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Cinética de Inactivación Hipótesis: El agente de inactivación (Temperatura de calefacción), tiene igual chance de afectar a cada una de las bacterias. Se supone que no hay multiplicación celular. Se supone que inicialmente existen N 0 bacterias viables. Las bacterias que son inviables en un instante dado, permanecerán como tales en el futuro. Desarrollo: Consideremos subgrupos N i de bacterias, con i 1,2,..., cuyos respectivos lapsos de viabilidad son t i , con i 1,2,..., y ti 1 ti . Esto significa que transcurrido el lapso t i desde la iniciación del tratamiento, las N i bacterias pertenecientes al grupo respectivo pasarán a ser no-viables y permanecerán como tales en el futuro. Una distribución de bacterias viables en el tiempo, consiste en la asignación de un número N i de bacterias que pasarán de viables a no-viables para cada lapso t i . Representaremos una distribución particular N i , t i ; i 1,2,... de la siguiente manera Lapsos de viabilidad 0, ti , o simplemente ti Asignación (Distribución) del número de bacterias por lapso de viabilidad ti t1 N1 t2 N2 ………. ……………. ti Ni A cada distribución, le corresponderá una probabilidad de ocurra. Construiremos esta probabilidad de la siguiente manera: Supondremos que la probabilidad de que N i bacterias dejen de ser viables en el instante t i i 1, 2,..., , será proporcional al número de grupos distintos de N i , i 1,2,..., bacterias que puedan formarse a partir de las N 0 bacterias nativas iguales. Estos grupos son distintos en el sentido que difieren no en el número, sino en, por lo menos, una de las bacterias elegidas. Consideremos el grupo de N1 bacterias, que suponeos dejarán de ser viables una vez transcurrido el lapso t1 . Tenemos N 0 posibilidades diferentes de elegir la primera bacteria integrante del grupo. Cuando nos decidimos por una en particular, tendremos N0 1 posibilidades diferentes de elegir la segunda bacteria integrante del grupo, y así sucesivamente, hasta completar grupos de N1 bacterias. Cuántos grupos de N1 bacterias habremos formado con este procedimiento? La respuesta es N0 N0 1 N0 2 .... N0 N1 1 N0 ! N0 N1 ! grupos de N1 bacterias cada uno. El problema es que debido al procedimiento por el que han sido formados, estos grupos de N1 bacterias no necesariamente serán distinguibles ente sí, sino que varios (o muchos) constarán de las mismas bacterias elegidas en orden distinto. La pregunta relevante aquí es: de entre los N 0 ! / N 0 N1 ! grupos de N1 bacterias formados mediante las operaciones de selección, cuántos serán indistinguibles entre sí, difiriendo sólo en el orden de selección de sus componentes pero no en su contenido? . Dicho número corresponderá al número de permutaciones entre las N1 bacterias, es decir N1 ! : habrá N1 N1 1 N1 2 ....1 N1 ! maneras de formar (o secuencias que conducen a) grupos conteniendo las mismas N1 bacterias. El número de grupos distinguibles de N1 bacterias, que difieran en por lo menos uno de sus componentes será entonces N0 ! N 0 N1 ! N1 ! Para cada grupo formado de N1 bacterias, los grupos de N 2 bacterias se formaran a partir de las N0 N1 bacterias restantes que permanecen viables luego de transcurrido el lapso t1 . Repitiendo el razonamiento anterior, el número de grupos distinguibles de N 2 bacterias formados a partir de las N0 N1 será N 0 N1 ! N 0 N1 N 2 ! N 2 ! Si consideramos los grupos distintos de N1 ; N 2 ;… N i ; N 0 bacterias , la distribución N i , t i ; i 1,2,... podrá formarse de N 0 N1 ! N 0 N1 N 2 ! N 0! ... N 0 N 1 ! N 1! N 0 N 1 N 2 ! N 2 ! N 0 N 1 N 2 N 3 ! N 3 ! N0 ! Nj! j maneras diferentes, donde cada manera de formar la distribución difiere de otra, no en el número de bacterias N i que dejan de ser viables en el instante t i (o que tienen un lapso de viabilidad t i ) , sino en, por lo menos, una de las bacterias consideradas en cada grupo N i , asumiendo que éstas fuesen distinguibles de alguna manera. Supondremos que la probabilidad de una distribución será proporcional al número de maneras diferentes en que ésta puede ser formada, es decir PN i , t i ; i 1,2,... 1 N0 ! Nj! j donde es una constante de normalización. Cualquier distribución propuesta debe cumplir la condición N j N0 j Además, el tiempo medio de viabilidad de las bacterias es, para la misma distribución 1 N0 N j tj t j Recurriendo al método de los multiplicadores de Lagrange, el logaritmo natural de la probabilidad de la distribución puede escribirse, de acuerdo a las hipótesis hechas, de la siguiente manera ln PN i , t i ; i 1,2,... ln ln 1 1 N Nj! 0 j 1 ln ln N 0 ! ln N j !1 N j 0 N0 ! N j j N j j t j t 2 N j N 0 j t j t 2 N j N 0 j Con la aproximación de Stirling, podemos escribir ln N 0 ! N 0 ln N 0 N 0 ln N j ! N j ln N j N j de donde podemos concluir N i ln N ! N N j j i ln N i N i ln N i i Sustituyendo en la condición de extremo 1 ln PN i , t i ; i 1,2,... ln N i 1 t 2 0 N i N0 i A partir de la segunda igualdad de la ecuación anterior, tenemos ln N i 1 1 t 2 N0 i de donde podemos concluir Ni e 1 1 t N0 i Si imponemos la condición de que no habrá bacterias con lapsos de viabilidad (life span) suficientemente grandes, surge la condición 1 0 Si pensamos en una sucesión continua de lapsos de viabilidad, podemos escribir Nt e 1 1 t N0 Ahora bien, el conjunto inicial de bacterias, está formado por las bacterias con todos los posibles lapsos de viabilidad, por lo tanto N 0 dt e 0 1 1 t N0 N0 1 de donde se puede concluir 1 Sustituyendo, se tiene Nt e 1 t N0 El lapso medio de viabilidad estará dado por la expresión t N0 dt t e N0 0 t t t t N N0 N0 te dt e 0 0 t 0 a partir de la cual, obtenemos la relación N0 t y, por sustitución, la expresión del número de bacterias viabilidad t , es Nt N0 t e con lapso de t t El número de bacterias viables en un instante t posterior al instante inicial de la operación de esterilización t 0 es igual al númro de bacterias inicialmente viables, N 0 , menos el número de las que se tornaron no viables en el lapso 0, t , es decir t t t 1 N N 0 dt N t N 0 1 dt e t 0 t 0 N0 e t t Si hacemos kd 1 t podemos expresar el resultado obtenido en las siguientes formas N N0 e t t N0 e kd t donde N es el número de bacterias viables en el instante t , y k d es igual a la inversa del lapso de viabilidad promedio de las bacterias.