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IDENTIFICACIÓN DE GENES Y PROGENITORES PARA CONFERIR RESISTENCIA A LAS BACTERIAS Y VIRUS MÁS NOCIVOS, A CULTIVARES DE INTERÉS EN CHILE Y JITOMATE Resumen ejecutivo El objetivo de este proyecto fue identificar progenitores, detectar y en su caso aislar genes de resistencia que permitieran generar variedades con resistencia a las enfermedades producidas por un patógeno o por infecciones mixtas más comunes en los cultivos de chile y jitomate. La metodología propuesta para el logro de ese objetivo estuvo en función de dos estrategias; a) búsqueda derivada de genes o marcadores moleculares de resistencia conocidos de otras especies, con lo cual se buscó tomar ventaja de la correspondencia genética existente entre las especies, y b) uso de la hibridación supresiva substractiva (SSH) para generar bibliotecas enriquecidas de fragmentos genómicos inducidos en plantas tolerantes o resistentes al ataque de mezclas de patógenos recurrentes en las regiones productoras de jitomate y chile de México. En ambas estrategias el requisito inicial fue la definición de las plantas modelo por confrontación del germoplasma de jitomate y chile con los patógenos en sus variantes o patotipos más virulentos. Para el análisis de interpretación de resultados se recurrió a los análisis estadísticos de varianza Fisher, documentación fotográfica de geles, placas radiográficas y comparación por Blast de las secuencias obtenidas con las bases de datos geonómicos tales como NBCI. La investigación se llevó a cabo en cuatro etapas. En la primera se realizaron 220 colectas de chile y 280 de jitomate en la región norte-centro del país, con base en dos criterios: a) materiales no representados en los bancos de germoplasma, y b) colectasen localidades con problemas fitosanitarios. En la segunda etapa se identificaron y aislaron los diferentes patógenos que se utilizaron en el desarrollo del estudio: razas de Xanthomonas campestris pv vesicatoria, importante para los programas de mejoramiento de jitomate y chile, así como para entender los factores ecológicos y patogénicos que influyen en la sensibilidad y/o resistencia a los bactericidas, particularmente en el caso de la zona hortícola de Sinaloa. En esta etapa se obtuvieron de cada patógeno las variantes o razas más distribuidas y agresivas, con el fin de detectar mejores opciones de resistencia. En las etapas tercera y cuarta se sometieron a un proceso de evaluación 163 accesiones de materiales criollos de chile a los virus tobacco mosaic virus (TMV), tobacco etch virus (TEV), alfalfa mosaic virus (AMV) y tomato spotted wilt virus (TSWV); se evaluaron 226 accesiones de jitomate a los virus cucumber mosaic virus (CMV), tobacco etch virus (TEV) y tomato spotted wilt virus (TSWV), así como 327 accesiones de chile a la bacteria Xanthomonas campestri pv vesicatoria (Doidge) Dye, y 342 accesiones de jitomate a la bacteria Xanthomonas campestris pv vesicatoria (Doidge) Dye. En la etapa tres se probaron cuando menos 10 poblaciones diferentes de chile y jitomate con cada uno de los patógenos y sus mezclas, y en la etapa cuatro se identificaron plantas de chile y jitomate que pudieran ser candidatas a progenitores utilizando como herramienta de auxilio los marcadores moleculares asociados a las resistencias buscadas. Como resultado de la primera etapa se establecieron las bases necesarias para proceder a la adecuada realización de las etapas siguientes. Como producto de la segunda etapa, el investigador obtuvo las variantes y las razas más peligrosas para la mayor parte de las regiones donde se cultivan chile y jitomate en México de CMV, TEV, TYLCV y Xantohomonas campestris pv vesicatoria. En las últimas dos etapas se detectaron fuentes y genes de resistencia a las bacterias y virus más importantes en jitomate y chile, con el fin de incorporarlas al proceso de obtención de variedades mejoradas; es decir, se detectaron en chiles y jitomates las fuentes de resistencia a los diferentes patógenos evaluados. Demanda o problemática que atiende Detectar fuentes y genes de resistencia a las bacterias y virus más importantes en jitomate y chile, para incorporarlas al proceso de obtención de variedades mejoradas. Estudiar la bacteria focal en ambas especies de plantas: Xanthomonas campestris pv. Vesicatoria; los virus en chile: tobacco mosaico virus (TMV), tobacco etch virus (TEV), alfalfa mosaic virus (AMV), tomato spolled wilt virus (TSWV); y en jitomate: tobacco etch virus (TEV), cucumber mosaic virus (CMV) y tomato spotted wilt virus (TSWV). Resultados obtenidos y/o descripción. Características de la tecnología generada Variantes y razas más peligrosas para la mayor parte de las regiones donde se cultivan chile y jitomate en México de CMV, TEV, TYLCV y Xanthomonas campestri pv vesicatoria. Plantas de chile resistentes a los virus TEV y CMV y a Xanthomonas campestri pv vesicatoria. Material genético de chile candidato a progenitores para conferir resistencia a los virus CMV, TEV, TYLCV y Xanthomonas campestri pv vesicatoria. Material genético de jitomate candidato a progenitores para conferir resistencia a TYLCV y Xanthomonas campestri pv vesicatoria. Impactos El chile es la hortaliza que más se siembra en el país, con una superficie estimada en poco más de 140 mil hectáreas cada año. El jitomate ingresa al país alrededor de 500 millones de dólares al año, por lo que es el producto primario que más contribuye en ese renglón a la economía de México. Contar con plantas de chile y de jitomate resistentes a diferentes virus como TEV, CMV y a Xanthomonas campestris pv vesicatoria ayuda a evitar riesgos, daños y pérdidas en jitomate y chile que son recurrentes en la mayor parte de las unidades de producción tanto a cielo abierto, como en sistemas protegidos. Costos estimados de la aplicación de los resultados y/o tecnología generada Para pensar en costos, se requiere considerar que llega a haber pérdidas hasta del 100% de las cosechas o se encuentran deterioros cuantificables en la calidad de los frutos. Adicionalmente el investigador estima que se usan de manera innecesaria al menos 2, 200 TM de pesticidas que sólo contaminan el ambiente y gravan los costos de los cultivos con aproximadamente un 25% adicional. Por otro lado, el diferencial en los rendimientos en chile y jitomate de nuestro país con algunos países, desarrollados o no, es de 100% o más. Independientemente de que puede haber efecto de labranza y manejo nutrimental en los cultivos, también el investigador observó importantes diferencias en el manejo fitosanitario aproximadamente un 25% adicional. Ámbito de aplicación Entidades del Centro y Noroeste del país. Información adicional o comentario Como acotación importante del investigador se incluye lo siguiente: se encontraron 20 accesiones de chile resistentes a cuatro diferentes tipos de virus; se registraron 16 accesiones de jitomate resistentes a tres diferentes tipos de virus; se cuenta con cuatro accesiones de chile resistentes a Xanthomonas campestris pv. Vesicatoria; se detectaron siete accesiones de jitomate resistentes a Xanthomonas campestris pv. Vesicatoria; existen dos accesiones de chile que mostraron resistencia a dos patógenos diferentes; se identificaron dos accesiones de jitomate que registraron resistencia a dos patógenos diferentes. Clave del proyecto: SAGARPA 2003-C01-49 Sistema Producto y/o línea estratégica de atención: sanidad vegetal Investigador: doctor SALVADOR MONTES HERNÁNDEZ Institución: INIFAP, Centro de Investigación Regional Centro, Campo Experimental Bajío