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CARACTERIZACIÓN FUNCIONAL DE LAS DOS VARIANTES POLIMÓRFICAS K656N DE LA ISOFORMA LARGA DEL RECEPTOR A LEPTINA HUMANO Angel-Chávez LI1, Tene-Pérez CE1, Castro E2 ([email protected]) 1 Facultad de Medicina, Universidad de Colima. 2 Centro Universitario de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Colima. Introducción: La leptina es una hormona encargada de controlar el apetito y el gasto energético. Diversos estudios aportan evidencia de cómo esta hormona está involucrada en el metabolismo de ácidos grasos y glucosa. En un estudio previo encontramos una asociación entre la presencia del alelo “N” del polimorfismo K656N en el gen LEPR, y bajos niveles de grasa corporal, perímetros corporales, pliegues cutáneos y altos niveles de colesterol HDL. También se tiene evidencia de cómo la presencia de mutaciones en este gen alteran su cascada de señalización (vía JAK – STAT) y la capacidad de unión de la leptina a su receptor; por ello resulta interesante conocer si la presencia de esta variante polimórfica (alelo N), altera la cascada de señalización de este receptor. Métodos: Mediante un sistema de mutagénesis, se generó el receptor a leptina portador del N en el residuo 656 (variante). Se transfectaron de manera estable cultivos celulares de la línea HEK 293 con ambos receptores “silvestre” y “variante”, estimulándose con 100 ng/mL de leptina humana por 15 min. De esos cultivos se obtuvieron lisados celulares para la evaluación de expresión de ARNm, proteínas totales y fosforiladas para JAK2. STAT3 y Ob-R mediante RT-PCR en tiempo real y Western blot respectivamente. Resultados: Luego de estimular los distintos cultivos celulares y comparar ambos grupos, no se documentaron diferencias tanto en los niveles de expresión de ARNm para JAK2 y STAT3, así como en la presencia de las proteínas JAK2, STAT3, Ob-R, pSTAT3 y pOb-R. Solo encontrándose menores niveles de expresión de RNAm para el receptor a leptina en el grupo silvestre y menores niveles de proteína JAK2 fosforilada (pJAK2) en el grupo variante. Conclusión: La presencia de la variante polimórfica K656N del gen LEPR está asociada a una reducción en la capacidad funcional del receptor para activar JAK2. Trabajo apoyado por Fondos Mixtos CONACYT-COLIMA clave 2008-C01-81049.
