Download ultimo congreso leon

ESTIMULACION ADRENERGICA EN REBANDAS DE CORAZÓN
EMBRIONARIO DE POLLO
Jiménez Medina J.A², Fiordelisio Coll T¹, González Gómez H². 1 Lab. de Fisiología
Comparada. Departamento de Recursos Naturales. 2 Taller de Biofísica de
Sistemas Excitables. Departamento de Física. Facultad de Ciencias. UNAM*
La función cardiaca requiere de la integración de varios procesos que se van
coordinando desde etapas muy tempranas del desarrollo embrionario:
organización cardiovascular coronaria, del tejido de conducción, tejido contráctil
auricular y ventricular, actividad marcapaso, así como regulación neurohumoral.
La inervación simpática y parasimpática son fundamentales para el funcionamiento
del corazón adulto de vertebrados, sin embargo se conoce que esta inervación
está ausente en el desarrollo embrionario temprano, no obstante existen
antecedentes de respuesta a agentes adrenérgicos en dichas etapas del
desarrollo cuando son aplicados al corazón de pollo, así como pueden encontrarse
antecedentes de respuesta en corazón embrionario de mamíferos. Hasta el
momento se ha estudiado la respuesta a agentes adrenérgicos en varios estadios
embrionarios de pollo, obteniéndola en células aisladas o explantes de corazón
embrionario.
Con el propósito de contribuir a caracterizar el desarrollo embrionario del corazón
de los vertebrados, y la organización de la respuesta a estimulación adrenérgica
en estadios tempranos del desarrollo, hemos empleado una preparación
organotípica o rebanadas de tejido cardiaco embrionario, ya presentada con
anterioridad por nuestro grupo, para visualizar y analizar los patrones de respuesta
al agonista isoproterenol (ISO) mediante técnicas de fluorescencia por variación
de los niveles del calcio intracelular. El colorante empleado, Fluo-4 con incubación
de 0.5 hr, ha mostrado una buena captación en rebanadas de 250 y 300 micras
de espesor. Las rebanadas se mantienen con perfusión de solución salina a 37ºC,
con constante burbujeo de carbógeno y en una platina también con temperatura
controlada. Las imágenes se obtienen mediante una cámara CCD intensificada y
un obturador reduce al mínimo el tiempo de foto-exposición. Hemos estudiado
hasta el momento rebanadas de corazones de embriones in ovo de 7 y 8 días. El
análisis incluye la visualización comparativa directa de las imágenes de
fluorescencia, secuencias de imágenes o películas, análisis comparativo de las
series de tiempo en regiones seleccionadas, usando para ello gráficas múltiples o
de rastreo y periodogramas. Las regiones seleccionadas incluyen a las aurículas,
los ventrículos y regiones nodales. Los resultados obtenidos hasta ahora, revelan
que el corazón embrionario de pollo es responsivo a dosis de 1 µmol de ISO en
dichos estadios. Dado que en ese momento del desarrollo embrionario, aun no se
han establecido las conexiones nerviosas, esta respuesta parece posible por la
expresión de receptores β adrenérgicos en etapas tempranas del corazón
embrionario de pollo, promovida por las propias células cardiacas.
*Proyecto parcialmente apoyado por PAPIIT-UNAM IN223310