Download División de Ciencias Biológicas y de la Salud Ingeniería Bioquímica

División de Ciencias Biológicas y de la Salud
Ingeniería Bioquímica Industrial
Ingeniería Enzimática
1. Para la enzima lipasa de Pseudomonas fluorscenes, se realizaron experimentos en
un sistema de dos fases para la hidrólisis de tributirina a pH 7.5 y una concentración
de sustrato inicial de 33 mg mL-1 para determinar la kcat a diferentes temperaturas.
Calcula la energía de activación, EA, de la reacción enzimática, recuerda que
R=1.987 cal/(mol ºK).
T
kcat
(ºC)
(s-1)
20
0.4
30
0.9
40
1.8
50
2.7
60
2.3
70
1.8
Solución:
T
kcat
T
1/T
Ln(kcat)
(ºC)
(s-1)
(ºK)
20
0.4
293
0.00341297
-0.91629073
30
0.9
303
0.00330033
-0.10536052
40
1.8
313
0.00319489
0.58778666
50
2.7
323
0.00309598
0.99325177
Graficando Ln (kcat) versus 1/T y ajustando los datos a una línea recta
m = - 6,098.5
cal
E a  m R   6,098.51.987   12,117.71
mol
2. Para la enzima piruvato quinasa, se realizaron experimentos a pH 8.5 y una
concentración de sustrato inicial de 10 mM para determinar la kcat a diferentes
temperaturas. Calcula la energía de activación, EA, de la reacción enzimática, recuerda
que R=1.987 cal/(mol ºK).
T
kcat
(ºC)
(s-1)
10
0.39
15
1.32
20
7.13
25
17.82
30
19.80
35
17.82
40
7.13
Solución:
T
(ºC)
10
15
20
25
30
kcat
(s-1)
0.39
1.32
7.13
17.82
19.80
T
(ºK)
283
288
293
298
303
1/T
Ln(kcat)
0.00353357
0.00347222
0.00341297
0.0033557
0.00330033
-0.94160854
0.27763174
1.96431123
2.88032142
2.98568194
Graficando Ln (kcat) versus 1/T y ajustando los datos a una línea recta
m = - 18,017
cal
E a  m R   18,017 1.987   35,799.78
mol