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Datos Generales
Nombre del
Proyecto
Diagnóstico molecular de Zika en pacientes con síntomas clínicos atendidos en el
Hospital Universitario de Neiva
Semillero
ERKLAREM
Área del
Proyecto
Ciencias de la Salud y el Deporte
Subárea del
Medicina
Proyecto
Tipo de
Proyecto
Proyecto de Investigación
Subtipo de
Proyecto
Investigación en Curso
Grado
6
Programa
Académico
MEDICINA
Email
[email protected]
Teléfono
3164681644
Nodo
Huila
Integrantes :
Este proyecto no tiene integrantes
Instituciones a las que pertenece :
[891180084-UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA]
Datos Específicos del Proyecto
Introducción
La infección, causada por un flavivirus transmitido por mosquitos del género Aedes, es
asintomática en cerca de un 80% de los casos. La enfermedad se presenta con exantema,
conjuntivitis y fiebre no muy elevada. Los síntomas duran entre 2 y 7 días. Por el momento, no
existen vacunas ni tratamientos específicos. El virus circula por África (origen), las Américas, Asia
y el Pacífico sub oriental. Se identificó por primera vez en Uganda, en 1947, en macacos de la
India, y en 1952 en humanos, en Uganda y Tanzania. Se ha observado que la epidemia de Zika en
general se produce luego de epizootias o epidemias de CHIKV. En ratones el virus es altamente
neurotrópico, causando degeneración neuronal, sin haberse aislado de otros tejidos. Se puede
transmitir en humanos por vía parental, sexual y por transfusión sanguínea. En la Polinesia francesa
en 2014 y en el Nordeste de Brasil en 2015 hubo un conglomerado de casos de microcefalia y
trastornos neurológicos en recién nacidos. Se ha informado el hallazgo del virus en tejido cerebral y
placentario de dos recién nacidos muertos 20 horas después y dos fetos cuyas madres habían
presentado signos de infección por Zika durante su embarazo. Esto constituye una emergencia
sanitaria internacional, y ya existen guías para la evaluación de infantes con posible infección
congénita. Las medidas de protección recomendadas son el control de los mosquitos y la
prevención de las picaduras en personas en riesgo, en especial las embarazadas.
Planteamiento del Problema
El diagnóstico eficiente y preciso del zika es de fundamental importancia para la atención clínica,
es decir, la detección temprana de casos graves, la confirmación de casos y el diagnóstico
diferencial con otras enfermedades infecciosas, actividades de vigilancia, control de brotes,
patogénesis, investigación académica, desarrollo de vacunas y pruebas clínicas. El diagnóstico se
hace principalmente por clínica, con los síntomas del paciente. Los síntomas son muy similares a
los de otras enfermedades que producen fiebre; por lo tanto el médico debe sospechar de
sarampión, rubeola, dengue y/o chikungunya. Por eso se hace importante comenzar a trabajar en
desarrollar pruebas de diagnóstico, que sea rápida, sensibles y especificas
Objetivo General
Estandarización de la técnica de diagnóstico molecular de ZIKA
Objetivo Específicos
? Determinar la frecuencia de infección de ZIKA ? Sustentar la estandarización del método
diagnóstico molecular de reacción en cadena polimerasa en tiempo real patógeno-específico como
prueba complementaria del diagnóstico de ZIKA
Referente Teórico
El virus Zika es un virus transmitido por mosquitos del género Flavivirus, familia Flaviviridae. Fue
aislado por primera vez en 1947 a partir de un mono centinela febril en el bosque Zika en Uganda
durante un proyecto de investigación de virus de la fiebre amarilla [Dick et al., 1952]. ZIKA es
endémica de África oriental y occidental, causando el auto esporádica limitación de la enfermedad
febril en los seres humanos [Macnamara, 1954; Fagbami, 1979; McCrae y Kirya de 1982]. El virus
ha emigrado a través de Asia, con evidencia serológica de infección humana en Malasia en 1966
[Marchette et al., 1969]. Desde entonces, la evidencia de ZIKA que causa una enfermedad febril en
los seres humanos se ha identificado serológicamente en la India, Indonesia y Filipinas [Rao, 1971;
Olson et al., 1981]. Los principales vectores para ZIKA son los mosquitos del género Aedes
africanus incluyendo entre otros en África, y A. aegypti en Malasia [Marchette et al., 1969;
Fagbami, 1979; McCrae y Kirya de 1982]. Se cree que los primates no humanos pueden ser
reservorios silvestres, aunque otros reservorios no han sido excluidos [Hayes, 2009]. ZIKA se
mantuvo relativamente desconocido hasta 2007 cuando causó un gran brote en Yap y las islas
circundantes en los Estados Federados de Micronesia [Lanciotti et al., 2008; Duffy et al., 2009;
Hayes, 2009]. Inicialmente este brote se diagnostica erróneamente como dengue, sin embargo,
serológicos y estudios diagnósticos moleculares implican a ZIKA como la causa. Más del 70% de
los habitantes de Yap se vieron afectados. El síndrome de mayor frecuencia fue la enfermedad
eruptiva febril con artralgia, mialgia, dolor de cabeza, o inyección conjuntival. No ha habido casos
documentados de encefalitis o enfermedad hemorrágica. Más recientemente, se propuso la
transmisión sexual del ZIKA entre una pareja heterosexual, sugiriendo una nueva ruta de
transmisión de estos virus adaptables [Foy et al., 2011].
Metodología
Muestra: Previo consentimiento informado se colectaran muestras de sangre procedentes de
pacientes a los cuales se les ha comprobado o diagnosticado ZIKA por sintomatología clínica en el
Hospital Universitario Hernando Moncaleano Perdomo. Extracción de RNA: La extracción de
RNA se realizará con el kit comercial de (QIAamp RNA mini Kit, Qiagen) según el protocolo de la
misma marca comercial, las muestras de sangre se guardaran a -80 °C RT PCR Y qPCR Se
utilizaran el gen NS5 como diana para los cebadores. Las secuencias de MR766 (número de acceso
GenBank AY632535.2) y ZIKA CE 2007 (número de acceso GenBank EU545988.1) fueron
alineados utilizando el software Clustal W (http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalw2/) y un par de
cebadores con homología completa a ambas secuencias se diseñara.
Resultados
Conclusiones
Bibliografía
? Dick GW, Kitchen SF, Haddow AJ. 1952. Zika virus. I. Isolations and serological specificity.
Trans R Soc Trop Med Hyg 46:509? 520. ? Duffy MR, Chen TH, Hancock WT, Powers AM, Kool
JL, Lanciotti RS, Pretrick M, Marfel M, Holzbauer S, Dubray C, Guillaumot L, Griggs A, Bel M,
Lambert AJ, Laven J, Kosoy O, Panella A, Biggerstaff BJ, Fischer M, Hayes EB. 2009. Zika virus
outbreak on Yap Island, Federated States of Micronesia. N Engl J Med 360:2536?2543. ? Fagbami
AH. 1979. Zika virus infections in Nigeria: Virological and seroepidemiological investigations in
Oyo State. J Hyg (Lond) 83:213?219. ? Faye O, Faye O, Dupressoir A, Weidmann M, Ndiaye M,
Alpha Sall A. 2008. One-step RT-PCR for detection of Zika virus. J Clin Virol 43:96?101. ? Foy
BD, Kobylinski KC, Chilson Foy JL, Blitvich BJ, Travassos da Rosa A, Haddow AD, Lanciotti
RS, Tesh RB. 2011. Probable nonvector-borne transmission of Zika virus, Colorado, USA. Emerg
Infect Dis 17:880?882.