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POSIBLE PARTICIPACIÓN DEL MITOKATP SOBRE LA FATIGA DE
MÚSCULO ESQUELETICO: EFECTO DEL NICORANDIL
Sánchez Duarte E1, Montoya Pérez R2, Trujillo Trujillo X3, Saavedra Molina A4, Huerta
Viera M3, Hernández-Hernadez L5
1 Facultad de Biología, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo,
[email protected]. 2 Coordinación General de Estudios de Posgrado,
Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. 3 Centro Universitario de
Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. 4 Instituto de Investigaciones
Químico-Biológicas, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. 5 Centro
Universitario
de
Ciencias
de
la
Salud,
Universidad
de
Guadalajara.
[email protected].
La fatiga se concibe como la reducción en la potencia física o como una
falla en la manutención de la producción de energía (Allen et al., 2008). Los
canales KATP han sido descritos en la membrana plasmática de células
cardiacas, -pancreáticas, neuronas, músculo liso y esquelético; asimismo en
la membrana interna mitocondrial (mitoKATP). García y cols. (2009), mostraron
que el mitoKATP juega un papel importante en la protección del músculo durante
la fatiga. De tal forma, la intensión del presente trabajo es determinar la
participación de los canales KATP mitocondriales en el proceso de fatiga
muscular explorando el efecto del Nicorandil (un activador selectivo del
mitoKATP) (Sato et al., 2000) y determinar las posibles vías de señalización
involucradas utilizando fármacos específicos inhibidores de la PKG (KT5823) y
la PKC (Staurosporina) sobre la tensión de músculo esquelético lento de pollo
en un modelo de fatiga in vitro.
Se utilizó el músculo Anterior Latissimus Dorsi (ALD) de pollos de la
variedad Arbor acres, de entre 1 y 3 semanas de edad los cuales fueron
sacrificados por decapitación. El músculo fue montado en una cámara de
registro experimental colocando su extremo proximal al fondo de la cámara y el
extremo distal al gancho de un transductor mecanoeléctrico (Grass FT03), el
cual a través de un amplificador CyberAmp 320 y a una interfase analógicadigital (Digidata 1322A) permitían adquirir la tensión generada por el músculo
en una computadora (Pentium 4) y un “software” de adquisición de datos
(AXOTAPE, PClamp 9.2). Se realizó un protocolo de fatiga mediante
sacudidas, el cual consistió en la estimulación eléctrica repetitiva (pulsos de
100 Volts, 300 ms de duración, frecuencia de 0.2 Hz). El fascículo se estimuló
hasta que la tensión disminuyó un 70% aproximadamente, en ese momento se
aplicó el fármaco de estudio durante 6 min para observar su efecto. Soluciones:
La solución Ginsborg normal contenía (en mM): NaCl: 167; KCl: 5; MgCl2: 2;
CaCl2: 5; Imidazol-Cl 2 mM; Dextrosa: 2 g/L (pH de 7.4). Se utilizaron
concentraciones de 10, 30 y 100 µM de Nicorandil, 1 µM de Staurosporina y 1
µM de KT5823.
Se obtuvo una curva dosis respuesta de Nicorandil, teniendo mayor
efecto con la concentración 10 µM al haberse incrementado la tensión
postfatiga en un 191.31 ± 42.66 % mientras que en presencia de Nicorandil con
KT5823 y Staurosporina no hay cambio (reducción) significativo con respecto al
efecto del Nicorandil, de tal forma que no hay inhibición de la apertura del
mitoKATP por parte de KT5823 y Staurosporina al aplicar 1 µM de ambos
fármacos.