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PREPARACIÓN DE PLACAS PARA CULTIVO DE BACTERIAS CON
LB -AGAR
1- Preparar dos botellas de LB de 500 ml y añadir a cada una 7.5 ml de Agar
bacteriológico americano.
2- Autoclavar poniendo cinta de autoclave y con cuidado de que los frascos no
queden cerrados del todo.
3- Dejar enfriar, hasta que el frasco se pueda mantener en la mano 10 segundos sin
tener que retirar la mano. Mientras se enfría, rotular las placas de bacterias con
A ó K (A:Ampicilina , K: Kanamicina) , por la parte de debajo de la placa, y
en un lado.
A PARTIR DE AHORA , TRABAJAR BAJO LLAMA
4- Añadir 500 μl de Antibiótico, por cada 500 ml de LB + agar preparado.
Generalmente nosotros preparamos placas con Ampicilina y Kanamicina, por
tanto . Añadimos a un frasco 500 μl de Ampicilina y al otro 500 μl de
Kanamicina .
5- Echar el agar con el antibiótico correspondiente a cada placa petri de 10 cm.
Con 500 ml de LB , tenemos para unas 20 placas. Si quedan burbujas , al echar
el LB agar, quitar con asa de siembra al rojo.
6- Cuando el LB agar , esté solidificado , secar la tapa del vapor con gasa estéril y
también bajo llama.
7- Se almacenan en la misma bolsa que las contenía las placas, precintadas , en
cámara fría y tapadas con una bolsa.