Transcript
Hivebench Aislamiento células tumores de tejido Created by iprieto Muestras (hepatocarcinomas de ratón Ki para el gen URI (oncogen)) *Stock de colagenasa III a 0.1mg/ml (disuelta en HBSS). La concentración de uso es de 0.02mg/ml. 1) Añadir el DMEM a cada tubo de 15ml (4ml por tubo) 2) Añadir la L-glut (1%), la PS (1%), el FBS (10%). (*) tanto el DMEM como el resto de componentes del medio, previamente atemperados 3) Lavar la pieza de tejido con HBSS 4) Trocear con cuchilla, sujetando con las pinzas (se puede hacer en una P6, en placa petri...) 5) Meter los trozos en el tubo de 15ml con el medio 6) Añadir la colagenasa (1ml por tubo) (*) mantener la colagenasa III a 4ºC hasta que se vaya a usar 7) Sellar los tubos con parafilm y dejar tumbados en el incubador a 37ºC o/n