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& Se posee un plásmido replicativo en E. coli que se quiere introducir en Salmonella.
El mismo es movilizable pero la cepa de E. coli en la que se encuentra no posee las
funciones tra. a) Indique dos posible maneras de introducir el plásmido en Salmonella.
b) Si el episoma no fuera replicativo en la cepa aceptora, ¿cuál es la única posibilidad
de que el mismo se perpetúe en Salmonella? ¿Qué debería incluir el episoma?
& Los genes para la síntesis del aminoácido prolina en Yersinia pestis se encuentran
organizados en el genoma como se muestra en la siguiente figura.
B
A
C
D
E
Para determinar la organización transcripcional de este locus se dispone de mutantes
por inserción de un gen de resistencia a antibiótico que es “polar” sobre los genes río
abajo, es decir que posee un terminador de la transcripción en su extremo 3’. Sobre
cada mutante se miden las actividades enzimáticas de todos los genes del locus. Las
actividades se expresan como porcentajes de la actividad de la cepa parental o
silvestre, los datos son:
Mutante 1: 100% actividad de A, 0% actividad de B
50% actividad de C, D y E
Mutante 2: 0% actividad de A y B
50% actividad de C, D y E
Mutante 3: 100% actividad de A y B
0% actividad de C, D y E
Mutante 4: 100% actividad de A, B, C y D
0% actividad de E
Mutante 5: 100% actividad de A, B y C
0% actividad de D y E
a) Marque en la región genómica la posición de el/los promotor/es e indique que gen
se encuentra interrumpido en cada mutante.
Por otro lado se sabe que, debido a que es un operón anabólico, la síntesis del mismo
se induce en ausencia de prolina. Se posee una mutante en el gen regulatorio del
operón y la misma es auxótrofa para prolina. ¿Qué le indica este resultado?
& Se desea construir en la bacteria C, una mutante por inserción de un gen de
resistencia a kanamicina en el gen glgB. Se cuenta con una cepa mutante en glgB por
inserción con kanamicina en la bacteria A. El problema es que los fagos que infectan
la cepa A no infectan la cepa C. El laboratorio vecino trabaja en el mismo gen glgB y
posee la región genómica del mismo (que incluye a glgB) en un episoma con
resistencia a ampicilina, replicativo y conjugativo per se en la cepa B. El fago que
infecta la cepa A también infecta la B y el plásmido es suicida en la cepa C. ¿Que
debería hacer para construir la mutante en la cepa C?