vejiga con retención
urinaria, infecciones cutáneas
bacterianas secundarias, más
frecuentes en la infección inicial.
Cuando se afecta el recto, produce
dolor severo; se observa en varones
homosexuales y con menos frecuencia
en mujeres que practican el coito anal.
Generales. Por lo regular son raras:
radiculomielitis inflamatoria de la región
lumbosacra, mielitis transversa y
meningitis aséptica. Se observa tanto la
respuesta humoral como la celular; los
anticuerpos aparecen
aproximadamente siete días después
de la infección primaria y alcanzan su
pico dos a tres semanas después. En
las recurrencias no hay aumento de los
anticuerpos. La duración de la
excreción vírica y los síntomas se
correlacionan con el índice de
transformación linfocítica.
Diagnóstico
En la mayoría de los casos el
diagnóstico es clínico, acorde a la
historia natural de la enfermedad. La
citología es un método útil, pero no en
todos los casos ya que en la tercera
parte de éstas, no se observan las
células gigantes multinucleadas. El
método de diagnóstico más confiable
es el cultivo del virus utilizando diversas
líneas celulares. Es conveniente
de lesión, sobre todo en pacientes que
tienen SIDA en donde puede suceder
que las lesiones se confundan con
otras patologías (Fig. 20).
Tratamiento
El antiviral de elección es el aciclovir
200 mg cada cuatro horas, cinco tomas
diarias durante cinco a diez días. En
pacientes con enfermedad grave o
complicaciones que ameriten
hospitalización, la dosis es de 5 mg/kg
vía endovenosa, cada ocho horas por
cinco a siete días.
La terapia supresora diaria reduce
hasta un 75% la frecuencia de las
recurrencias periódicas (más de seis al
año): 200 mg dos a cinco veces al día ó
400 mg dos veces al día. El tratamiento
supresor no elimina en su totalidad la
replicación viral.
En los casos graves en que se presenta
resistencia al aciclovir, se está
utilizando el foscarnet por vía
endovenosa. Actualmente se está
investigando la eficacia del valaciclovir
y el fanciclovir. La terapia tópica no
erradica al virus del organismo, debido
a que éste se refugia en los ganglios
nerviosos.
No existe ningún método de prevención
absoluto, por lo que los pacientes que
padecen la infección no deben tener
relaciones sexuales durante el tiempo
que presenten las lesiones y durante
siete días posterior a su desaparición,
ya que existe la posibilidad de que
continúen liberándose virus después de
la cicatrización; esto es más importante
en la mujer, en la que suele continuar el
desprendimiento del virus a partir del
cuello uterino; el condón disminuye el
riesgo, pero es posible la transmisión
del virus ya que puede haber contacto
de piel con piel.
El paciente debe recibir información
realizar estudio en campo obscuro de la
lesión y examen serológico de VDRL,
para descartar sífilis. Existen en el
mercado equipos para el diagnóstico
utilizando secreción tomada de la base
de la vesícula, que permite la
identificación del virus tipo I y II;
también puede utilizarse el método de
la reacción en cadena de la polimerasa
(el más moderno).
En ocasiones se puede hacer una
biopsia, si se tiene duda del tipo
acerca de la historia natural de la
enfermedad, debido que su
presentación genera trastornos
psicosociales. Además a través de las
lesiones, el paciente es propenso a
infectarse con VIH. También debe
informárseles acerca del riesgo de las
infecciones neonatales; es importante
que las mujeres embarazadas informen
al obstetra acerca de este riesgo.