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---------------------------------------------------------------------------------------------------------1- Se tiene una mezcla de cuatro proteínas:
P A: 120.000 Da pI = 5.8
P B: 120.000 Da, pI = 7.0
P C: 160.000 Da pI = 9.0
P D: 80.000 Da, pI = 6.0
Que técnicas de purificación utilizaria para purificar a homogeneidad estas 4 proteínas?
2- Desarrolle un esquema de purificación para aislar y purificar una Proteína A (a
homogeneidad electroforética) de una mezcla de proteínas (ver tabla). Indique que
contaminantes eliminaría y como evaluaría la pureza lograda en cada paso de
purificación (utilice al menos dos técnicas cromatográficas en el proceso de
purificación).
Proteínas
Proteína A
Proteína B
Proteína C
Proteína D
Proteína E
hidrofobicidad
Media
Baja
Media
Alta
Media
pI
5,5
4,4
3,5
3,5
7
PM
40000
42000
90000
47000
15000
---------------------------------------------------------------------------------------------------------3- Desarrolle un proceso óptimo para purificar la Proteína A (a homogeneidad
electroforética) de la mezcla de proteínas descripta en la siguiente tabla. Indique que
contaminantes eliminaría en cada paso de purificación y como evaluaría el grado de
purificación (utilice al menos dos técnicas cromatográficas)
Proteínas
Proteína A
Proteína B
Proteína C
Proteína D
Proteína E
hidrofobicidad
Alta
Baja
Alta
Baja
Alta
pI
5
4
8
4
7,8
PM
40000
76000
80000
47000
23000
4- Cómo realizaría la extracción de una invertasa ácida soluble a partir de hojas de
Ricinus communis? Que problemas se podrían plantear durante la extracción?
5- Explique brevemente como determinaría el efecto del pH sobre la velocidad de una
reacción de hidrólisis de la sacarosa por acción de una invertasa.
6- Cuáles son los factores que afectan la velocidad de una reacción catalizada por
enzima? Describa brevemente cada caso.
7- Explique brevemente como determinaría experimentalmente si se encuentra frente a
una enzima alostérica.
8- Qué rango de concentración de sustrato utilizaría para determinar el efecto del pH
sobre la velocidad de la reacción? Justifique su respuesta.
9- Indique que factores afectan el km.
10- Explique los términos “regulación alostérica y regulación por modificación
covalente”. Ejemplos
11- Explique el término: conformación nativa y desnaturalización de una enzima
12-. Cuál de las siguientes afirmaciones es correcta? La representación gráfica de 1/v en
función de 1/s permite determinar:
a) solamente Vm
b) Vm y Km
c) Solamente la cantidad de producto formado
d) Solamente Km
13- Para determinar Km hay que medir la velocidad inicial variando:
a) la concentración de enzima
b) la concentración de sustrato
c) concentración de enzima y sustrato
14- Para calcular matemáticamente la velocidad inicial de una reacción catalizada
por una enzima, a una concentración de enzima dada, necesitamos conocer:
a) Km y Vmáx
b) Km, Vmáx y [S]
c) Vmáx y [S]
d) Km y [E]
15-Defina el término velocidad de reacción
16-Defina el término unidades de enzima
17- Interpretando una curva de cinética enzimática de forma "S"
La gráfica muestra los resultados de la velocidad de reacción
frente a la concentración del sustrato para:
A. una enzima en presencia de un inhibidor competitivo
B. una e nzima en presencia de un inhibidor no-competitivo
C. una enzima alostérica
D. una e nzima en presencia de un inhibidor acompetitivo
E. dos enzimas compitiendo por el mismo sustrato
Interpretación de una cinética enzimática michaeliana
Esta gráfica representa la variación de la velocidad de reacción
frente a la concentración del sustrato; la razón por la que la curva
alcanza una meseta y la velocidad no sigue aumentando para
mayores concentraciones de sustrato es porque:
A. El centro activo del enzima está saturado de sustrato.
B. Hay un inhibidor competitivo presente
C. Hay un inhibidor no competitivo presente
D. La enzima alostérica está bloqueada en una conformación inactiva
E. Todo el sustrato ha sido convertido a producto
1- Indique las principales funciones de las vacuolas y de los peroxisomas en las
células vegetales.
2- Describa brevemente la composición química de la pared celular e indique lugar
de biosíntesis de los principales constituyentes.
3- Como participa el Complejo de Golgi y el retículo endoplasmático en el
metabolismo de una célula vegetal?
4- Cómo participa las vacuolas en el metabolismo celular.
5- Rol de los glioxisomas en el metabolismo de los lípidos en las células vegetales.
6- Explique brevemente esta figura del sistema de endomembranas de una célula
vegetal:
7- Explique brevemente esta figura
8- Explique brevemente esta Figura.
9- Explique brevemente que son las extensinas.
10- Las ligninas son componentes de la pared celular cuya síntesis se incrementa
cuando el tejido vegetal sufre una lesión. Indique su naturaleza química y lugar
de biosíntesis en la célula vegetal.
11- Explique brevemente el siguiente esquema