Download Transformacion E.coli revisado2015 informe

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Nota: Los procedimientos, materiales y figuras utilizadas en este experimento provienen de EDVOTECK® Bethesda, MD
Nota: Envía como informe la parte bajo las líneas entrecortas únicamente
-------------------------------------------------------------------------------------------Informe de laboratorio
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Transformación de E. coli
Nombre: _______________________________
Número de estudiante: ___________________
Fecha:
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Hipótesis: Redacta una hipótesis basada en las variables del experimento
(¿Qué esperas que pase con las bacterias transformadas con el plasmidio?
Piensa en lo que contiene el plasmidio).
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Resultados y Análisis
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A. Resultados
1. Inserta la foto de las placas en este espacio e identifica cada una:
B. Determinación de la eficiencia de transformación
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1. Cuenta el número de las colonias en la placa Experimental: AMP/X-GAL
rotulada DNA. Para evitar errores marca el fondo de la placa por fuera
con un marcador. Número de colonias azules: ___________
2. Determina la eficiencia de transformación utilizando la siguiente fórmula:
Número de
transformantes
μg de ADN
X
vol. final al
recobro (ml) =
vol. Sembrado
Número de
transformantes
por μg
Por ejemplo, si observas 40 colonias calcula como sigue:
40
transformantes
0.025 μg
X
1 ml
0.2 ml
=
8,000 = 8 x 103
transformantes/μg
Eficiencia de transformación: _________________________
C. Contesta
1. ¿Por qué crecen tantas células en la placa X-GAL (control 1)? ¿De qué
color son? ¿Por qué?
2. ¿Por qué las células competentes que no recibieron ADN (control) no
crecieron en las placas que contienen ampicilina?
3. ¿Cuántas colonias azules crecieron en la placa experimental? ¿Por qué
son azules?
4. ¿Recobraste colonias satélites en la placa experimental? ¿Por qué son
blancas?
5. Los antibióticos kanamicina y tetraciclina interfieren con traducción al
pegarse a los ribosomas. Células competentes de E.coli pueden ser
transformadas con plasmidios que codifican para resistencia para esas
drogas. Cuando las células se siembran en agar con kanamicina o
tetraciclina no se encuentran células satélites. Aumentando el tiempo de
incubación y el número de células no dan lugar a satélites. ¿Por qué?
6. Analiza tus resultados y acepta o rechaza tu hipótesis.
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Avalúo
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A. Marca en la tabla que sigue tu autoevaluación de este laboratorio
antes y después del experimento.
Destrezas
Antes
Autoevaluación
Después
1. Provocar competencia en bacterias.
2. Calcular eficiencia de transformación.
Suma de valores antes y después
Promedio = Suma / 2
B. Escribe una reflexión sobre lo que dominas y no dominas y cuánto
ganaste en destrezas durante el taller.
C. Describe en tus propias palabras y en forma resumida cada una de
las destrezas aprendidas.
YRG: UIPR 8-08rev
MLG: 22-10-15